含量和有关物质方法学验证方案

1 7 1 一般项目方法学验证方案一般项目方法学验证方案 表一表一 原料药检测项目及方法学验证方案原料药检测项目及方法学验证方案 名称名称检测项目检测项目方法学验证方法学验证 起始原料性状 溶解度 鉴别 比旋度 手性中心 干燥失重 炽灼 残渣 残留溶剂 重金属 有 关物质 含量 残留溶剂 有关物质 含量 中间体性状 有关物质 纯度有关物质 纯度 API性状 溶解度 引湿性 熔点 比旋度 手性中心 鉴别 干 燥失重或水分 硫酸盐 氯化 物 重金属 炽灼残渣 残留 溶剂 粒度 晶型 有关物质 含量 残留溶剂 粒度 有关物质 含量 表二表二 片剂检测项目及方法学验证方案片剂检测项目及方法学验证方案 名称名称检测项目检测项目方法学验证方法学验证 片剂性状 鉴别 水分 重量差异 有关物质 溶出度 含量均匀 度 含量 微生物限度 有关物质 溶出度 含量均匀 度 含量 微生物限度 2 7 2 表三表三 有关物质方法学验证内容有关物质方法学验证内容 名称名称有关物质色谱条件有关物质色谱条件 摸索摸索 有关物质方法学验证有关物质方法学验证HPLC 起始原料检测波长的初选 分离度 检测波长 的确定 分离度 仪器精密度 LOD 溶液稳定性 空白干扰 不加校正因子的主成 分自身对照法 中间体检测波长的初选 分离度 检测波长 的确定 分离度 仪器精密度 LOD 溶液稳定性 空白干扰 面积归一化法 分离度 强制降解试验 仪器精密度 LOD 溶液稳定性 空白干扰 耐用性 不加校正因子的主成 分自身对照法 分离度 强制降解试验 系统适用性 仪器精密 度 LOD LOQ 线 性 溶液稳定性 空白 干扰 耐用性 加校正因子的主成分 自身对照法 API检测波长的初选 分离度 检测波长 的确定 分离度 强制降解试验 系统适用性 仪器精密 度 方法精密度 中间 精密度 溶液稳定性 空白干扰 LOD LOQ 线性 外标法 3 7 3 回收率 表四表四 有关物质色谱条件摸索有关物质色谱条件摸索 名称名称试验内容试验内容备注备注 检测波长的初选分别取各杂质及供试品加甲醇 或乙腈 溶解 并稀释制成各约含 XXug ml 一般 10ug ml 的溶液 进行 UV 扫描 200nm 400nm 溶剂 能溶解供试品或各杂质的单一溶剂 可向合成咨询溶剂及供试品或各杂质的溶 解情况 浓度 吸光度读数以在 0 3 0 7 之间为宜 色谱条件摸索 流动 相 色谱柱的摸索 先查文献或各国药典API 的保留时间一般在 5 15min 主峰峰型 好 理论板数 5000 以上 API 的配制浓度 根据扫描结果 分离度分别取各杂质及供试品配成一定浓度 分别进 样 分离度溶液 配制成含 API 的浓度及各杂质 浓度为 1 API 的有关物质测定浓度 进 6 针 杂质与主峰的分离度应大于 1 5 检测波长的确定在流动相条件下进行 UV 扫描 4 7 4 表五表五 有关物质方法学验证具体内容有关物质方法学验证具体内容 试验内容溶液配制方法溶液配制份数进样针数评定标准备注 系统适用性分别取供试品 各杂质适量 加流动相超声溶解 并稀释 配制成约含供试品 XXmg ml 和含杂质各 1 相当于供 试品浓度 XXmg ml 的混合 溶液作为系统适用性溶液 供试液 1 份进 6 针杂质峰峰面积 RSD 2 0 保留时间 RSD 1 0 杂质峰的拖尾因子 2 0 分离度及理论塔板数应符合质 量标准的规定 杂质为订入标准中的 杂质 方法专属性 1精密量取流动相供试液 1 份每份各 1 针空白溶剂应无干扰 精密度在规定的测试条件下 同一均质供试品 经多次取样进行一系列检测所得结果之间的接近程度 离散程度 自身对照液 1 份进 6 针峰面积 RSD 2 0 仪器精密度供试液及自身对照液 供试液仪器精密度供试液 1 份 进 6 针峰面积 RSD 2 0 保留时间 RSD 1 0 检测限供试品或杂质适量 用流动 相溶解并逐级稀释 供试品溶液 1 份检测限 2 针 S N 3 或 2 研究的所有杂质 定量限供试品或杂质适量 用流动 相溶解并逐级稀释 供试品溶液 1 份定量限 6 针 S N 10 主成分及杂质峰保留 时间的相对标准差应不大于 2 0 峰面积的相对标准差应 不大于 5 0 外标法测定的杂质 溶液稳定性供试液供试液 1 份0 1 2 4 6 主成分的含量变化的绝对值 5 7 5 8 24 小时各进 1 针 2 0 杂质含量的绝对值在 0 1 以 内 并不得出现新的大于报告限度 的杂质 峰面积及峰面积的归一化含量 调流动相 pH 变化 0 2 调流动相配比变化 5 柱温 5 如有柱温 不同 批号 色谱柱 流速相对值变化 20 耐用性供试液 系统适用性溶液 缓冲液中盐的浓度 10 1 份供试液和 1 份系统 适用性溶液 各条件下 进 2 针 主峰的拖尾因子不得大于 2 0 主峰与杂质峰必须达到基线分 离 主峰与杂质峰分离度符合 质量标准 各条件下的峰面积 RSD 符合 规定 杂质含量的绝对值在 0 1 以 内 方法精密度供试液 杂质对照品溶液 供试液 6 份 杂质对照品溶液 1 份 供试品进 1 针 杂质对照品溶液进 3 针 报告限以上的杂质个数一致 外标法计算杂质的含量 RSD 不得大于 15 中间精密度供试液 杂质对照品溶液 供试液 6 份 另一个人员 不同仪器 不同时间 杂质对照品溶液 1 份 供试品进 1 针 杂质对照品溶液进 6 针 报告限以上的杂质个数一致 外标法计算杂质的含量 12 个 数据 RSD 不得大于 20 线性不同浓度的各杂质对照品溶 液 至少 5 个浓度 LOQ 限度 的 150 各进 2 针相关系数 R 不得小于 0 9990 Y 轴截距应在 100 响 应值的 25 以内 响应因子的 相对标准差应不大于 10 回收率供试液 杂质对照品溶液 供试液 9 份 三个浓度 50 限度 120 各 3 份 供试液各进 2 针 杂质对照品进 6 针 各浓度下的平均回收率应在 80 120 低浓度为定量限 6 7 6 杂质对照品溶液 1 份放宽至 70 130 RSD 不大于 10 0 强制降解