CART培训ppt课件.ppt

主讲人 2015 4 16 CAR T细胞治疗的介绍 目 录 1 2 3 4 5 6 相关概念介绍 文献研究 未来展望 CAR结构 T细胞活化 CAR T细胞治疗的流程 1 相关概念介绍 CAR T细胞治疗 利用基因工程修饰外周血T细胞 使其表达嵌合抗原受体来特异性的识别肿瘤相关性抗原的方法 MHC 由一群紧密连锁的基因群组成 定位于动物或人某对染色体的特定区域 呈高度多态性 其编码的分子表达于不同细胞表面 参与抗原递呈 制约细胞间相互识别及诱导免疫应答 T细胞 胸腺依赖性淋巴细胞是淋巴细胞的主要组分 它具有多种生物学功能 如直接杀伤靶细胞 辅助或抑制B细胞产生抗体 对特异性抗原和促有丝分裂原的应答反应以及产生细胞因子等 是身体中抵御疾病感染 肿瘤形成的 斗士 2 T细胞活化 TCR CD3 MHC 共刺激因子 细胞因子刺激 CAR CART细胞治疗的思路 承担T细胞识别抗原的重任 结构 T细胞 第一信号 3 CAR结构 识别肿瘤表面抗原的单链抗体 scFv 抗原结合部和免疫受体酪氨酸活化基序构成 目前 CAR的信号域已从第一代的单一信号分子发展为包含CD28 CD137等共刺激分子的多信号结构域 第二 三代 临床应用广泛 嵌合抗原受体的演化 第一代CAR 由识别肿瘤表面抗原的单链抗体 scFv 抗原结合部和免疫受体酪氨酸活化基序 通称为CD3 组成 缺点 T细胞增值时间短 细胞因子分泌率低 第二代 第三代CAR 引入了共刺激的双信号序列 目的 提高T细胞的细胞毒活性 增值性与存活时间 促进细胞因子的释放 CAR T细胞治疗优势 1 治疗更精准 应用基因修饰病人自体的T细胞 利用抗原抗体结合的机制 能克服肿瘤细胞免疫逃逸 让肿瘤细胞无所逃遁 2 多靶向更精准 CAR既可以利用肿瘤蛋白质抗原 又可利用糖脂类非蛋白质抗原 扩大了肿瘤抗原靶点范围 CAR T细胞作用过程不受MHC的限制 3 杀瘤范围更广 鉴于很多肿瘤细胞表达相同的肿瘤抗原 针对某一种肿瘤抗原的CAR基因构建一旦完成 便可以被广泛利用 4 杀瘤效果更持久 促进T细胞增殖与活化的基因序列 能保证T细胞进入体内后还可以增殖 免疫记忆功能 可以长期在体内存活 4 CAR T细胞治疗流程 CAR T细胞治疗过程和自体骨髓干细胞移植相似 Annu Rev Med 2014 文献介绍 研究病人的基线特征 方法 自体T细胞结合CD19靶向的嵌合抗原受体慢病毒载体 CTL019 复发或难治性ALL患者 30名患者 0 76 10 6 20 6 10 6CTL019cells kg 免疫应答 毒性效应 扩增数 持久性 CTL019Tcells 注入 检测 CTL019细胞生存率 Figure1 图A注入CTL019细胞后在6个月期间的无事件生存率为67 完全生存率为78 TheNEWENGLANDJOURNALofMEDICINE 2014 CTL019细胞的持续性 Figure2 CTL019持久性图A 流式检测外周血样中CTL019 阳性T细胞 1 25号儿童和26 30号成年人 图B 通过Kaplan Meiercurve曲线检测外周血和骨髓 6个月时 患者获得CTL019持续性的概率为68 TheNEWENGLANDJOURNALofMEDICINE 2014 CTL019细胞的扩增 Fig 2C通过实时定量PCR检测CTL019细胞在体内增殖 并可在响应患者的血液 骨髓和脑脊液中检测到高水平的增值 TheNEWENGLANDJOURNALofMEDICINE 2014 不良反应 Figure3 B细胞发育不全无复发患者B细胞发育不全的概率为73 延迟性B细胞再生障碍 TheNEWENGLANDJOURNALofMEDICINE 2014 不良反应 Figure4 相关的细胞因子释放症CTL019细胞注入病人28天后 IL 6大量释放 所有患者都有细胞因子释放综合症 其中27 的患者症状较严重 这与输注之前疾病负荷较高相关 这种症状经抗白细胞介素6受体抗体 塔西单抗有效治愈 TheNEWENGLANDJOURNALofMEDICINE 2014 结论 嵌合抗原受体 抗CD19修饰的T细胞疗法对治疗复发和难治型ALL是有效的 研究中30位接受此类治疗的急性淋巴细胞白血病病人中 有27位病人其癌症迹象消失 完全缓解率达到90 多数持续性长达24个月 6个月无症状生存率未67 2例在脑脊液中检测到肿瘤细胞的中枢神经系统 CNS 疾病患者在CART治疗后疾病消除 重要的是该组患者无复发 2 CTL019和高缓解率有关 即使是干细胞移植失败的患者也有效 02 01 细胞因子风暴T细胞在杀死其它细胞 会释放很多细胞因子 炎症反应 由于CAR T杀癌细胞太快 在局部产生超大量的细胞因子 如白介素6 引发起剧烈的免疫反应 脱靶效应CAR修饰的T细胞对靶抗原具有高亲和力 识别并且结合这部分抗原 导致对正常组织的异常免疫反应 造成器官损害 CAR T疗法的临床风险 诱人的应用前景 寻找其他分子靶点 提高CAR有效性和安全性 CAR修饰的T细胞肿瘤免疫治疗理论上的优势和临床前期实验结果 寻找肿瘤特异性抗原作为分子靶点和开发适合CAR的单链抗体 优化CAR的结构 筛选出良