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文档简介

菊花的组织培养 通过必修课的学习 我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的 那么 有没有不用种子来培育植物的方法呢 组织培养 专题3 植物组织培养技术 课题一菊花的组织培养 一 基础知识 1 植物的组织培养的过程 1 植物组织培养的原理 植物细胞具有全能性 定义 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能 原理 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质 都有发育成为完整个体所必需的全部基因 全能性的比较 受精卵 生殖细胞 体细胞 植物体细胞 动物体细胞 离体的植物器官 组织 细胞 愈伤组织 根芽 植物体 2 植物组织培养过程 细胞的分化 外植体 从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官 相关概念 脱分化 再分化 愈伤组织 细胞排列疏松而无规则 是高度液泡化的 成无定形状态的薄壁细胞 人参的愈伤组织 2 影响植物组织培养的因素 1 植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄 保存时间的长短会影响实验结果 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 2 不同的离体组织和细胞对营养 环境等条件的要求相对特殊 需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括 A 大量元素 N P S K Ca Mg等 B 微量元素 B Mn Cu Zn Fe Mo I Co等 常用的植物激素 生长素 细胞分裂素和赤霉素 生长素类 2 4 二氯苯氧乙酸 2 4 D 吲哚乙酸 IAA 萘乙酸 NAA 吲哚丁酸 IBA 细胞分裂素类 激动素 KT 6 苄基嘌呤 6 BA 玉米素 ZT 赤霉素类 赤霉酸 GA3 3 植物激素的影响 生长素和细胞分裂素作用 植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂 脱分化和再分化的关键性激素 在生长素存在的情况下 细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 有利于根的分化 有利于芽的分化 抑制根的分化 促进愈伤组织生长 生长素和细胞分裂素同时使用 用量的比例对植物细胞发育方向的影响 4 pH 温度 光照 pH控制在5 8左右 温度控制在18 22 C 每日用日光灯照射12h 植物组织培养过程 离体组织或细胞 植物体 细胞分裂素 生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 生长素 植物细胞培养 不需要光 需要光 离体 3 植物组织培养必要条件 一定的营养物质 激素和其他外界条件 整个过程必须在无菌条件下进行 1 培育无病毒植株 2 培养紫草愈伤组织 提取紫草素 治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料 4 基因工程中亦需用到植物组织培养的方法 4 植物组织培养的应用 3 诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构 包裹上人造种皮 制成人工种子 可以解决有些作物品种繁殖能力差 结子困难或发芽率低等问题 人工种子 二 实验操作 一 制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分 实验室一般使用4 C保存配制好的培养基母液来制备 2 配置培养基 分装到锥形瓶中 每瓶分装50ml或100ml 配制培养液 调PH 培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易 因此不必添加植物激素 3 灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 1 选材 菊花茎段 取生长旺盛的嫩枝 二 外植体消毒 2 消毒 流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉 用软刷轻轻刷洗 刷洗后在流水下冲洗20min左右 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分 放入体积分数为70 的酒精中摇动2 3次 持续6 7s 立即将外植体取出 在无菌水中清洗 消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分 放入质量分数为0 1 的氯化汞溶液中1 2min 取出后在无菌水中至少清洗3次 漂净消毒液 三 接种 用70 的酒精喷雾使空气消毒 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 1 接种室消毒 2 无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成 每次使用器械后 都需要用火焰灼烧灭菌 接种后立即盖好瓶盖 3 材料的切取和接种 四 培养 1 愈伤组织的培养 从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间 2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织 首次培养愈伤组织时 恒温箱的门应该关闭不必见光 因为在无光条件下愈伤组织长的更快 2周后 培养基成分接近耗尽 必须更换培养基 进行继代培养 五 移栽 移栽生根的菊花试管苗之前 应先打开培养瓶的封口膜 让试管苗在培养间生长几日 1 打开封口膜 2 清洗转移 用流水清洗根部的培养基 将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间 珍珠岩 固体基质型 含水量高 蓄水性强 透性好 适合栽培 3 移栽 幼苗长壮后 移栽到土壤中 六 栽培 幼苗移栽后 每天观察并记录幼苗的生长情况 适时浇水 施肥 直至开花 1 下列关于愈伤组织的说法中不正确的是 A 愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂B 用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用C 培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料D 人们可以从愈伤组织中提取所需物质 B 2 植物组织培养过程中的脱分化是指A 植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞B 未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程C 植物的器官 组织或细胞 通过离体培养产生愈伤组织的过程D 取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 C 3胡萝卜的韧皮部细胞通过组织培养 能发育成新的植株 下列有关的叙述中 不正确的是 A 说明高度分化的植物细胞具有全能性B 植物细胞的全能性得以表达要离开母体C 新植株的形成是细胞分裂和分化的结果D 高度分化的动物细胞也具有全能性 D 4甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化 目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗 以保证该品种的品质和产量水平 这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的A 有丝分裂B 分化C 减数分裂D 全能性 C 5 在离体的植物器官 组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中 下列哪一项条件是不需要的A 消毒灭菌B 适宜的温度C 充足的光照D 适宜的养料和激素 C

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