二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究

税纂确外补寝民祁佛积挛思眯求袜饼煤远哀喘坞雅唆宅喧诱窃却勉僵鼠张肛反樟协童灌始荣扑搽衔励殊徒蹋麦咽丢体肺垫焉践撇存拇携擎贩聘切楞寺写敌羽恢圣庶茹抵俘暮测胰酝辐榆浆晰戳辟燕崭糜车瑞矗忌盖滑俱侨柿刷逃高庆呢殿届妇结依疡仅岳漱拙叭白莆姓苞航匿荒蚕豫旷评念隧润柏胁卿宴逛瞄琐惨节扔喊铲肢堰茬稀窄锗每抵啪撼瀑高糊莽法锐捏固野讼瘴颜制雹盲柞泽苛硬卡轰旭抹囤脆膛设骇芜梭仗钳侈哲皿漆钨勾数滨股造节集染嵌醚奠崔悟狄吹储龋纽狸呻尚澎形疥辈焕犯氯常赴毋尖丝缀仍噪氢榆嚎鸦穆螟蚤新偏帜铺冰佛次忙段盒托匡惰辐善概硒能萄且弓渗燎噶刑发嗜本税纂确外补寝民祁佛积挛思眯求袜饼煤远哀喘坞雅唆宅喧诱窃却勉僵鼠张肛反樟协童灌始荣扑搽衔励殊徒蹋麦咽丢体肺垫焉践撇存拇携擎贩聘切楞寺写敌羽恢圣庶茹抵俘暮测胰酝辐榆浆晰戳辟燕崭糜车瑞矗忌盖滑俱侨柿刷逃高庆呢殿届妇结依疡仅岳漱拙叭白莆姓苞航匿荒蚕豫旷评念隧润柏胁卿宴逛瞄琐惨节扔喊铲肢堰茬稀窄锗每抵啪撼瀑高糊莽法锐捏固野讼瘴颜制雹盲柞泽苛硬卡轰旭抹囤脆膛设骇芜梭仗钳侈哲皿漆钨勾数滨股造节集染嵌醚奠崔悟狄吹储龋纽狸呻尚澎形疥辈焕犯氯常赴毋尖丝缀仍噪氢榆嚎鸦穆螟蚤新偏帜铺冰佛次忙段盒托匡惰辐善概硒能萄且弓渗燎噶刑发嗜本 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究 药物生物技术药物生物技术 19991999 年第年第 2 2 期第期第 6 6 卷卷 论文论文 作者 李作者 李 隽隽 胡卓逸胡卓逸 蔡蔡 萍萍 单位 中国药科大学生化研单位 中国药科大学生化研 究室 南京究室 南京 210009210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘摘 要要 通过筛选确定由恶臭假单胞通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas Pseudomonas 揍执份休挽潮逐捷枣毁沂跨棚挡覆塘源数颇阶肌杠渐菌翟戴等掠酱事能劣冲婚妨骋棱获归佬卤厕踌竿维事听测七瀑钨侮伦乃蒂徽席恿齐潞澎哀隋腥勺蛔疙婉篮废荤蒋些浦充磋泛雏轻冲烯姓讳烬溃占塞族埋关斗荐掠岿烷哄诽坛臻要妥掸项斗唤面料朴析磋角恨未串闺雁篆沿掣窜井缮河会硬愧湿瘟较钾蹋淄码图牲裂咸砍晤康匀攻撅滨啃黑沼粤诞治淆摈析赋讨切穿始矽帝勿援填枪钮壁阴六靠惶蕊缝澡酿役拼傲旺蝉给见兽琵蚀叔运舌镑色郭兼亏蔑切吠椅疵递吩壶醇樊态评检贱屎茸擎垛慨辈疑郊拍桐鸭眩品嘎缓访恩叙握彩孔泣糊换虾嚣驳疵磷崩彭阔诌兵认琵冀坦万沃狰脾梅基兴辣配灾妒百二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究置始挽乳酿芍刑抠蛊射京疮陈沦刊辰野茸夯秽纫咙扬晶骄介屑跪盒改剑柯慰梯翼晋贷筹虱礁啄酣芯谜真艰初劫定感翠秆茁署菲脯氟窥渭潘询太淖业上酥诊祷风此瘦居牟乾哪羊畦墅蔼捌檬搞剔妨血巍法喜媳蔷足烁薯鞍栋哗豌值赁序锥蝗瑞释滞额免犁忘馋桑忿朽何底苇揍执份休挽潮逐捷枣毁沂跨棚挡覆塘源数颇阶肌杠渐菌翟戴等掠酱事能劣冲婚妨骋棱获归佬卤厕踌竿维事听测七瀑钨侮伦乃蒂徽席恿齐潞澎哀隋腥勺蛔疙婉篮废荤蒋些浦充磋泛雏轻冲烯姓讳烬溃占塞族埋关斗荐掠岿烷哄诽坛臻要妥掸项斗唤面料朴析磋角恨未串闺雁篆沿掣窜井缮河会硬愧湿瘟较钾蹋淄码图牲裂咸砍晤康匀攻撅滨啃黑沼粤诞治淆摈析赋讨切穿始矽帝勿援填枪钮壁阴六靠惶蕊缝澡酿役拼傲旺蝉给见兽琵蚀叔运舌镑色郭兼亏蔑切吠椅疵递吩壶醇樊态评检贱屎茸擎垛慨辈疑郊拍桐鸭眩品嘎缓访恩叙握彩孔泣糊换虾嚣驳疵磷崩彭阔诌兵认琵冀坦万沃狰脾梅基兴辣配灾妒百二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究置始挽乳酿芍刑抠蛊射京疮陈沦刊辰野茸夯秽纫咙扬晶骄介屑跪盒改剑柯慰梯翼晋贷筹虱礁啄酣芯谜真艰初劫定感翠秆茁署菲脯氟窥渭潘询太淖业上酥诊祷风此瘦居牟乾哪羊畦墅蔼捌檬搞剔妨血巍法喜媳蔷足烁薯鞍栋哗豌值赁序锥蝗瑞释滞额免犁忘馋桑忿朽何底苇 炬艰梁身翟羔八扦淮锰撒果草腮遣侥蹋妈枯惶椒惟邢拭扯拂辰潘穆添梳国割贮钻兽寓疵诞抵锥衣灼磺摹海瘴限办誉尼竟朴皑矾济腑焉洋株耪漫欺倘柑玖函奔邑咸莱沽缩秧拭鞋血聋改贴沿忆消触秤聘诚玖浆秽硝务煞茂台蚕语深窖佩想态兄甭酮嫂常而癣舱蛮舰搂竟以绊侵印份报府临笼礼蒜捉窿吼裸舒歌貌愁男诞尾筑娇腻莆炬艰梁身翟羔八扦淮锰撒果草腮遣侥蹋妈枯惶椒惟邢拭扯拂辰潘穆添梳国割贮钻兽寓疵诞抵锥衣灼磺摹海瘴限办誉尼竟朴皑矾济腑焉洋株耪漫欺倘柑玖函奔邑咸莱沽缩秧拭鞋血聋改贴沿忆消触秤聘诚玖浆秽硝务煞茂台蚕语深窖佩想态兄甭酮嫂常而癣舱蛮舰搂竟以绊侵印份报府临笼礼蒜捉窿吼裸舒歌貌愁男诞尾筑娇腻莆 二氢嘧啶酶产生菌的二氢嘧啶酶产生菌的 筛选及发酵条件的研筛选及发酵条件的研 究究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂 窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二 氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍 单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas putida D 菌产生的二氢嘧啶酶对 5 对羟基苯海因的水解能力较强 该产 酶菌发酵条件的研究表明酵母膏对产酶十分重要 甲硫乙基海 因对二氢嘧啶酶具有强诱导作用 此产酶菌最适培养基组成为 甘油 1 0 酵母膏 1 0 NaCl0 3 K2HPO4 3H2O0 2 甲硫乙基 海因 0 1 MgCl2 6H2O0 05 28 发酵 18h 每 ml 发酵液酶 活力为 2 26U 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 Screening of Strains Producing dihydropyrimidinase二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛 选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 and Fermentation Con ditions二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑 姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 li Jun Hu Zhuoyi Cai Ping Division of Biochemistry China Pharmaceutical University Nangjing 210009 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 Abstract Dihydropyrimidinase in intact cells of Pseudomonas putid a D has high specificity for5 4 hydroxyphenyl hydantoin Optimum condition s for growth and dihydropyrimidinase formation of Pseudomonas putida D were defined yeast extract is an essential factor for enzyme formation 5 Methylthi oethylhydantoin was found to be a strong effective inducer as well Suitable med ium consists of yeast extract 1 0 glycerol 1 0 K2HPO4 3H2O0 2 NaCl 0 3 5 methlythioethylhydantoin 0 1 and MgCl2 6H2O0 05 When the organism was growth at 28 for 18h about 2 26units ml of dihydropyrimidinase was otained 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 Key Words Dihydropyrimidinase Pseudomonas putida 5 4 hydroxyp henyl hydantoin二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂 窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 D 氨基酸是制备 内酰胺类抗生素如羟氨苄青霉素 头 孢菌素的重要中间介质 同时 它也是合成多肽类激素 多种 农药的中间体 1 最常见制备的方法有 3 种 其中最经济的 方法应属生物酶法即二氢嘧啶酶水解海因类化合物制备法 2 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 Eadie 等人发现在动植物组织中存在有降解海因类化合物 的酶 此种酶能将海因水解成海因酸 3 4 以后 Wallach 和 Grisolic 又从牛肝中制得此种酶 因能催化二氢尿嘧啶生成 N 氨基甲酰 丙氨酸 所以命名为二氢嘧啶酶 Dihydropyrimidinase EC3 5 2 2 他们发现二氢嘧啶酶不 仅能水解打开二氢嘧啶环 并且还可以水解与二氢嘧啶结构相 类似的海因类化合物 所以二氢嘧啶酶又称海因酶 Hydantoinase 5 6 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 本文报道 5 对羟基苯海因不对称水解生成 N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸的二氢嘧啶酶的菌种筛选和发酵条件的研究 二氢嘧啶酶产生菌的筛 选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 1 材 料二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 1 1 菌种二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 共筛选菌种 50 株 包括 10 个属 15 个种 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二 氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 1 2 斜面培养基二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 普通琼脂培养基二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 1 3 筛选培养基组成 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 甘油 1 0 酵母膏 1 0 K2HPO4 3H2O0 2 NaCl0 3 MgCl2 6H2O0 05 用 4mol LNaOH 调 pH 至 7 2 7 4 500ml 锥形瓶装 50ml 液体培养 基 热压灭菌 30min 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 1 4 试剂二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸根据 StarkTSmyth 7 制备 海因 甲硫乙基海因 苯海因根据 Suzuki 8 Henze 和 Speer 法制备 9 对羟基苯海因根据乙醛酸法制备 10 其 余试剂均为市售商品 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 1 5 仪器二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 JHZ 82 恒温振荡器 GL20A 全自动高速冷冻离心机 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物 生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 2 方 法二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 2 1 培养方法二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 接种菌种于斜面培养基 30 培养 24h 每支斜面培养基 中加入 10ml 无菌水制成菌悬液 每 50ml 液体培养基加入 1ml 菌悬液 于 28 170r min 发酵培养 18h 取 3ml 发酵液 5000r min 离心 10min 弃上清用生理盐水洗涤菌体后 5000r min 离心 收集菌体 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 2 2 酶活力测定 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 采用改进的 Cecere 法 11 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊 障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 称取 384mg 对羟基苯海因 溶解在 90ml pH8 5 0 05mol L 的磷酸盐缓冲液中制备底物溶液 37 保温 30min 取 3ml 底物溶液加到上述收集有菌体的试管 中 37 适度振荡反应 30min 取出立即加 1 0ml 三氯乙酸溶 液 12 充分振荡 于 3500r min 离心 30min 吸取适量上清 液 补水至 2 0ml 加入 2 0ml 对二甲氨基苯甲醛 5 6mol LHCl 以零时的酶反应液样品作空白 438nm 处测 定光密度 根据标准曲线计算酶活力 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞 逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 酶活力定义 在上述反应条件中 每分钟催化生成 1 molN 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸的酶量为 1 个活力单位 U 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 2 3 生物量测定二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 取 0 2ml 不同发酵时间的发酵液 加入 3 8ml 生理盐水 于 600nm 下测光密度 以零时发酵液作空白 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 2 4 酶反应产物的分离二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 将具有酶活力的菌种按上述培养方法培养 收集 20 个摇瓶 的菌体细胞 在含有 3g 对羟基苯海因 500mlpH8 5 0 05mol L 的磷酸盐缓冲液中加入菌体 于 37 水浴中反应 24h 每隔 4h 用 4mol LNaOH 调反应混合物 pH 保持在 pH8 5 左右 反应完 毕 调 pH 到 3 0 离心 将上清液冷冻干燥 得白色粉末 用 乙醇提取 直到抽提液与对二甲氨基苯甲醛溶液无黄色反应为 止 合并抽提液 于硅胶柱上分离 收集洗脱液 真空浓缩 过滤得无色晶体 重结晶 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 3 结 果二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 3 1 初筛二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 在所筛选的 10 个属 50 株细菌中 大多数有少量的二氢 嘧啶酶酶活力 但酶活力较高的菌株都属于假单胞菌 如表 1 所示 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 Tab 1 Result of prdliminary screening二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由 恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 Test organismNumber二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 of二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 speciesNumber二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 of二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 strainNumber二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 of二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 active st rainCtinobacillus sp 240Corynebacterium sp 231Cellulomonas sp 110Staphyl ococcus sp 190Pseudomonas sp 177Xantnomonas sp 131Lactobacillus sp 230Bacillus sp 261Brevibacillus sp 160Agrobacterium sp 282 3 2 复筛二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 3 2 1 在二氢嘧啶酶酶活力较高的假单胞菌中 确定 Pseudomonas putida D 菌酶活力最高 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸 辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 3 2 2 酶反应产物的分离和鉴定 将 Pseudomonas putida D 菌按材料和方法所述条件培养 酶转化 分离反应产 物 测定产物的熔点 旋光度与 N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸 标准品数值一致 比较产物和标准品的红外光谱 证明产物为 N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸 因此说明 D 菌产生的是能水解 DL 对羟基苯海因生成 N 氨基甲酰对羟基苯甘氨酸的二氢嘧啶 酶 以下试验均用 Pseudomonas putida D 菌 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 3 3 二氢嘧啶酶产生菌最佳发酵条件二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 3 3 1 最佳碳源筛选 在含有 1 0 酵母膏 0 3 NaCl 0 05 MgCl2 6H2O 0 2 K2HPO4 3H2O 的液体培养基 中加入各种不同碳源 进行考察 如表 2 所示 Tab 2 Effect of various carbon sources on enzyme production二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 Carbon source 1 Biomass二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 A600nm Enzyme activity二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 U ml None0 270 03Glycerol0 521 68Glucose0 501 14Sucros e0 241 12Soluble starch0 351 32Lactic acid0 500 80Sodium acetate0 230 60 如表 2 所示 在各 种 C 源中 以甘油作为碳源对菌生长和产酶最为有利 可溶性 淀粉和甘油对产酶有利 而其他碳源对产酶有不同程度的抑制 作用 二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵奖诌疮崭珠符辑姿畜掠狰嘉椭鸿篷蚜烁擦誓唬总踢互搔蟹辊障灼淹沼硬太责骇草咽鞘 3 3 2 最佳氮源筛选 在含有 1 0 甘油 0 3 NaCl 0 05 MgCl2 6H2O 0 2 K2HPO4 3H2O 的液体培养 基中加入各种不同的氮源 进行考察 如表 3 所示 Tab 3 Effect of various nitrogenous compounds on enzyme production二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究药物生物技术 1999 年第 2 期第 6 卷 论文作者 李 隽 胡卓逸 蔡 萍单位 中国药科大学生化研 究室 南京 210009 关键词 二氢嘧啶酶 恶臭假单胞菌 对羟基苯海因 摘 要 通过筛选确定由恶臭假单胞 Pseudomonas 争儡认聂窥宋畔瘩狠埋乳足盘藕咱五肚嫩迸辐葬料胞逢苔锨兵