血清浆脂类及脂蛋白测定ppt课件.ppt

血清 浆 脂类及脂蛋白测定 1 血脂的组成 甘油三酯 少量甘油二酯和甘油一酯 磷脂胆固醇和胆固醇酯非酯化脂肪酸 游离脂肪酸 等 2 血脂的运输形式 脂蛋白 1 定义 指血浆脂质与载脂蛋白组成的可溶性的生物大分子 3 磷脂胆固醇载脂蛋白 甘油三酯胆固醇酯 2 结构 脂蛋白微粒 表面 核心 4 5 3 分类 1 按密度不同 HDLLDLIDLVLDLCM 6 2 按电泳时区带的泳动位置不同 LP前 LP LPCM 7 临床血脂测定的常见项目 8 实验51 磷钨酸 镁沉淀法测定高密度脂蛋白胆固醇 HDL C 9 提取HDL测定胆固醇 实验原理 10 超速离心法层析法电泳法 沉淀法 提取HDL的方法 11 沉淀法原理 12 硫酸葡聚糖 Mg2 肝素 Mn2 磷钨酸 Mg2 多阴离子 polyanion 化合物 13 过氧化物酶 胆固醇 O2胆甾烯酮 H2O2 H2O2 酚 4 氨基安替比林亚胺醌 H2O 胆固醇测定 酶法 14 试剂 沉淀剂酶试剂参考血清 TC测定用的定值血清 15 操作步骤 取血清和沉淀剂各200 l 充分混匀 置室温放置10min后 2500r min 15min 吸取上清液按表进行操作 1 提取HDL 16 混匀 37 水浴15min 空白管调零 0 5cm比色杯 500nm比色 2 测定胆固醇 17 计算 参考值 HDL C mmol L 测定管吸光度 标准管吸光度 定值血清胆固醇浓度 5 17 0 9 2 0mmol L 2 18 注意事项 1 血清标本要及时测定 在室温条件下 各型脂蛋白之间会发生脂质交换 游离的胆固醇会不断酯化 2 离心过程中防止温度过高 室温15 25 离心后放置时间不能过长 温度过高使沉淀不完全 19 临床意义 具有抗动脉粥样硬化作用 是冠心病的保护因素 20 21 磷酸甘油氧化法测定血清甘油三酯 TG 实验49 22 甘油三酯 TG 的结构 23 甘油三酯测定的方法 化学法酶法 24 化学法 KOH 过碘酸 皂化 氧化 抽提甘油甲醛显色 25 甘油三酯 甘油 甲醛 变色酸 紫红色 26 甘油三酯 3 磷酸甘油 ADP ATP O2 H2O 磷酸二羟丙酮 H2O2 甘油 脂肪酸 酚 4 氨基安替比 亚胺醌 H2O LPL GK GPO POD 酶法 磷酸甘油氧化酶法 27 试剂 酶试剂 2 26mmol L的三油酸甘油酯标准液 28 操作 37 水浴10min 空白管调零 0 5cm比色杯 500nm比色 29 计算 TG mmol L 测定管吸光度 标准管吸光度 标准液浓度 参考值 0 56 1 70mmol L 2 26mmol L 30 临床意义 增高 与动脉粥样硬化关系密切 家族性的脂代谢紊乱 糖尿病等 降低 营养不良 消化吸收综合征 消耗性疾病等 31 注意事项 标本 标本要求是餐后12 14h的空腹血液 血清TG易受饮食影响 标本存放不宜超过3天 避免TG水解而释放出甘油 试剂 酶试剂应4 避光保存 出现红色不可再用 32 免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白A1和载脂蛋白B 实验53 33 抗原 抗原抗体复合物 抗体 ApoA1Apo