《细胞外基质》PPT课件.ppt

1 第十一章细胞外基质及其与细胞的相互作用 XiaoYong qing肖永清xiaoyq 中山大学中山医学院生物教研室 2 细胞外基质的主要组成成分 氨基聚糖和蛋白聚糖 凝胶样基质胶原和弹性蛋白纤粘连蛋白和层粘连蛋白 非胶原性黏合蛋白 胶原 纤粘连蛋白 层粘连蛋白 蛋白聚糖 纤维网架 3 氨基聚糖和蛋白聚糖是一些高分子的含糖化合物 构成细胞外高度亲水的凝胶 赋予组织良好的弹性和抗压性 细胞外基质的主要组成成分 氨基聚糖 glycosaminoglycan GAG 是由重复的二糖单位构成的直链多糖 又称粘多糖 二糖单位之一是氨基己糖 N 乙酰氨基葡萄糖或N 乙酰氨基半乳糖二糖单位另一个糖残基多为糖醛酸 葡萄糖醛酸或艾杜糖醛酸 糖残基带有羧基 呈强负电性据糖残基的性质 连接方式 硫酸化数量和存在的部位 可分为六种 4 透明质酸 hyaluronicacid hyanuroanate HA 结缔组织 皮肤 软骨 滑液 玻璃体 细胞外基质的主要组成成分氨基聚糖 5000 10000个二糖重复单位排列构成二糖为N 乙酰氨基葡萄糖 葡萄糖醛酸 是唯一不含硫酰酸基团的氨基聚糖其糖醛酸的羧基带有大量负电荷 其相斥作用使整个分子伸展膨胀 占据很大的空间 在有限的空间可产生膨压 赋予组织良好的弹性和抗压性其表面有大量亲水基团 可结合大量水分子 形成凝胶在组织创伤 早期胚胎中尤为丰富 促进细胞迁移和增殖胚胎发育早期的空间填充物 用于定形 如心脏形成作为关节液的重要成分 有润滑作用 5 硫酸软骨素 chondroitinsulfate CS 软骨 角膜 骨 皮肤 动脉 细胞外基质的主要组成成分氨基聚糖与蛋白聚糖 硫酸皮肤素 dermatansulfate DS 皮肤 血管 心 心瓣膜硫酸乙酰肝素 heparansulfate HS 肺 动脉 细胞表面肝素 heparin 肺 肝 皮肤 肥大细胞硫酸角质素 keratansulfate KS 软骨 角膜 椎间盘 6 蛋白聚糖 proteoglycan PG 是由氨基聚糖 除透明质酸外 与核心蛋白共价形成的高分子复合物 不同于一般糖蛋白 细胞外基质的主要组成成分氨基聚糖与蛋白聚糖 分子量大 含糖量高 可达95 多为较长的 不分枝的GAGs糖链核心蛋白为单链多肽 其上可连接1 100条以上氨基聚糖 可为不同的氨基聚糖 形成蛋白聚糖 若干个蛋白聚糖单体通过连接蛋白 以非共价键与透明质酸结合 形成蛋白聚糖多聚体 如软骨中的蛋白聚糖复合体 见下图 7 PG 细胞外基质的主要组成成分蛋白聚糖 HA 蛋白聚糖电镜 8 细胞外基质的主要组成成分氨基聚糖与蛋白聚糖 透明质酸 硫酸角蛋白 硫酸软骨素 连接蛋白 核心蛋白 细胞外基质中的蛋白聚糖多聚体氨基聚糖为硫酸软骨素和硫酸角质素 糖链数约130余条左右 分子量为3 109 使软骨具有良好的弹性和抗压性 9 蛋白聚糖在内质网合成并装配 细胞外基质的主要组成成分氨基聚糖与蛋白聚糖 有的蛋白聚糖也是质膜的整合成分 如成纤维细胞和上皮细胞质膜中的连接素 syndecan 其核心蛋白以跨膜糖蛋白的方式嵌入质膜脂双层 胞外区连有硫酸软骨素和硫酸类肝素氨基聚糖糖链 可与细胞外基质的胶原 纤粘连蛋白 以及信号分子结合胞内区肽段可与膜下细胞骨架相互作用 10 氨基聚糖和蛋白聚糖的功能 细胞外基质的主要组成成分氨基聚糖与蛋白聚糖 使组织具有弹性和抗压性对物质转运有选择渗透性其糖基纵横交错 构成高度水化孔胶样物 孔的大小和电荷密度可调节对分子及细胞的通透性如肾小球基膜中的硫酸软骨素蛋白聚糖对原尿的生成即具有筛滤作用角膜中蛋白聚糖具有透光性硫酸软骨素 硫酸角质素高度硫酸化使基质脱水变得致密 阻止血管的形成 使角膜柔软 具有透光性 角质化亦有保护作用氨基聚糖具有抗凝血作用肝素蛋白聚糖由靠近血管的肥大细胞产生细胞表面的氨基聚糖有传递信息作用如连接素 11 氨基聚糖与蛋白聚糖与组织老化有关 随着年龄增长 细胞外基质的主要组成成分氨基聚糖与蛋白聚糖的功能 如皮肤中透明质酸逐渐减少 后逐渐被硫酸皮肤素所取代关节软骨中的蛋白聚糖逐渐减少 可硫酸软骨素被硫酸角质素取代蛋白聚糖糖链比例下降 导致组织的保水性及弹性减弱氨基聚糖的阴离子可结合钙离子 在组织的钙化 尤其是骨盐的沉积中起重要作用 12 氨基聚糖和蛋白聚糖的与疾病粘多糖累积病Hunter综合症动脉粥样硬化脂类沉积肿瘤的发生 细胞外基质的主要组成成分氨基聚糖与蛋白聚糖 13 胶原与弹性蛋白 细胞外基质的主要组成成分胶原 Humancollagenfibers 胶原 横切面电镜 成纤维细胞 胶原 collagen 是细胞外基质中的骨架结构占哺乳动物总蛋白量的1 4 含量最丰富可由成纤维细胞 软骨细胞 成骨细胞及某些上皮细胞合成并分泌到细胞外 14 胶原分子结构为三股螺旋 triplehelix 3条 多肽链盘绕而成 长300nm 直径1 5nm 细胞外基质的主要组成成分胶原 每条肽链约1050aa 人类 其中Gly占1 3 同时富含Pro和Lys 2种氨基酸经常羟基化形成Hypro和Hylys Lys选择性糖基化肽链中的氨基酸组成规律的三肽重复序列Gly X Y X可为任一氨基酸 多为Pro 其环状结构稳定 螺旋构象 Y可为任一氨基酸 多为Hy pro或Hy lys甘氨酸 Gly 最小的氨基酸 适于在紧密的三股螺旋中心 15 胶原的类型 链是胶原的基本亚单位 不同的 链组合生成不同类型的胶原 目前已发现25种不同的 链 26种胶原 细胞外基质的主要组成成分胶原 I型胶原 1 I 2 2 I 存在于肌腱 皮肤 骨 韧带II型胶原 1 II 3 存在于软骨III型胶原 1 III 3 存在于皮肤 肌肉 结缔组织 在血管壁和各种软组织或器官间质形成微细的纤维网 常与I型共分布IV型胶原 1 IV 2 2 IV 仅存基底膜 16 胶原的合成装配 I III型 前 链 pro chains 带有信号肽和前肽 propeptide 不含Gly X Y结构去除信号肽 选择性羟基化 糖基化C 端前肽借二硫键形成链间交联 使3条对齐排列 3条 链以氢键相连 形成三股螺旋 前肽部分不螺旋前胶原 pro collagen 分泌到细胞外 去除前肽 相邻分子相错1 4长度 约67nm 前后分子相距约35nm 聚合形成明暗相间的纤维胶原原纤维 collagenfibril 细胞外基质中聚集成束胶原纤维 collagenfiber 细胞外基质的主要组成成分胶原 内质网 高尔基体 细胞外 17 细胞外基质的主要组成成分胶原 前 链的合成 选择性羟基化 选择性糖基化 3条 链的自组装 三螺旋的前胶原分子形成 分泌 前肽的剪接 自组装成胶原原纤维 聚集成胶原纤维 二硫键 胶原的合成装配 I III型 18 细胞外基质的主要组成成分胶原 共价键 螺旋胶原分子在细胞外基质组装 相邻分子相错1 4长度 约67nm 前后分子相距约35nm 聚合形成明暗相间的胶原原纤维 19 IV型胶原在 链中不含规则的三肽重复序列 Gly x y 细胞外基质的主要组成成分胶原 IV型胶原构成基膜骨架 不形成 螺旋结构前胶原分子的前肽不被切除C 端 头对头 形成二聚体几个二聚体再交联形成网络结构 构成基膜的骨架 20 细胞外基质的主要组成成分胶原 IV型胶原组装成基膜电镜 21 胶原的降解胶原的周转很缓慢 成年人骨中的胶原分子 可维持达10年 一般的蛋白质半衰期为数小时或数天 细胞外基质的主要组成成分胶原 胶原的功能与相关疾病协助完成细胞生长 粘附 运动 增殖 分化粘连 支持 保护细胞连聚为组织 器官 如 羟化赖氨酸和弹性蛋白交连 使组织有弹性 交联受阻 胶原病缺抗坏血酸 vitaminC 脯氨酸羟化受阻 不利于交联氢键的生成 影响胶原的稳定 胶原分子生长不良 间质胶原大大减少 血管变脆 牙龈出血 引起坏血病肝肺纤维化 胶原生成失衡 22 弹性蛋白 elastin 是构成细胞外基质中弹性纤维网络的主要成分 是高度疏水的非糖基化纤维蛋白 细胞外基质的主要组成成分弹性蛋白 为高度疏水蛋白 830aa 富含脯氨酸 甘氨酸 丙氨酸 缬氨酸 无糖基化 很少有羟脯氨酸 不含羟赖氨酸主要由2类片段组成 疏水性短肽与分子的的弹性有关 螺旋片段富含丙氨酸 赖氨酸 与相邻分子形成交联 Elasticfiber Singleelastinmolecule 23 弹性蛋白以可溶性蛋白原的形式分泌到细胞外 通过赖氨酸残基之间相互交联装配 形成弹性纤维网 细胞外基质的主要组成成分弹性蛋白 胶原纤维与弹性纤维交织 可以限制其伸展程度 防止组织撕裂 使组织既有弹性又有韧性弹性蛋白表面包饶一层糖蛋白组成的微原纤维 microfibrils 其中原纤蛋白 fibrillin 是保持弹性纤维完整所必需的成分 其基因突变 可导致马凡氏综合症 Marfan ssyndrome 弹性蛋白是动脉中含量最高的细胞外基质蛋白 其基因突变可导致动脉壁平滑肌过度增殖引起动脉狭窄 24 纤粘连蛋白 fibronectin FN 为高分子糖蛋白 含糖量4 5 9 5 其含糖量因组织不同和分化状态不同而有差异 有两种存在形式 细胞外基质的主要组成成分纤粘连蛋白 血浆纤粘连蛋白 plasmafibronectin PF 主要存在于体液 血浆中 促进血液凝固 创伤愈合 细胞吞噬细胞纤粘连蛋白 cellsurfacefibronectin CF 高度不溶 主要存在于细胞外基质和细胞表面 CF在细胞表面装配 沉积在细胞外基质 包括某些基膜 主要由间质细胞分泌 25 有许多结合位点 可结合ECM成分或细胞每条肽链约含2450aa 构成5 7个有特定功能的球形结构域各结构域之间的肽段可折曲 对蛋白酶敏感具有三肽序列Arg Gly Asp RGD 结合活性部位 是细胞表面各种FN受体识别并结合的最小单位 但并非FN所特有 细胞外基质的主要组成成分纤粘连蛋白 FN结构特点 FN电镜 纤维状糖蛋白 由2个相似的亚单位构成二聚体 二聚体C端以二硫键相连 V 形 活动度大其中PF为二聚体 CF为二聚体交联后形成的多聚体 26 Heparin and fibrin bindingdomain Collagen bindingdomain Fibrin bindingdomain Cell bindingdomain Heparin bindingsite Fibrin bindingsite RGDstandsforthecellbindingsitesequence Arg Gly Asp 人的FN分子含有两条相似多肽 两多肽由C端二硫键相连 细胞外基质的主要组成成分纤粘连蛋白 结合肝素 纤维蛋白的结构域 结合胶原的结构域 结合纤维蛋白的结构域 结合细胞的结构域 结合肝素的结构域 结合纤维蛋白的结构域 27 FN功能 细胞外基质的主要组成成分纤粘连蛋白 介导细胞 细胞外基质的黏着与细胞的迁移 在黏着斑处FN受体通过FN与细胞外基质相连 通过黏着斑的形成于解离 影响细胞骨架的组装与去组装 促进细胞迁移在胚胎发生期引导细胞迁移及细胞分化在组织创伤中 PF可结合血浆纤维蛋白 在伤口处吸引成纤维细胞平滑肌细胞 和内皮细胞向伤口迁移 形成肉芽组织FN与疾病肾小球炎恶性肿瘤中的FN受体异常 细胞黏着能力下降 28 层粘连蛋白 laminin LN 是胚胎发育中出现的最早的细胞外基质成分 为糖蛋白 含糖13 28 结构复杂 功能多样 细胞外基质的主要组成成分层粘连蛋白 LN分子结构 链 链 球形结构域 缠绕的 螺旋结构域domain 链 Laminin 1结构 29 高分子糖蛋白 分子量820 850Da 300nm长由 三条多肽组成的异三聚体一条重链 与两条轻链 以二硫键相连 呈不对称十字结构 三条短臂 N 端 一条长臂 短臂上有2个球形结构域和一个短杆区 短臂上有2 3个球形结构域及2个短杆区 长臂由3条肽链的近C 端形成 长臂末端的的大球区仅由 链C端卷曲而成 细胞外基质的主要组成成分层粘连蛋白 至少有8个细胞结合位点 结合上皮细胞 内皮细胞 成纤维细胞 神经元 神经鞘细胞 肿瘤细胞等是一个大的蛋白家族 现已鉴定出8种不同一级结构序列的LN亚单位 30 LN的功能 细胞外基质的主要组成成分层粘连蛋白 基膜的主要成分具有RGD序列 被各种细胞识别 从而固定在基膜上在早期胚胎中保持细胞间的黏附 细胞的极性 及细胞的分化具有重要意义LN与疾病糖尿病基底膜的改变 31 基膜 基底膜 basallamina或basementmembrane 是细胞外基质的特化的柔软 坚韧的网膜结构一般厚40 120nm 位于上皮细胞或内皮细胞基底部 或包绕在肌细胞 雪旺氏细胞周围 将细胞与结缔组织隔离 细胞外基质的主要组成成分基膜 Basallamina Basallamina Basallamina 上皮细胞 内皮细胞 结缔组织 肾小球 上皮 肌肉 肌肉细胞质膜 结缔组织 BLOOD 32 细胞外基质的主要组成成分基膜 质膜 内联蛋白