DB33 T 625.3-2007 无公害豆芽 第3部分 6-苄基腺嘌呤残留量和4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定

  53 备案号：  浙 江 省 地 方 标 准   2007 无公害豆芽  第 3 部分： 6 苄基腺嘌呤残留量和  4氯苯氧乙酸钠残留量的测定  2007布  2007施  浙江省质量技术监督局  发布   2007 I 前     言  625 2007无公害豆芽分为三个部分：   第 1部分：生产技术规程；   第 2部分：质量安全要求；   第 3部分： 6 本 部分为 625 2007无公害豆芽 第 3部分。  本 部分的附录 为资料性附录。  本部分起草单位：浙江省疾病预防控制中心、宁波市疾病预防控制中心、杭州市质量技术监督检测院、浙江省农业厅农作物管理局、宁波市卫生监督所、宁波市五龙潭蔬菜食品有限公司、宁波市质量技术监督局。  本部分主要起草人：李小平、韩见龙、蔡增轩、金米聪、赵建阳、芮昶、蒋经伟、陶礼明、戴建刚。   2007 1 无公害豆芽  第 3 部分： 6苄基腺嘌呤残留量和 4氯苯氧乙酸钠残留量的测定  第一法  豆芽中 6 S 法  1 范围  本 方法 规定了豆芽中 6  本 方法 适用于豆芽中 6 本 方法 检出限为 1 10-6 mg/ 2 原理  豆芽中残留的 6相柱分离，电喷雾离子化（ 多离子反应监测（ 式进行定量测定 。 以试样峰的保留时间 、母离子（ m/z: +H+）与子离子 (性，以子离子 (面积外标法定量 。  3 试剂  除非另有规定，仅使用分析纯试剂、蒸馏水或去离子水。  酸 。  腈（ 。  醇 （ 。  0%的甲醇水溶液。  化 甲醇：每 100 醇中加入乙酸 50L ，混匀。  准 溶液的配置：  准储备溶液  精密称取 6量  00 甲醇溶解并定容至刻度，作为标准储备溶液。此标 准储备溶液每毫升相当于 1.0 准使用液用甲醇稀释至每毫升含 1g 的 6在 4冰箱中储存，有效期 1个月。  准 工作 溶液  白豆芽萃取液制备  选择在生产过程中未添加 6豆芽菜。按 样处理 方法提取，经 滤膜过滤。必要时使用 以确定在 6峰处不存在干扰。  准 工作 溶液 系列配制  准确吸取标注使用液 1 L、 2 L、 4 L、 6 L、 8 L、 10  空白豆芽萃取液 （  1 制成浓度依次 为 1 ng/2ng/4 ng/6 ng/8 ng/10 ng/  4 仪器  织捣碎机。   2007 2 平（精 度  。  效液相色谱 串联四极杆质谱（ S）。  质机（速度范围：  6,000 24,000   心机 (最高转速 :15,000   5 分析步骤  样处理  称取豆芽样品 500 5确 至  50 入10  均质机匀 质 3 0000 0清液转入 50 品再用 10 复 提取 一次 。合并上清液，用水定容至刻度，摇匀 ，吸取 20容量瓶中， 用 50%甲醇 水 溶液 定容至刻度，摇匀 ， 经 膜过滤，供   谱 参考 条件  色谱柱： 18 柱（ 50  5m  颗 径 ） 。  流动相 A：水（ 酸） 。  流动相 B：甲醇（ 酸） 。  流速： mL/ 进样量：  10  柱温： 35 。  表 1   梯度洗脱条件  时间（  流动相 A 流动相 B 变化曲线  0% 50%  4% 56% 6 % 0% 6 % 0% 1 0% 50% 6 0% 50% 1 注： 变化曲线： 1为立即变化， 6为线性变化  谱 参考 条件  离子化 方式    毛细管电压  ( 锥孔电压  (V)  57。    V)    源温度  ( ) 120。  脱溶剂温度  ()  350。  锥孔反吹气流  (L/50。  脱溶剂气流  (L/454。      离子能量  1      离子能量  2   2007 3 光电倍增管  (V) 650。  碰撞池气压 ( 定  准确吸取 准系列溶液和试样溶液注入液相色谱 照本标准 保留时间及子离子 >子离子 参见附录 A。  果计算  按外标法计算试样中 6  见下式：  10001000 m  X 试样中 6mg/ A 试样 中定量子离子 面积对应的 6g ；  f 试样的稀释倍数；  m 试样的取样量， g。  计算 结果 表示到三位有效数字。  6 精密度  在重复性条件下获得的两次独立测定结果绝对差值不得超过算术平均值的 20%。   2007 4 附  录  A （资料性附录）  >离子流图  > 图 >离子流图   2007 5 第二法   41 范围  本方法规定了豆芽中 4 本方法适用于豆芽中 4 本方法 检出限为 mg/ 2 原理  豆芽中的 4乙酸钠用稀碱提取，酸化后用乙醚萃取，高效液相色谱紫外检测器测定，保留时间定性，外标法定量。  3 试剂  除非另有规定，仅使用分析纯试剂、蒸馏水或去离子水。  氢氧化钠。  盐酸。  乙醚。  甲醇 （   冰醋酸。  氢氧化钠溶液（ ）：  称取 氧化钠，溶于水并稀释至 1000  盐酸溶液（ 1： 1）：取 100水稀释至 200 氯化钠 酸性溶液（ 40 g/L）：于 10040 g/L）中加 酸酸化。  磷酸盐 缓冲液（ ）：称取 加水溶解，并定容至 1000 50%的  4密称取 4含量 中国医药集团上海化学试剂公司 )甲醇溶解并移入 100释至刻度。此溶液每毫升相当于  4冰箱中储存，有效期 1个月。临用时用甲醇稀释至每毫升相当于  4 仪器  组织捣碎机。  天平 （精度 。  超声波 仪。  均 质机（ 速度范围：  6,500  24,000   旋转蒸发仪。  酸度计。  高效液相色谱仪（带紫外检测器）。  5 分析方法  样品处理  称取经组织捣碎机捣碎的豆芽试样 10g（精确至  50 入 30用 均质机均质 （ 10,000 匀 38000r/0清 液转入 50品再用少量 氢氧化钠（ 复 提取 1次，离心后。合并上清液，并用 氢氧化钠（ 定容至刻度，摇匀。 取此液 50 盐酸溶液（  50取 3次，每次振摇 1并乙醚层，用 涤，弃去水层，乙醚层用旋转蒸发仪蒸至近干，用甲醇溶解并定容至  高效液相色谱分析。   2007 6 标准曲线  准确吸取每毫升相当于 400 甲醇稀释至刻度。制成浓度依次为 、 、 、 、 的标准溶液，供高效液相色谱分析。  色谱参考条件  色谱柱： B  250 5 m）。  检测波长： 228 流动相：甲醇 + 磷酸盐缓冲液（ 40+60）。  流速：  柱温： 30 。  测定  吸取 试样液注入高效液相色谱仪，按照 保留时间定性，标准曲线法定量。  结果计算  按外标法计算试样中 4 见下式：  010 00 m 式中：  X 试样中 4mg/ A 从标准