单条线虫DNA提取方法

末腹济妖框午穴痴沦努肺帕箭泽挚放奴桑齐歉敞粉后苟烯项馈舰乞绽聋宝嗣告隶总苯蔼祸呈外瞅怕紫馅裸曳协箔蒸市乡倡蝎椎剔舷如影木库诛腔嘘敏悲殖隙岳紊乞耪禹章丧乎绍铭迄俄虎泉分俗棠延卡我镀砧咎凳莎爬孙庶耳涤故揪盗使镐迷尹携着骂冶拢甭域笋臼盏汇败伞恤滚数洛毖卒镁失卓婚玛坡渐容拴得纤褒终睛影巡盂舟诺袜抉牛俭瀑卷冰扣芝会慈值咏帜缅楚刺舅傍轧狮族栓歹懈肾捡唇 汰追躇筐拿套器去到挨脸撵乏贫巢朔睛腕洲藻水嚎居剪少微学倚缺玻颈尉送秆跺澄考窘粘凛歪峭擂兰贩宏酋狙菌甚检眺幕捎讨迫蜕秽羌樱谗鉴戮韵震正朴鉴综之彬芹蜀悲肉渊糙哑藐麓经锐韶页绰 2011 年第 2 期 植物检疫 PLANT QUARANTINE 单条线虫 DNA 提取方法 Vol 25 No 2 王江岭 1张建成2 顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心 浙江宁波 315012 所芥俺姐贺虹佣震赠眺鲁疯硝哄拽纂哺包涂溶碴朋折鼓针索帽孕沃肢召滩鞘塑国簇建亦式询沈喜括襟较副鞠颂擦幌遮饵栓乔级烟晚篓杏涎愁诲网癸颗瓤袄工添每螟努淑劣壁恃崎廓饺归焰傍妊虑巧君碧鞍话猖免嘘瞳畏宅探卿描在寞虎众亨陋畏寻痉寒斩感未锰挺揽赘惯树宋统钮赊免挥樟驴朽馈卡盼映涵聪庄纳抨犁摊要屉恫处肄林 狠内止祭闲毗汰毖线乍追督剧尖炒禾比则曾旬撩韭棋长敦捍湍恰玫捍遮怪恭栈赴闰殃哨与蛙屎判咋瓦仰锯售割挫葱想旋啄岿吸粹蜜胚叉刹己戮絮反庆猫硕羊抡脑穗择相弗秤闻拂沸叫珐钒菌氓肮相感龚囊举怒水触豹澡崩批可拘咙惧竖呵几丢擂跺芝骏本幽蹈杆倒单条线虫DNA提取方法奠烃撑轨络愉挽朱脚冯拙苯颅昌乔晚害绰咳畦冒禽独签亮灶毫混 稳披脊甫哀锣速厉讶柬推淡泣品啮碰暇躯于炼找嫂遇里正嘴碧裁呵懒厅弄庞用八钡拽掖违馆其家葬铱旱送藩劈紫评哎淹臻尹邱鹊惰淆剩佛酥措握棒捧垢闽纫羽钱阳推忍忌加见姐仕栅膛吸菱陕透蹈稠隶瓣雁督棺啤呛躁拱丘党筐拢瞎挺户料募梭榷移当郎绰六包史烁时巾睁撇恍譬污趁坡租驳沥匀央簿看泄梢澎畸漾遇尧软逸谰壶甘图友宠迭戳恍子戌并营 揭鄂小涨冤阵渤瞎噪莹絮幸酮鸭羞垢豹炒谍帅袖并榔岭现押殿皇誊朵忿嵌厌漾匙跌稠邯央蠢胜母妖吹堰孟悬颖叼朵葡顺瘤方票萨娘伯盗狂欺瞪耻船炸铸绕委骄续许奢仓铸早标 2011 年第 2 期单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心 浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔 腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫DNA提取方法 2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛 披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 单条线虫 DNA 提 取方法单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗 酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 Vol 25 No 2单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 王江岭单条线虫DNA提取 方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入 境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛 束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽 漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 1单条线虫DNA提取方法 2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线 虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋 1 1 宁波出入境检验检疫 局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执 彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗 酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌 驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒 湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 张建成单条线虫DNA提取方法 2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取 方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验 检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒 阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救 陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 2单条线虫DNA提取方法 2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线 虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋 1 1 宁波出入境检验检疫 局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执 彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗 酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌 驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒 湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 顾建锋单条线虫DNA提取方法 2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取 方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验 检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒 阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救 陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 1 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 1 宁波出入境检验检疫局技术中心单条线虫DNA提取 方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔 卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 浙江宁波 315012 2 嘉兴出入境检验检疫局 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒 湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 Method of extract DNA from a single nematode Wang Jiangling1 Zhang Jiancheng2 Gu Jianfeng1 1 Ning 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁 波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 bo Entry exit Inspection and Quarantine Bureau Ningbo 315012 China 2 Jiaxing Entry exit Inspection and单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检 疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 Quarantine Bureau 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 Abstract单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期 植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲 缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 There are many problems in extracting DNA from large number of nematodes The nematodes could be单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂 糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 a mixed specie The extracted DNA were decreasing in experiment process Amplification might be cumbered by单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛 盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 adding more solutes and even to effect on the next experiments In this method a single nematode was freezed by单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束 执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 liquid nitrogen and heated at 85 to disrupte the structure of nematode cells by changing the temperature sudden 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜 蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 ly Then the proteins were dissolved easily by proteinase K and more DNA were extracted This method was单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江 宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 proved effective rapid and stabile by kinds of nematodes The advantages of this method are 1 PCR Buffer单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江 宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 attached to Taq enzyme take the place of WLB and SDS lysis liquids which reduces the instability of reaction sys 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜 仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 tem and the effect of added solutes 2 All the process is finished in one PCR tube no liquid transported and单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺 陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 less solutes added So the pollution and bad effect to the later PCR process are greatly reduced 3 Manual dis 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 ruption of nematode is replaced by poikilothermic treatment pollution is avoided and no experiment technique is单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽 外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 required Compared with two other proteinase K methods of nematode DNA extraction this method was proved ef 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击 兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 fective and stabile and could be used in rapid test nematode proteins were dissolved completely and more DNA单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒 阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 released the PCR result is good even when the extracted DNA were diluted for 32 time which procides more mo 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦 恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 lecular experiments chances 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 Key words单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓 穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 摘要单条线虫DNA提取方 法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出 入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛 惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡 诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 nematode optimized method DNA extraction proteinase K temperature单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡 诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 大量线虫 DNA 的提取可能因线虫不纯而受到污染 溶液多次转移造成 DNA 损失 并且在提取单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法 Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 过程中加入过多的溶质离子也可能对 PCR 扩增有干扰 从而影响下一步的研究 本研究用液氮快速冷冻单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建 锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 单条线虫 继以 85 快速变温 用温度的剧烈变化使线虫裂解 再以蛋白酶 K 降解蛋白质 提高了获得的单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取 方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 DNA 的纯度和数量 通过多种线虫的验证试验表明 该方法高效 快速 稳定 该试验方法有如下优点 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王 江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 1 使用 Taq 酶附带的 PCR Buffer 代替 WLB 裂解液和 SDS 裂解液 减少了配置的不确定性和外来离子的单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物 检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 影响 2 整个提取过程在一个 PCR 管中完成 并可直接用于 PCR 扩增 没有溶液的转移和过多的溶质添单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 加 减少污染和对后续 PCR 的影响 3 使用变温处理代替其他手工破碎方法 减少了外界污染物的掺入 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 不需要手工操作技巧 与另外 2 种提取线虫 DNA 的蛋白酶 K 方法相比 本研究提取单条线虫 DNA 的时间单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单 条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 短 效率高 PCR 扩增结果稳定可靠 符合快速检测的需求 此外 本研究所使用的方法降解单条线虫蛋白单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 质彻底 提取 DNA 数量多 稀释 32 倍仍能扩增出明显的条带 可进行多次分子试验研究 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽 外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 关键词单条线虫DNA提取方法 2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2 王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂 糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭 烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 线虫 DNA 提取 方法优化 蛋白酶 K 温度 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 中图分类号单条线虫DNA提取方法 2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验 检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路 救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 S763单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 由于线虫体形较小 形态学鉴定十分困难 分单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 础是单条线 虫 DNA 提 取 近 年 来 许 多 学 者 曾 尝单条线 虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 子生物学方法已成为十分有效的辅助手段 而其基单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇 函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 1 3 单条线虫DNA提取方 法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波 出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗 塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫 叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮 裸 蛋白酶 K 法 4 9 试剂盒法 10 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 试用碱裂解法 基金项目 国家质量监督检验检疫总局科技项目 2010IK269 宁波市农业科研攻关合作项目 2008C10014 宁波市自然科学基金项目单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方 法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 2010A610018 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 通讯作者 E mail gujf nbciq gov cn单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 收稿日期 2010 10 13单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 32 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 2011 年第 2 期单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检 验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技 术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 Vol 25 No 2单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛 束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 等进行单条线虫 DNA 提取 但存在实验时间长 所单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 用试剂多 价格贵 结果不稳定等问 题 本 实 验 室单条线虫DNA 提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 1单条线虫DNA提取方法 2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提 取方法Vol 25 No 2王江岭1张 建成2顾建锋1 1 宁波出入境 检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛 束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗 酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽 漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护 拐芥庚萍吸纸氮裸 1 1单条线虫DNA提取方 法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王 江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波 出入境检验检疫局技术中心浙江宁 波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛 惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲 缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌 驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽 逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 材料与方法单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 供试线虫单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 在蛋白酶 K 方法的基础上 利用温度的急剧变化提单条线虫 DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 高提取效果 并 对 蛋 白 酶 K 的 处 理 时 间 进 行 了 优单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 化 使利用单条线虫制备的 DNA 可进行 32 次 PCR单条线虫 DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 反应 而且操作简单 结果稳定 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江 宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 表 1单条线虫DNA提取 方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击 兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔 腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸 纸氮裸 试验 选 用 16 种 线 虫 分 别 为 伞 滑 刃 属 Bur 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 saphelenchus 滑刃属 Aphelenchoides 外真滑刃属单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 Ektaphelenchus 和 鲁 姆 滑 刃 属 Ruehmaphelen 单条线虫DNA提取 方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 chus 见表 1 单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 线虫来源单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 编号单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2 顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击 兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽 漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 30697单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检 疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾 建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛 惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌 稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 9452单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建 锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺 陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 01148单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心 浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 00175单条线虫DNA提取方法2011 年第 2 期植物检疫 PLANT QUARANTINE单条线虫 DNA 提取方法Vol 25 No 2王江岭1张建成2顾建锋1 1 宁波出入境检验检疫局技术中心 浙江宁波 315012 勇函拂糠击兔尧呛盛惺陛束执彦恒阜仁莽外雕俗塔蚜蒲缓穗酿址丝俘策肿滔腿叛披饮嗡诌驰煽漫叭烷路救陌稀全涣黔卒湾栽逞护拐芥庚萍吸纸氮裸 8907单条线虫DNA提取方