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第15章免疫学检测方法及其原理 1 解释血清学反应的概念和特点2 叙述抗原抗体检测方法及用途3 简述免疫标记技术的原理和方法4 简述T细胞功能检测的方法 学习目标 第1节抗原和抗体的检测 一 原理 利用抗原抗体在体外特异性结合后出现的各种现象 可对样品中的抗原或抗体进行定性 定位和定量的检测 未知 抗体 抗原 已知 抗原 抗体 检测 检测 二 特点 3 可见性 是抗原抗体检测的基本原理 是抗原抗体亲和度大小的体现 是形成可见复合物的关键 1 特异性 2 可逆性 三 常见的抗原抗体反应种类 1 凝集反应 agglutination 颗粒性抗原 细菌或细胞 与相应抗体结合后 在一定条件下 出现肉眼可见的凝集物 称凝集反应 直接凝集反应间接凝集反应 玻片法 试管法 定性试验 如血型鉴定 半定量试验 如肥达反应 将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒状载体表面 成为致敏颗粒 免疫微球 再与相应抗体结合出现凝集现象称为间接凝集反应 2 沉淀反应 precipitation 可溶性抗原 血清蛋白 外毒素 组织浸出液 细菌滤液等 与相应抗体结合 在一定条件下 形成肉眼可见的沉淀物 称沉淀反应 1 单向琼脂扩散试验 2 双向琼脂扩散试验 3 对流免疫电泳3 补体参与的反应 complementmediatedreactions 4 免疫标记技术 immunolabellingtechnique 1 免疫荧光法 immunofluorescencetechnique 2 免疫酶技术 immunoenzymatictechinques EIA 图15 5ELASA操作原理示意图 3 放射免疫测定法 radioimmunoassay RIA 第2节免疫细胞及其功能的检测 一 免疫细胞数量的检测 流式细胞术 二 免疫细胞功能的检测 1 T细胞功能的检测 1 淋巴细胞转化试验 2 细胞毒试验 2 B细胞功能检测 B细胞增殖试验抗体形成细胞测定 3 检测细胞免疫功能的皮肤试验 正常机体对特定抗原产生细胞免疫应答后 再用相同抗原做皮肤试验 即出现以局部红肿为特征的迟发性超敏反应 细胞免疫正常者呈阳性反应 而细胞免疫低下者则呈阴性反应 第3节细胞因子的检测 1 生物活性检测2 免疫学检测法3 生物学检测 第4节HLA分型技术 一 血清学分型技术 1 HLA 类抗原的检测 HLA A B C抗原型别鉴定常规使用微量补体依赖淋巴细胞毒试验 CDC试验 2 HLA DR DQ抗原检测 二 细胞学分型技术 LA Dw和HLA DP抗原的特异性可用混合淋巴细胞反应 MLR 检测 三 分子生物学分型技术 1 聚合酶链反应与SSP
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