叶片荧光测量实验报告

叶片荧光测量实验报告叶片荧光测量实验报告 1 实验目的实验目的 2 实验方法实验方法 利用 PAM100 荧光成像系统测量叶绿素荧光 3 实验原理及一些参数的意义实验原理及一些参数的意义 荧光的变化反映光合与热耗散的变化 光化学淬灭 光化学淬灭 Photochemical Quenching 由于光合作用引起的荧 光下降 反映了光合活性的高低 qP Fm Fs Fv 1 Fs Fo Fm Fo 基于 沼泽模型 qL Fm F Fm Fo Fo F qP Fo F 基于 湖泊模型 非光化学淬灭 非光化学淬灭 Non Photochemical Quenching 由于热耗散引起的 荧光下降 qN Fv Fv Fv 1 Fm Fo Fm Fo NPQ Fm Fm Fm Fm Fm 1 不需测定 Fo 适合野外调查 qN 或 NPQ 反映了植物耗散过剩光能转化为热的能力 反映了 植物的光保护能力 Fv Fm Fm Fo Fm PS II 的最大量子效率 反映植物潜在最大光 合能力 高等植物一般在 0 8 0 84 之间 当植物受到胁迫 Stress 时 Fv Fm 显著下降 PS II Yield Fm Fs Fm F Fm qP Fv Fm 任 一光照状态下 PS II 的实际量子产量 实际光合能力 实际光合效率 不需暗适应 不需测定 Fo 适合野外调查 Y NPQ 1 Y II 1 NPQ 1 qL Fm Fo 1 调节性能量耗散 PS II 处调节性能量耗散的量子产量 若 Y NPQ 较高 一方面表明植物接 受的光强过剩 另一方面则说明植物仍可以通过调节 如将过剩光 能耗散为热 来保护自身 Y NPQ 是光保护的重要指标 Y NO 1 NPQ 1 qL Fm Fo 1 非调节性能量耗散 PS II 处非调节性能量耗散的量子产量 若 Y NO 较高 则表 明光化学能量转换和保护性的调节机制 如热耗散 不足以将植物 吸收的光能完全消耗掉 也就是说 入射光强超过了植物能接受的 程度 这时 植物可能已经受到损伤 或者 尽管还未受到损伤 继续照光的话植物将要受到损伤 Y NO 是光损伤的重要指标 P 光合速率 即相对电子传递速率 rETR Pm 最大光合速率 即最大相对电子传递速率 rETRmax 初始斜率 反映了光能的利用效率 光抑制参数 Ik Pm 半饱和光强 反映了样品对强光的耐受能力 AL 作用光 ML 检测光 SP P Fsp 饱和脉冲光 注 光化学淬灭可以被一种短饱和脉冲光 0 2 1 s 暂时完全 抑制 剩余的荧光淬灭就是非光化学淬灭 叶绿素 a 荧光理论 及其应用 张西斌 4 实验步骤实验步骤 4 1 Dual Pam100 的操作步骤 4 1 1 参数调整 4 1 1 1 打开 Dual Pam100 的界面 更改下面参数 Mode fluo P700 Means light fiuo int 10 P700 int 5 Act light Act red right int 17 Far red light 5 Width 40s Sat pulse P F sp int 10 4 1 1 2 点 Light 进入界面 再点 edit 进行下面参数的编辑 Intense 1 4 8 12 14 16 18 19 20 Time 2 2 2 2 2 2 2 2 2 之后的全部设置为 0 4 1 2 进入测定界面开始测定 4 1 2 1回到 slow kinetics 界面 点击 F0 Fm 确定 Y II 值 0 8 0 85 之间 点 Bal 平衡光系统 I II 点 Pm 待回复灰色 点 start 过 4s 后 点 Al 作用光 过 3min 半 点 P F sp 饱和光 此时一般会观察到红色曲线 达到平衡 过 30s 左右关掉 Al 曲线会下降 再过 1min 左右 曲线平稳 点 stop 在当前界面点击曲线保存按钮保存曲线 4 1 2 2 回到 light curve 界面 点 Bal 点 start 出现对话框 new F0 Fm and Pm determindtion 点 NO 等曲线绘成后点 report 保存数据 数据保存后手动清空 当前界面数据 4 2 荧光成像系统的操作 先打开荧光成像仪再打开电脑对应系统 将叶片按要求放在叶室 4 2 1 进入 setting 界面 如下调整参数 Meas Light int 1 Frequence 1 Act light int 19 widths 0 Image Correction MAXI Image Transformation Rotate 180 Battery 16 3V Gain 1 Damping 2 Sat Pulse int 10 No 1 Intervals 30 Slow Induction Delays 40 clocks 20 Durations 315 Absorptivity Red Gain 30 red Intensity 3 NIR Intensity 23 Display Color Go Speed PS Limit 50 其他的参数基本不变 4 2 2 Imaging 界面 点 Reset 点 Add 增加测量部位 可多个添加 点 Measure Abs 吸光度 点 F0 Fm 点 Report 将该界面右侧荧光参数值全 部勾选 保存相应的数值 4 2 3 回到 Ligh