观察DNA和RNA在细胞中的分布实验教案

实验一实验一 观察观察 DNA 和和 RNA 在真核细胞中的分布在真核细胞中的分布 一 教学目标一 教学目标 1 知识与技能 1 学生分析说明 DNA 和 RNA 在结构上的不同点 2 学生回顾显微镜的使用方法 2 过程与方法 1 学生掌握制作装片的方法 2 使用试剂对材料进行染色 3 情感态度和价值观 培养学生的动手能力 提升学生积极 乐观的学习态度 二 教学重点 难点二 教学重点 难点 1 教学重点 实验原理 显微镜的使用 2 教学难点 甲基绿使 DNA 呈绿色 吡罗红使 RNA 呈红色 三 实验原理与解析三 实验原理与解析 1 真核细胞的 DNA 主要分布在细胞核内 RNA 主要分布在细胞质中 2 甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同 甲基绿对 DNA 亲和力强 使 DNA 显现出绿色 而吡罗红对 RNA 的亲和力强 使 RNA 呈现出红色 用甲基绿 吡 罗红的混合染色剂将细胞染色 可同时显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布 3 盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性 加速染色剂的跨膜运输 盐酸使染色体中的 DNA 与蛋白质分离 便于 DNA 与染色剂的结合 四 实验器材四 实验器材 1 材料 人的口腔上皮细胞 洋葱表皮细胞 根尖细胞 蛙或蟾蜍的血细胞 果肉细胞 2 用具 400 mL 烧杯 250 mL 烧杯 温度计 滴管 消毒牙签 载玻片 盖玻片 铁架 台 石棉网 火柴 酒精灯 吸水纸 显微镜 3 试剂及配制方法 1 试剂 质量分数为 0 9 的 NaCl 溶液 质量分数为 8 的盐酸 乙酸钠 乙酸 蒸 馏水 吡罗红甲基绿混装粉 如果化学试剂商店没有吡罗红甲基绿混装粉 可以分别购买 甲基绿和吡罗红 G 然后按 A 液的第二种方法配制 见下文 2 染色剂的配制 染色剂 A 液的两种配制方法 第一种方法 取吡罗红甲基绿粉 1 g 加入到 100 mL 蒸馏水中溶解 然后用滤纸过滤 将 滤液放入棕色瓶中备用 第二种方法 取甲基绿 2 g 溶于 98 mL 蒸馏水中 取吡罗红 G 5 g 溶于 95 mL 蒸馏水中 取 6 mL 甲基绿溶液和 2 mL 吡罗红溶液加入到 16 mL 蒸馏水中 即为 A 液 放入棕色瓶 中备用 染色剂 B 液的配制方法 B 液是一种缓冲液 由乙酸钠和乙酸混合而成 先取乙酸钠 16 4 g 用蒸馏水溶解至 1 000 mL 备用 再取乙酸 12 mL 用蒸馏水稀释至 1 000 mL 备 用 取配好的乙酸钠溶液 30 mL 和稀释的乙酸 20 mL 加蒸馏水 50 mL 配成 pH 为 4 8 的 B 液 缓冲液 染色剂的配制染色剂是由 A 液 B 液混合配制而成的 取 A 液 20 mL 和 B 液 80 mL 混 合 就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂 应该注意的是该试剂应现用现配 五 五 主要步骤主要步骤 以观察口腔上皮细胞为例 1 取材 滴 在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为 0 9 的 NaCl 溶液 刮 用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下 涂 将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中 烘 将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干 2 水解 解 将烘干的载玻片放入装有 30ml 质量分数为 8 的盐酸的小烧杯中 进行材料的水 解 保 将小烧杯放入装有 30 温水的大烧杯中保温 5 分钟 3 冲洗涂片 冲 用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片 10 秒钟 吸 用吸水纸吸去载玻片上的水分 4 染色 染 用 2 滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上 染色 5 分钟 吸 吸去多余染色剂 盖 盖上盖玻片 5 观察 低 在低倍物镜下 寻找染色均匀 色泽浅的区域 移至视野中央 将物像调节清晰 高 转到高倍物镜 调节细准焦螺旋 观察细胞核和细胞质的染色情况 六 注意事项六 注意事项 1 材料的选择 选用的实验材料既要容易获得 又要便于观察 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞 洋葱鳞片叶表皮细胞 为避免原有颜色的干扰 不可使用紫色表皮细胞 2 取材要点 取口腔上皮细胞之前 应先漱口 以避免装片中出现太多的杂质 取洋葱表皮细胞时 尽量避免材料上带有叶肉组织细胞 3 冲洗载玻片时水的流速要尽量慢 切忌直接用水龙头冲洗 4 安全要点 用酒精灯烘烤载玻片时 不要只集中于材料处 而应将载玻片在火焰上来回移动 使载 玻片均匀受热 以免破裂 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中 最好先自然冷却 1 分钟 5 换用高倍镜观察材料时 只能用细准焦螺旋进行调焦 切不可动粗准焦螺旋 七 实验相关知识 1 加入 8 盐酸的目是 改变细胞膜通透性 加速染色剂进入细胞 使染色剂中的 DNA 与 蛋白质分离 杀死细胞 有利于 DNA 与染色剂结合 2 为什么要进行水解 甲基绿和吡罗红不是活细胞所需要的物质 正常情况下 无法穿过 细胞膜进入细胞内 因此实验中使用盐酸破坏细胞膜 增加细胞膜的通透性 以方便染色 剂进入细胞 同时 盐酸还能使细胞中染色体中的 DNA 和蛋白质分离 有利于 DNA 与甲 基绿染色剂结合 3 将