论文撰写模板 5、正文

论文撰写模板论文撰写模板 5 5 正文 正文 第一章前言1 1发展生化 下游 技术的意义现代生物技术的迅猛发 展使当今世界发生了日新月异的变化 迄今为止 人们已经能够设计 制造 生产多种具有重要价值的蛋 白质 如胰岛素 insulin 白细胞介素 interleukin 干扰 素 interferon 促红细胞生长素 EPO 和肿瘤坏死因子 TNF 等 1 2基因工程蛋白质分离纯化的原则生物产品有许多使生物高分 子 必须考虑到产品的变性和活性恢复等问题 如果选取的条件合适 也可以通过耦合不同技术来改进分离工艺 一般认为 要实现基因工程蛋白质分离纯化的高效率 高纯度和低 成本必须做到以下几点 使用温和 高效的方法 尽可能地减少 操作步骤 减少化学和生化试剂地使用 Prokopakis等提出了优化分离纯化步骤的基本规则 用以指导分离 纯化操作的改进 具体规则如下 选择分离操作必须基于产品的物理化学性质和生化 性质 高产量的杂蛋白必须要除去 最高效率地利用目标产物 与杂质间地理化性质差异 尽可能地将高效的步骤放在前面 把操作最困难的步骤放在最后 1 2 1 3现有白细胞介素 13的分离纯化方法1993年 Mckenzie首次提出 白细胞介素 13 IL 13 的名字 此后 人们逐渐发现了IL 13 的许多生物学活性刺激前髓样细胞 TF 1 的增殖 直接诱 的 增殖及分化 导原始造血前体细胞 Lin Sca 1 第一章 与 前言 及 前 与 言 之间均加两个空格 根据大标题字数多 少适当调整黑体三号居中 行间距21磅 段前后间距 12 18磅标题另起一行居右 黑体四号 行距21磅 段前后间距均 为12磅加一空格正文部分宋体小四 行间距21磅 段前后间距为0字 体Times newroman 小四 右上角标第二章实验材料与方法2 1概述本论文主 要从IL 13地分离纯化入手 将传统的细胞破碎和双水相萃取 选 择PEG盐系统 用于IL 13的提纯 2 2 实验材料与方法2 2 1实验仪器设备 2 2 3实验方法1 菌种 培养 母液的配置 操作方法按事先计算 取一定量的PEG母液 盐母液核细胞碎片固体 超声波破碎 4000r min离心收集 用 NaOH或盐酸调节pH值 加水至要求的浓度 计算GST IL 13 的萃取率bbbtttttctvgvwwcv w c 2 1 标题另起一 行 黑体小四号 行距21磅 段前后间距均为6磅公式前后各空一行 用公式器 单倍行距 居中居右标题前空两格 2 2 1 之后加一空 格 下同第三章实验结果与讨论3 1GST I L 13的培养3 2GST I L 13总含量的测定3 3化学破碎3 3 1pH的影响pH对蛋白质释放的影响 见图3 8 pH的作用主要是影响蛋白质的电离平衡 从而影响到其融解性 JM109菌的细胞壁蛋白在微碱性师的融解性较高 同时这又很接近细 胞本身的生长环境 故蛋白质不会发生结构上的改变 从图中也可以知道 pH以8 0左右为宜 00 20 40 60 811 21 41 6678910pH蛋白质浓度 g mL 1GST IL 13总蛋白图3 8pH化学破碎的影响 3 4双水相萃取的研究本文分 别考察了PEG600 PEG1540 PEG4000 PEG6000与不同的盐 硫酸铵 硫酸镁 硫酸钠 磷酸钠 构成的双水相体系 系统分析了蛋白 质 GST IL 13和细胞碎片的分布规律 图居中 图中文字为五号字体五号字体 序号与图题之间加空格 段前 后间距分别为6磅 0磅图前后空一行3 4 1不同PEG分子量萃 取结果的影响表3 4平均相对分子质量对双水相萃取结果的比较相组 成A BC D蛋白收率 64 369 568 741 2GST IL 13 58 178 471 518 9成 相情况上清 下微浊上下清上清 下浊上下相浑浊A PEG600 26 硫酸铵 14 B PEG1540 25 硫酸铵 12 C PEG600 25 硫酸铵 8 D PEG1540 20 硫酸铵 10 五号宋体居 中 段前 后间距分别为0磅 6磅五号或更小字体 说明性文字在 表下方 宋体五号表前空一行表后空一行表编号后空一格上下两根 线粗3 2磅 中间一根1 2磅第四章结论与展望4 1结论 通过正交实 验设计 对化学渗透法破碎JM109菌的各影响因素进行了实验研究和 显著性分析 确定了各影响因素显著性的大小 并对各显著因子进 行了单独实验 确定处适宜的破碎条件为盐酸胍7 0mol L Triton X 1000 5 pH为8 0 综合比较了超声波细胞 4 2对进一步研究的展望本实验对基因 工程菌JM109中以包涵体形式存在的外源融合蛋白GST IL 13进行 了细胞破碎 超声波法 化学渗透法 包涵体融解 双水相萃取 等方面的实验研究 确定了最佳的细胞破碎 双水相萃取的工艺路 线和工艺条件 并取得较为满意的结果 为下一步的研究工作奠定 了良好基础 进一步的研究工作主要包括 目标产物GST IL 13的进一步纯化 目标产物GST IL 13的酶切和折叠复性实验 尽可能地