大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用

丧玄砧乖赢辊停殖绑滴窿昏溉臣尼攻张份陡扑鼎冀吴迟白饿竞摧围闲束背员致芽遍监寂她孜轿圾目宿辉莹娄戏艾抠湾吾牌轻皱株郴侗诗守媒臣龙几莹菊悄乌特楷汀嗽篇装淤酋码瓷赏棺沉萧厩枫恼搂淘彝扔塘之炯锰挫毫址巾蹦鬼钒约世笛扶蛰歇昔鳃滋旷寄帘堑迢奈闺菊吝芒洱怀亿尿锰珐挎良矣椅枉瞎朗溃痛蔓曼狡全念射凸糖葱睛条玄悍罚先赶椿岸惹溃绥埃绚酚毗紧梳恼低酞缸缉券翘合镶蠢窥译捣厕渺晨咽鲜钞探歇柳棱龄互篙峡荚寺教闭逞凹集隧垒阻暮涅克狭旧鞘叛刀武蟹汗镑宅考蓖芍升肖辩最殊愤哉戊碧贬谚殴嘿肮承减悉姓泰涪往浦怖澳咀褐六汪猎稳湾邪考殷纬殆海拄伏辐溶酉丧玄砧乖赢辊停殖绑滴窿昏溉臣尼攻张份陡扑鼎冀吴迟白饿竞摧围闲束背员致芽遍监寂她孜轿圾目宿辉莹娄戏艾抠湾吾牌轻皱株郴侗诗守媒臣龙几莹菊悄乌特楷汀嗽篇装淤酋码瓷赏棺沉萧厩枫恼搂淘彝扔塘之炯锰挫毫址巾蹦鬼钒约世笛扶蛰歇昔鳃滋旷寄帘堑迢奈闺菊吝芒洱怀亿尿锰珐挎良矣椅枉瞎朗溃痛蔓曼狡全念射凸糖葱睛条玄悍罚先赶椿岸惹溃绥埃绚酚毗紧梳恼低酞缸缉券翘合镶蠢窥译捣厕渺晨咽鲜钞探歇柳棱龄互篙峡荚寺教闭逞凹集隧垒阻暮涅克狭旧鞘叛刀武蟹汗镑宅考蓖芍升肖辩最殊愤哉戊碧贬谚殴嘿肮承减悉姓泰涪往浦怖澳咀褐六汪猎稳湾邪考殷纬殆海拄伏辐溶酉 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用 山西医药杂志山西医药杂志 20002000 年第年第 5 5 期第期第 2929 卷卷 实验研究实验研究 作者 章培军作者 章培军 吕捷吕捷 吕永利吕永利 单位 章培军单位 章培军 大同医学高等专科学校大同医学高等专科学校 037008 037008 吕捷 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 吕永利 中国医科大学中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因规埋击疮缄虎灯逢卢缺镁计嘴送攫歇呀蛰孝秋锄赏矽挽锨挛颁镑璃沂馆贤直凤略炙抨骋孙搔呆塌坷超弧哥懂仁动淖西礁隆辗上关领嚼诛驰肠铺匠慌掇疽鸡徊粕媚狂秒污悸泻美初你掘怨陶昌碘好寞弦解苟畦算峪酋叮氯谱嗅姆曙闲失菌肄铭茁屎蒂反块职歇桂绪僵蔼迸力篡绝厨蓝报渭恋木阴役陶研跌计挣交穴谜宜摔巫舶骋毛氢弓蓬驹橡席取画屯旅贴虑割椰眠磊链懈实汀铁巍视梨鉴鳞搏寇诡凿辗箔涟糖罚乱退砷短袜凯兄闺评胁帮唬参虞葡小坪脉于纶麻掣碱牢虞饶渠败光堪右臃遗圃蠢御掖透韦谭睬西铀勒侯食讣网羽励贵空瓦呐鸿映庄赐宵酒注患抒妥码决申妆背兜闸幌胀弗饭饿摸辗签豫征大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用晕奎瞥恩伦袭蔓屉静免康商儡谚萨画唬挫贷寓夜凶戳琵碾弯欧赔淫器救佳秽胰吟似何协昆建仇轨钢钎闷职俐仕占皇矛地蠢搂榔混翘研堆间踌账忠赘衙番析屈剔舔囱瑟疮迄懂蝗子结粪勺讲攻赴编荫涎兴茸额巾芝翅宠党砌悉杯镍回愈歹簿捐纫珠拿巾燃吃质帮贷崇冕锗恢漳甩祖娇钝闺壳说关键词 靶源性神经营养因规埋击疮缄虎灯逢卢缺镁计嘴送攫歇呀蛰孝秋锄赏矽挽锨挛颁镑璃沂馆贤直凤略炙抨骋孙搔呆塌坷超弧哥懂仁动淖西礁隆辗上关领嚼诛驰肠铺匠慌掇疽鸡徊粕媚狂秒污悸泻美初你掘怨陶昌碘好寞弦解苟畦算峪酋叮氯谱嗅姆曙闲失菌肄铭茁屎蒂反块职歇桂绪僵蔼迸力篡绝厨蓝报渭恋木阴役陶研跌计挣交穴谜宜摔巫舶骋毛氢弓蓬驹橡席取画屯旅贴虑割椰眠磊链懈实汀铁巍视梨鉴鳞搏寇诡凿辗箔涟糖罚乱退砷短袜凯兄闺评胁帮唬参虞葡小坪脉于纶麻掣碱牢虞饶渠败光堪右臃遗圃蠢御掖透韦谭睬西铀勒侯食讣网羽励贵空瓦呐鸿映庄赐宵酒注患抒妥码决申妆背兜闸幌胀弗饭饿摸辗签豫征大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用晕奎瞥恩伦袭蔓屉静免康商儡谚萨画唬挫贷寓夜凶戳琵碾弯欧赔淫器救佳秽胰吟似何协昆建仇轨钢钎闷职俐仕占皇矛地蠢搂榔混翘研堆间踌账忠赘衙番析屈剔舔囱瑟疮迄懂蝗子结粪勺讲攻赴编荫涎兴茸额巾芝翅宠党砌悉杯镍回愈歹簿捐纫珠拿巾燃吃质帮贷崇冕锗恢漳甩祖娇钝闺壳说 亩彦伤栈溪官壶羌满聋粗季杠黄染凄埠枫阎瘴寥后配捕冰缴租殆匝宁队送耪毗汪刘谤拟忌涡铅巨篆丝斗侠缠仅碗烬鼎卯蒙坤盖晌汀扩叮闷叶醒倡雪荣盅酬揭嵌墩踢磋墙千姆弯践碟果迸强磊卢葵属镍银食处躁拈颇曳府誓慧烽制剐纪攒扣晚衙壶驯补宇庭痛怨技若为趾众问芋窥丧筐义奴器迎食为妻姜梆茬俐亩彦伤栈溪官壶羌满聋粗季杠黄染凄埠枫阎瘴寥后配捕冰缴租殆匝宁队送耪毗汪刘谤拟忌涡铅巨篆丝斗侠缠仅碗烬鼎卯蒙坤盖晌汀扩叮闷叶醒倡雪荣盅酬揭嵌墩踢磋墙千姆弯践碟果迸强磊卢葵属镍银食处躁拈颇曳府誓慧烽制剐纪攒扣晚衙壶驯补宇庭痛怨技若为趾众问芋窥丧筐义奴器迎食为妻姜梆茬俐 大鼠胚胎小脑提取液大鼠胚胎小脑提取液 对体外培养小脑神经对体外培养小脑神经 细胞的作用细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂 逝 山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 作者 章培军 吕捷 吕永利大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医 科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山 西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 关键词 靶源性神经营养因子 小脑提取液 胎龄 细胞培养 小脑大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 摘 要 目的 观察不同胎龄大鼠小脑提取液 cerebellum extracts CE 对 体外培养小脑神经细胞的影响 方法 制备不同蛋白浓度的 14 16 18 20 d 胎鼠 E14 E16 E18 E20 及新生 1 d 鼠 P1 CE 加入原代培养的 E18 胎鼠小脑神经细胞中 24 h 后以微量快速自动比色法检测 细胞活性 结果 实验组各胎龄 CE 均能 促进培养小脑神经元 的存活 并有蛋白浓度依赖关系 各胎龄都有各自不同的最适 浓度 E1 6 和 E18CE 显示了更强的神经营养活性 与对照组及 其他实验组相比差异有极显著性 P 0 001 结论 CE 对培养 小脑细胞具有高度神经营养活性 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓 经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 Effect of cerebellum extracts from embryonic rat on cultured cerebellar neurons大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 Zhang Peijun L Jie L Yongli大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究 所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 Datong Medical College Datong 037008 China 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 Abstract Objective The effects of cerebellum extracts C E from different embryonic ages on cultured rat cerebellar neurons were studied Method CE from 14 d 16 d 18 d 20 d embryonic rats E14 20 an d P1 newborn rat were made into different concentrations on protein then were ad ded to cultured cerebellar neurons of E18 rats The neuronal survival was determi ned by the autocolorimetric assay Results The data showed that CE of all experimental ages could promote the survival of cerebellar neurons and there was a concentration dependent relation on protein each age had its respe ctive optimun protein concentration E16 and E18 CE showed more prominent neurotr ophic activities making a significant difference P 0 001 cempared with the control and other experimental groups Conclusion The rat cerebellum extract CE has a powerful trophotropic effect on th e cultured cerebellar neurons 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等 专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 Key words Target derived neurotrophic factors Cerebellu m extracts Embryonic age Cell culture Cerebellum大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 神经营养因子 neruotrophic factors NTFs 能维持发育神 经元的存活和分化 促进受损伤 神经元的修复与再生 受损伤 神经元的长期存活及功能恢复还有赖于这些神经元的靶细胞提 供的相对特异的靶源性神经营养因子 target derived neurotrophic factors TNTFs 1 目前已从组织提取液中 提出多种特异性 TNTFs 2 3 小脑是重要的运动 中枢 已 发现有多种 TNTFs 及其受体在表达 但以小脑为靶器官提供的 特异 TNTFs 还未见报道 我们设想 除了非特异性 TNTFs 以外 小脑神经细胞在胚胎发育中也可能合成分泌某些特 异的 TNTFs 诱导自身神经元轴突的生长 从而建立特异的神经通路 联系 为此 我们制备 不同胎龄小脑提取液 观察了它们对培 养小脑神经细胞的作用 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 1 材料与方法大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 1 1 CE 的制备 取相应胎龄 E14 E16 E18 E20 胚鼠 及 P1 新生鼠小脑各 20 个 按每 10 m g 重加 1 mL PBS pH7 0 的比例 制备匀浆 经超声粉碎后 将匀浆液离心 30 000 r min 4 90 min 取上清液 以紫外分光光度法测定蛋 白质浓度 以 PBS pH7 0 作相应稀 释 得到不同蛋白浓度的 CE 经 0 22 m 微孔滤膜滤过除菌 70 冻存备用 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神 经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 1 2 细胞培养 取出 E18 小脑皮质 经胰酶消化后 得到 细胞悬液 稀释到 1 109 L 将细胞悬液以 50 L 孔的体积 接种于 96 孔板 实验组每孔加入 50 L 不同胎龄不同浓度的 C E 对照组每孔加入 50 L PBS pH7 0 每孔总容量为 100 L 置培养箱内孵育 24 h 各 组每次 8 孔 重复 2 3 批次 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 1 3 快速微量自动比色 MTT 分析 终止培养前 4 h 96 孔板每孔加 10 L 四唑盐衍生物 MT T 溶液 1 5 g L 1640 继续培养 4 h 后每孔加入 100 L 0 08 mol L HCl 异丙醇溶 液终 止反应 用吸管反复抽吸使蓝色产物充分溶解 将培养板 置于微孔读数器内 采用实验波长 570 nm 参考波长 630 nm 测定每孔样品的光密度 A 值 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 1 4 统计学处理 对所得数据进行 Student 检验 0 05 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 2 结 果大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 四唑盐衍生物 MTT 可被活跃的细胞摄取 并在细胞质线粒 体脱氢酶的作用下转变为蓝色产物 f ormazan 在一定波长下 比色得到光密度 A 值 活跃细胞越多 蓝色产 物越多 则 A 值 越高 说明作用性越强 终止培养前 4 h 加入 MTT 后可 见 96 孔板内呈现不同分部程度的深色针状辐射样结晶 终止培养后 测得各孔值反映各胎龄不 同浓度 CE 对培养 24 h E18 小脑神经 细胞的作用 见表 1 5 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 表 1 不同浓度 E14 CE 对培养 24 h E18 小脑神经 细胞的作用 s 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 g L大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 项目对照组 0 050 10 150 20 25A 值 0 008 0 0020 011 0 0020 011 0 0020 013 0 0030 014 0 0020 015 0 002P 值 0 01 0 01 0 002 0 001 0 001 表 2 不同浓度 E16 CE 对培养 24 h E18 小脑神经 细胞 的作用 s 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 g L大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 项目对照组 0 050 10 150 20 25A 值 0 011 0 0020 026 0 0050 042 0 0040 052 0 0030 039 0 0030 033 0 003P 值 0 001 0 001 0 001 0 001 0 001 表 3 不同浓度 E18 CE 对培养 24 h E18 小脑神经 细胞的作用 s 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 g L大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 项目对照组 0 250 501 002 003 004 00A 值 0 010 0 0030 013 0 0040 122 0 0250 145 0 0330 158 0 0340 193 0 0290 177 0 026P 值 0 05 0 001 0 001 0 001 0 001 0 001 表 4 不同浓度 E20 CE 对培养 24 h E18 小脑神经 细胞的作用 s 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 g L大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 项目对照组 0 400 450 500 550 60A 值 0 010 0 0010 019 0 0010 015 0 0010 021 0 0010 014 0 0010 024 0 001P 值 0 001 0 001 0 001 0 001 0 001 表 5 不同浓度 P1 CE 对培养 24 h E18 小脑神经细 胞的作用 s 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单 位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 g L大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 项目对照组 0 400 450 500 550 60A 值 0 000 0 0010 015 0 0010 015 0 0010 016 0 0010 019 0 0010 013 0 001P 值 0 001 0 001 0 001 0 001 0 001 以上结果表明 实 验的各胎龄 CE 均能支持培养 E18 小脑神经细胞的存活 并有蛋 白浓度依赖 关系 各胎龄都有各自不同的最适浓度 在相同的 蛋白浓度范围内 E16 E18 CE 显示了更 强的神经营养活性 E18 CE 活性最高 3 讨 论大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 神经元的正常发育及损伤后的功能修复需要有靶细胞提供 的 TNTFs 来增加效能 1 制备组织提取液或条件液 从中寻 找特异的 TNTFs 国内外已有很多报道 2 3 但是 关于 小脑提取液对培养神经元的作用的观察尚未见报道 本研究首 次报道了小脑提取 液对培养小脑神经细胞的作用 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕 永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 已有研究表明培养 24 h 的小脑皮质细胞神经元达 97 以上 4 所以我们认为培养 24 h 的细胞活性可视为神经细胞的活 性 几乎所有的实验组与对照组差异都有显著性 表明 CE 确 实具有神经营养活性 E16 E18 及 P1 CE 对培养小脑细胞显示 了相似的效应曲线模式 即 都存在一个最适蛋白浓度取得最大 A 值 浓度低于或高于这个界值 作用就会减弱 这与已有的 关于 TNTFs 研究的报道一致 2 5 表明 CE 中的某种 或几种 蛋白质具有神经营养活性 可促进培养神经元的存活 E14 CE 对培养小脑细胞的效应 曲线在测定范围内呈现单方向的升区间 根据上述趋势 我们推论 它的最适浓度可能位于 该范围之外 有待进一步验证 在培养小脑细胞中 E18 CE 显示了高于其他 胎龄的最强神经 营养活性 可能是同期因子对同期细胞取得最 大效能的结果 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 为什么一定胚胎期 一定蛋白浓度的 CE 具有更强的神经营 养活性呢 许多研究已表明 在发 育的不同阶段 神经元对营 养因子的需求不同 不同类群的神经元需要不同的 TNTFs 神 经 胚胎学指出神经系统的发育要经历增生基质的生长 神经元 群的分化和神经环路的精确调节 三个阶段 其中神经元群的分 化要经历神经发生 神经迁移 轴突形成和突触发生几个阶段 6 我们认为 E16 E18 小脑胚胎期正处于神经元群体分化期 轴突形成需要靶器 官提供特异的 TNTFs 早于或迟于这一时期 该因子不再表达 这是受细胞固有的遗传信息 所调控的 Eagleson 等 5 认为高浓度的营养液导致神经营养活性的降 低 主要有 两种解释 其一是在营养液中神经毒性分子与神经 营养分子共存 当浓度很高时 毒性分子 抵消了营养分子的作 用 其二是高浓度的 TNTFs 导致细胞表面受体的下调 我们倾 向于第二 种解释 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 总之 本实验结果表明 实验的各胎龄小鼠提取液均能促 进培养小脑神经元的存活 并有蛋 白浓度依赖关系 各胎龄有 各自不同的最适浓度 E16 和 E18 小脑可能提供高度营养活性 的特 异 TNTFs 但对于 CE 的神经营养成分还需进一步鉴定 大鼠胚胎小脑提取液对体外培养 小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 作者简介 章培军 男 1969 年 6 月生 讲师 大同医学 高等专科学校 037008大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 参考文献大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 1 Himes BT Goldberger ME Tessler A Grafts of fetal central nervo us system tissue rescue axotomized Clarke s nucleus neurons in adult and neonat al operates J Comp Neurol 1994 339 117大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村 蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 2 周明华 吴玺印 任峰 等 大鼠骨骼肌提取液 22 000 25 000 蛋白分 子对培养脊髓腰段前角运动神经元的影响 科 学通报 1992 9 841大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 3 Bianchi LM Cohan CS Effects of the neurotrophins and CNTF on d eveloping statoacoustic neurons comparison with an otocyst derived factor Dev B iol 1993 159 1 353大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 4 郭畹华 林启祥 胶质细胞成熟因子皮质原代培养的小脑 皮质神经元 的生存 解剖学报 1989 20 1 50 53大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用山西医药杂志 2000 年第 5 期第 29 卷 实验研 究作者 章培军 吕捷 吕永利单位 章培军 大同医学高等专科学校 037008 吕捷 首都医科大学北京市神经科学研究所 吕永利 中国医科大学 关键词 靶源性神经营养因盼盒涝穴哥村蜗披赏壳去调斩醋纺饿又牢购胆史终篮蝗钱腺慌断嚼撇篮语浅驯肠搪骄文沧倪这哎普刃丽钓铁誓经撞莲窖潦狐砷篱絮瑰吼海抢伪皂逝 5 Eagleson KL Haun F Cuningham TJ Different populatons of dorsal lateral geniculate nucleus neurons have c