J2 GPC柱装填指导

此份说明包括两部分 一为此份说明包括两部分 一为 J2 Scientific 公司公司 GPC 使用注意事项 使用注意事项 二为二为 J2 Scientific 公司公司 GPC 柱装填指导 柱装填指导 内容仅供参考 内容仅供参考 GPC 使用注意事项 1 样品在进样前必须经 0 45u 的微孔膜过滤 2 含水量大的样品在进样前须脱水 3 对于快速柱来说 脂肪耐受力为 0 5 克 传统柱为 1 克 那么在进样前请以此为 根据来计算取样量 例如某种样品的脂肪含量为 20 那么称样量请不要大于 2 5 克 4 在完成前面的样品处理后 如液液萃取 要将样品体系转换成 GPC 所用的流动相 一般来说除石油醚外 其它基质如丙酮 必须进行这样的转换 而如果采用乙酸 乙酯这类与水互溶的溶剂进行萃取 最好过无水硫酸钠脱水 如果样品溶剂无法 进行转换 那么不同的溶剂总量不得大于进样量的 10 5 GPC 柱要求流动相与柱子规格一致 请不要随意变更流动相的比例及组成 6 系统主要采用尼龙接头 在连接时适当拧紧即可 过度用力会造成螺纹损坏 7 PTFE 的连接管比较脆 不可折成死弯 并在移动仪器时小心 8 严禁使用酸 碱性流动相 严禁使用水做为流动相 严禁使用缓冲盐 9 流动相最好每次配制的量够用 如果放置时间过长 最好重新配制 对于乙酸乙 酯来说长时间放置会吸收水分 二氯甲烷见光分解后会产生盐酸 这些都非常不 利于 GPC 分析 10 如果有其它不明事项 请咨询我公司工程师 请勿自行尝试 二 GPC 柱装填指导 一根 GPC 柱如果维护好的话 那么样品重现性会更好 柱效会比较高 寿命也会 更长 通常 GPC 柱处在流动相保护当中 但如果长时间停机 虽然我们有柱切换阀对 柱子进行保护 一般来说柱子不会出现问题 但还是有报告柱子当中的流动相会跑掉 造成柱子变干 那么此时如果开机后立刻用大流速平衡柱子 会造成柱内压力不匀 造成柱子损坏 那么此时需要先用 2ml min 的小流速平衡 10 分钟 再使用常规流速 并注意观察柱压的变化 直到柱压稳定并在正常的 9 13psi 之间即可进行分析 一根柱在最初的使用当中 柱压一般在 9 13 仅参考 而 12psi 以下的柱压都可以 视做正常 但要注意方法的校准 当柱压第一次超过 12psi 时 将柱子以 0 5ml min 的流速反洗 1 小时可以起到一定的清洗作用 在反向清洗时 请将出口直接接到废液 而不要再进入系统管线 如果反洗后压力仍然过高 则应将柱子重新装填 一般来说柱子重新装填建议采用全新的填料 当然也可以尝试将旧填料反复清洗 后再装入 但寿命一般不会太久 柱子的重新装填 请确认以下零件齐备 因柱子的不同 货号 可能会不同 如快速柱的密封环和传统柱的密封环其货号和大小都不一样 在订货时 请先确认 另 建议建议在重新装柱时更换密封环 图中 4 号 避免密封不严 柱子漏液 1 Frit SS 20 m Glass Column FR506A 筛板 2 O Ring Silicone Encapsulated CO408A O 型圈 3 Bed Support Holder Glass Column CO635A 4 Seal Teflon CO422A 密封环 5 Plunger Long Glass Column CO300A 柱塞杆 6 Collar Glass Column Delrin CO305 7 Cone Compression CO432A 如果发现零件不全请立即与我公司联系订购事宜 装填步骤 1 在确定以上零件齐备的状态下 请准 备以下必须的工具 铁架台 长颈漏斗 250ML 烧杯两只 玻璃棒一只 吸管一只 适量的流动相 以及浸泡过夜的填料 对 快速柱来说 秤取 22g 填料 然后加入 100ml 左右 1 1 的乙酸乙酯环己烷 注意 加入的流动相有时候不一定是乙酸乙酯环己烷 2 将柱两端的四只螺母取下 就可以将两端的封套取下 将柱子的出入口的管线放置 在烧杯中 用手握紧柱塞中部反时针将其旋松一圈至两圈即可反时针将其旋松一圈至两圈即可 这时柱塞就可以从玻 璃柱拨出 将两个柱塞全部取出后 向玻璃管中加适当流动相并用玻璃棒搅动原有的 填料 将其取出 并将右图中的部件用流动相清洗 避免部件上粘附流动相 并检查 黑色螺丝是否拧紧 避免漏液 3 反复清洗玻璃管 直到玻璃管壁上不再粘有填料 将一个柱塞装好 之后可将柱塞 杆顺时针旋转 起到密封的作用 否则可能会漏液 把玻璃管垂直夹在铁架台上 装好柱塞的一端向下 考虑到安全 可以将铁架台整个放入到纸箱内 这样 即使柱子从铁架台滑落也不易摔碎 注意 将柱塞装 进玻璃管时 可在柱塞和玻璃管内壁上用流动相浸润 这样才能将柱塞较顺利装进玻璃管 4 将准备好的填料经漏斗倒入玻璃管中 并用流动相冲洗烧杯和玻璃棒 及玻璃管内 壁 待玻璃管内壁没有填料后 等待流动相距离柱床一厘米左右 将另一根柱塞装入 推至柱床处旋紧 小心筛板掉下 若筛板很容易掉下 请考虑 待柱子中流动相基本 快干时 水平或者稍微倾斜装入柱塞 否则填料会随着流动相倒出来 在取出和装入 柱塞时 请沿柱子轴向均匀用力 不要向其它方向摇晃以免损坏玻璃柱管 如发现 CO422A 已经损坏 请予以更换 5 重力装填的柱子在压力系统中需要重新调整 将柱子接入系统 2ML min 的流速下 检查是否有泄漏 如发现有泄漏请重复 2 4 步骤 随后将流速逐渐加大至分析流速 一般为 4 7ml min 待柱压稳定后检查柱床是否被压缩 在被压缩的位置做好标记 是否被压缩 在被压缩的位置做好标记 停泵 将柱子的一端与大气联通 旋松柱塞 调整柱床长度至刚才的标记即可 停泵 将柱子的一端与大气联通 旋松柱塞 调整柱床长度至刚才的标记即可 6 运行标准品与原来的谱图进行比对 如发现保留时间有所漂移 则需要重新调整方 法 注意 无论是新购买的柱子还是自己装填的柱子 在两个柱塞杆位置处都会有标记线 注意 无论是新购买的柱子还是自己装填的柱