食品检验与分析重点

绪论绪论 食品食品检验检验与分析常用的方法 与分析常用的方法 感官感官检验检验 是根据人的感觉器官来检查食品的外形 色泽 味道以及食品的稠 度 以确定食品品质的优劣的一种检验方法 特点 方便快捷 可在室内室外进行 缺点 主观影响比较大 标准难以统一 化学分析法化学分析法 以分析化学为基础 用食品检验分析理论为指导 按照一定方法 进行的检验方法 主要有重量法 容量法 滴定法 比色法 比色法主要有紫外分光光度法 可见光分光光度法 特点 仪器方便 准确性好 重现性好 仪仪器分析法器分析法 现代分析技术的发展 开发的凯氏定氮仪 电泳 旋光仪和色谱 技术 尤其以色谱技术发展最快 包括薄层层析 气相色谱 液相色谱 气 质 联用色谱 原子吸光色谱 核磁共振 食品食品酶酶法分析法分析 利用酶的专一 高效的特点 解决在复杂组分中检测出某一种 成分含量的问题 葡萄糖氧化酶 过氧化氢酶 黄嘌呤酶 脲酶等 食品微生物食品微生物检验检验 以细菌 大肠杆菌等为食品卫生的指标 或者采用微生物法 间接检测维生素 抗生素残留 激素残留 特点 检测限很低 可达 ppm 克服被测物质易被分解的弱点 标标准的分准的分类类 国国际际 国家国家 行行业业 地方地方 企企业业 在研究一个分析方法时 通常用精密度精密度 准确度准确度和灵敏度灵敏度这三项指标评价 指指标标 1 准确度 准确度 指测定值与真实值的接近程度 反映测定结果的可靠性 准确度的高 低可用误差或回收率来表示 误差 指测测量量值值与真与真实值实值之间的差别 绝对误差 测定结果与真实值 通常用平均值代表 之差 X X 真真 相对误差 绝对误差占真实值的百分率 X X 真真 X 真真 100 2 回收率 回收率 P x1 x0 m 100 误差越小或回收率越大 则准确度越高 回收率回收率实验实验 样品中加入标准物质 测定其回收率 可以检验方法的准确程度和 样品所引起的干扰误差 并可以同时求出精确度 3 精密度 精密度 指多次平行测定结果相互接近的程度 它代表测定方法的稳定性和重 现性 精密度的高低用偏差来衡量 绝对偏差 在相同条件下进行 n 次测定 测定结果与测定平均值的偏差 d xi 分析结果的精密度可用多次测定结果的平均平均绝对绝对偏差偏差 表示 相对偏差 绝对偏差占平均值的百分比 相对算术平均偏差 d 100 标准偏差 S d2 n 1 相对标准偏差 变变异系数异系数 S x 100 因此通常用 标标准偏差准偏差 和 变变异系数异系数 来表示一种分析方法的精密度 灵敏度灵敏度 分析方法所能分析方法所能检测检测到的最低限量 到的最低限量 在选择分析方法时 要根据待待测测成分的含量范成分的含量范围围选择适宜的方法 有效位数有效位数 加减法计算结果 其小数点以后保留的位数 应与参加运算各数中小数点以后位 数最少者相同 乘除法计算结果 其有效数保留的位数 应与参加运算各数中有效数字最少者相 同 控制和消除控制和消除误误差的方法差的方法 1 对各种试剂 仪器进行校正 1 各种计量测试仪 如天平 分光光度计 应定期送计量管理部门鉴定 以保证 仪器的灵敏度和准确度 2 各种标准试剂 标准试剂应按规定 定期标定以保证试剂的浓度和质量 2 增加测量次数 平行实验次数越多 取其算术平均值 就可减少偶然误差 使 测定值接近真实值 但实际中往往不测定许多次 而且也没必要 这样造成人力 物力 时间上的浪费 每个样品测定 2 3 次 只要误差在规定的范围内 取起平均 值 一般要求 Cv 小于 5 严格讲应在 2 以内 3 作空白实验 空白实验的目的 就是在测定值中和扣除空白值 可以抵消许多不明因素的影响 测定值 空白值 对于作空白实验 精密度可用相差和相对相差来表示 4 作对照实验 在测样品的同时 以标准品为对照 抵消许多不明了的因素 5 回收实验 样品中加入标准物质 测定其回收率 可以检验方法的准确程度和样品所引起的 干扰误差并可以同时求出精确度 6 正确选取样品的量 正确选取样品的量对于分析结果的准确度是很有关系的 例如常量分析 滴定量 或重量过多过少都是不适当的 7 标准曲线的回归 标准曲线常用于确定未知浓度 其基本原理是测量值与标准浓度成比例 在用比色 荧光 分光光度计时 常常需要制备一套标准物质系列 例如在 721 分光光度计上测出吸光度 E 根据标准系列的浓度和吸光度绘出标准曲线 但是 在绘制标准曲线时点阵往往不在一条直线上 对这种情况我们可用回归法求出 该线的方程就能最合适的代表此标准曲线 第一章第一章 食品抽食品抽样样及水及水产产品感官品感官检验检验 食品分析食品分析过过程程 样品的采集 制备和保存 样品的预处理 成分分析 数据记录 整理 分 析报告的撰写 正确采正确采样样的原的原则则 1 采集的样品必须有均匀 代表性均匀 代表性 2 采样方法要与分析目的一致 3 采样及样品制备过程中设法保持原有的理化指标 避免预测组分发生化学变化 或丢失 4 防止和避免预测组分的污染 5 采样方法要尽量简单 处理装置尺寸适当 第一种采集方法是随机抽随机抽样样 第二种采集方法是代表性抽代表性抽样样 有完整包装完整包装 桶 袋 箱等 的食品首先根据下列公式确定取样件数 式中 n 为取样件数 N 为总件数 四分法四分法 为为什么要什么要对样对样品品进进行行预处预处理 理 食品的组成十分复杂 其中的杂质或某些组分 如蛋白质 脂肪 糖类等 对分 析测定常常产生干干扰扰 使反应达不到预期的目的 此外 有些被测组分在样品中 含量很低时 测定前还必须对样品进行浓缩浓缩 以便准确测出它们的含量 总总的的处处理原理原则则 消除干扰因素 即干扰组分减少至不干扰被测组分的测定 完整保留被测组分 即被测组分在分离过程中的损失要小至可忽略不计 使被测组分浓缩 以便获得可靠的检测结果 选用的分离富集方法应简便 常用的常用的预处预处理方法 理方法 有机物破坏法有机物破坏法 蒸蒸馏馏分离法分离法 溶溶剂剂提取法提取法 色色层层分离法分离法 化学分离法化学分离法 浓缩浓缩 干法湿法灰化的干法湿法灰化的优优缺点 缺点 干灰化法的干灰化法的优优点 点 破坏彻底 简便易行 消耗药品少 适用于除 Pb As Hg Sb 以 外的其他金属元素的测定 干灰化法的缺点 干灰化法的缺点 破坏温度高 操作时间长 易造成某些元素的损失 湿法灰化湿法灰化优优点 点 加热温度低 减少了低沸点元素挥发散失的机会 湿法灰化缺点 湿法灰化缺点 在消化过程中产生大量酸雾和刺激性气体 对人体有害 因此 整个消化过程必须在通风柜中进行 第二章第二章 感官感官检验检验 定定义义 是根据人的感觉器官来检验食品外形 色泽 味道以及食品的质地 此项鉴 定是任何方法中不可缺少的一项 而且是作各种分析方法之前进行的 所以感官 鉴定也是很重要的一项 感官感官检验检验的分的分类类 嗅 嗅觉检验觉检验 视觉检验视觉检验 味味觉检验觉检验 触触觉检验觉检验 感官感官检验优检验优点 点 1 通过对食品感官性状的综合性检验 可以及时 准确地鉴别出食品质量有无 异常 便于早期发现问题 及时进行处理 可避免对人体健康和生命安全造成 危害 2 方法直观 手段简便 不需要借助任何仪器设备和专用 固定的检验场所及专 业人员 3 感官鉴别方法能够察觉其他检验方法无法鉴别的食品特殊性污染微量变化 第三章第三章 原料原料鱼鱼和肉和肉鲜鲜度度检验检验 采用指标 挥发挥发性性盐盐基氮基氮 组组胺胺 吲哚吲哚 K 值值 1 挥发挥发性性盐盐基氮基氮 挥发挥发性性盐盐基氮基氮 TVBN 指动物性食品由于酶和细菌的作用 在腐败过程中 使蛋 白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质 此类物质呈碱性 具有挥发性 称 为总的挥发性盐基氮 腐败程度的指标 检测检测方法 方法 半微量蒸馏法 一 原理 一 原理 挥发 挥发性含氮物质在碱性溶液中加热可释放出 吸收 挥发后吸收于硼酸吸收液中 滴定 生成的硼酸铵用标准酸滴定 计算含量 反应物质量对应关系 NH3 HCl 二 步二 步骤骤 1 样品处理 将样品除去脂肪 骨及腱后 切碎搅匀 称取约 10 00g 于锥形瓶 中 加 50mL 水 不时振摇 浸渍 30min 后过滤 20 TCA 10ml 过滤 反复洗 涤沉淀 合并滤液于容量瓶中 定容 2 蒸馏 向接收瓶内加入 2 硼酸 10mL 及 2 滴混合指示剂 并使冷凝管下端插 入液面下 蒸馏水中加入甲基橙指示剂数滴 再加入稀硫酸 使溶液保持橙红色 吸取 10 0mL 样品液注入凯氏定氮仪的反应室中 用 10mL 蒸馏水冲洗进样 入口 再加 5mL 氧化镁悬液 1 塞好入口玻璃塞 用少量蒸馏水冲洗进样入 口 且在入口处加水封好 防止漏气 打开水蒸汽发生器与反应室之间的夹子 蒸汽通入反应室 徐徐蒸馏 使氨气 被蒸发出来 并通过冷凝管而进入接收瓶内 以第一滴馏液滴下开始计时 蒸馏 5min 停止蒸馏 结束 取下接收瓶 移去热源 松开水蒸汽发生器瓶上的夹子 迅速夹紧水蒸汽发 生器和反应室之间的夹子 将废液排出 用蒸馏水将冷凝管和接收管洗涤 合并 入吸收液 3 滴定 微量酸式滴定管盛盐酸标准滴定溶液 0 01mol L 或硫酸标准滴定液 吸 收液用标准酸滴定 边滴定边振荡 直到溶液由绿色变为蓝紫色 同时做试剂空 白试验 三 三 计计算算 样品中挥发性盐基氮的含量 mg 100g V1 V2 C1 14 m1 10 100 100 V1 测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积 ml V2 试剂空白消耗盐酸或硫酸标准液体积 ml C1 盐酸或硫酸标准溶液的实际浓度 mo Ll 14 与 1 00mL 盐酸标准滴定溶液 C HCl 1 000 mol L 或硫酸标准滴定 溶液 C 1 H2SO4 1 000mol L 相当的氮的质量 mg m1 样品质量 g 允许差 相对偏差 10 四 四 实验实验注意事注意事项项 1 蒸馏时 蒸汽发生要均匀充足 蒸馏中途不得停火断汽 否则发生倒吸 2 加碱要足量 反应室液体呈深蓝色或褐色 并且碱液不能污染冷凝管及 接收瓶 3 蒸馏水应保持酸性 防止水中的游离氨被蒸出而使结果偏高 4 蒸馏是否完全 可用精密 pH 试纸测试冷凝管出口的冷凝液是否呈碱性 来确定 微量微量扩扩散法散法 一 原理 一 原理 挥发 挥发性含氮物质在 37 可在碱性溶液中释放出 吸收 挥发后吸收于硼酸吸收液中 滴定 生成的硼酸铵用标准酸滴定 计算含量 二 分析步二 分析步骤骤 1 样品处理 取 10 0 克肉 在研钵中研碎 加入 50mL 水 移至烧杯中 充分搅拌 浸 提 30min 然后加入 20 过氯酸 10mL 沉淀蛋白质 充分搅拌 过滤 蒸馏水多次冲洗 收集滤液于 100mL 容量瓶中 定容 2 加样 将水溶性胶涂于扩散皿的边缘 在皿中央内室加入 1mL 硼酸吸收液及 1 滴混合指示液 溶液呈红紫色 在皿外室一侧加入 1mL 的样液 另一侧加入 1mL 饱和碳酸钾溶液 注意 勿使两液接触 立即盖好 3 反应 用毛玻璃密封后 将皿于桌面上轻轻转动 使样液与碳酸钾溶液混合 然后于 37 温箱内放置 2h 溶液呈绿色 4 滴定 揭去盖 用盐酸或硫酸标准滴定液 0 100mol L 滴定内室的吸收液 终 点至蓝紫色 同时做试剂空白试验 三 三 计计算算 挥发性盐基氮的含量 mg 100g V1 V2 C1 14 m1 1 100 100 V1 测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积 ml V2 试剂空白消耗盐酸或硫酸标准液体积 ml C1 盐酸或硫酸标准溶液的实际浓度 mo Ll 14 与 1 00mL 盐酸标准滴定溶液 c HCl 1 000mol L 或硫酸标准滴定溶液 c 1 H2SO4 1 000mol L 相当的氮的质量 mg m1 样品质量 g 允许差 相对偏差 10 四 注意事四 注意事项项 1 在康威氏皿的外室 样液和饱和碳酸钾溶液在密封前绝对不能混合 防止生成 的氨挥发 密封后 将皿在桌上轻轻转动 应注意不要使外室的溶液进入内室 2 康威氏皿一定要保证密封 3 反应温度应该保持在 37 温度过高会使蛋白质分解 导致结果偏高 2 三甲胺 三甲胺 氮的氮的测测定定 苦味酸比色法苦味酸比色法 一 原理 一 原理 将三甲胺抽提于无水甲苯中 与苦味酸作用 形成黄色的苦味酸三甲胺 盐 于 410nm 下有最大吸收 然后与标准管同进比色 即可测得检样中三甲胺氮 含量 为为什么无水 什么无水 苦味酸三甲胺性质 易溶于甲苯溶液中 以分子状态存在 在水溶 液中以离子状态存在 加入甲加入甲醛醛的目的 的目的 消除氨的干消除氨的干扰扰 3 组组胺的胺的检测检测 在青皮青皮红红肉肉鱼鱼中 金枪鱼 鲐鱼 鳀鱼 所含组氨酸在弱酸性条件下经细细菌菌的作 用后 摩尔根变形杆菌 组胺无色菌 脱脱羧羧产生组胺 4 次黄 次黄嘌嘌呤与呤与 K 值值 鱼类的肌肉运动必须依靠三磷酸腺苷 ATP 转化提供能量 而鱼体死后其体内 所含 ATP 按下列途径分解 ATP ADP 二磷酸腺苷 AMP 磷酸腺苷 IMP 肌苷酸 HxR 肌苷 Hx 次黄嘌呤 K 值是以核苷酸的分解产物作为指标的鲜鲜度度判定方法 简简答答题题 K 值值与与挥发挥发性性盐盐基氮的区基氮的区别别 因为动物一旦生命活动停止 ATP 的降解作用就开始 ATP 的降解早于 蛋白质的降解 伴随着次黄嘌呤等降解产物的生成 此时蛋白质还没有开 始分解 当 ATP 的降解产物次黄嘌呤和黄嘌呤浓度很高时 挥发性盐基 氮还很低 K 值是反映水产品鲜度的指标 当挥发性盐基氮的含量较高时 水产品往往鲜度就比较差 因此挥发性盐 基氮的含量是表示水产品腐败变质的指标 第四章第四章 水分和水分活度水分和水分活度值值的的测测定定 1 直接法 利用水分本身的物理性质 化学性质测定水分 重量法 蒸馏法 卡尔 费休法 2 间接法 利用食品的物理常数通过函数关系确定水分含量 如测相对密度 折射率 电导 旋光率等 直接法比直接法比间间接法准确度高 接法准确度高 干燥法 干燥法 干燥法的前提条件 使用范干燥法的前提条件 使用范围围 水分是唯一的挥发的物质 不含或含其它挥发性成分极微 水分的排除要完全 含胶态物质 含结合水量高的样品 常压很难把水除去 只好用真空干燥或冻干除去结合水 食品中其它成分由于受热而引起的化学变化可以忽略不计 还原糖 氨基化合 物 变色 H2O 美拉德反应 脂质受热自动氧化 因此含糖和脂质较高的样 品不合适 直接干燥法直接干燥法 原理 原理 利用食品水分的物理性质 在 101 3KPa 一个大气压 温度 101 105 下采用挥发方法测定样品中干燥减失的重量 包括吸湿水 部分结晶水和该条件 下能挥发的物质 再通过干燥前后的称量数值计算出水分的含量 适用范围 本标准中直接干燥法适用于在 101 105 下 不含或含其他挥发性物质甚微的谷 物及其制品 水产品 豆制品 乳制品 肉制品及卤菜制品等食物中水分的测定 不适于水分含量小于 0 5g 100g 的样品 最后两次重量之差最后两次重量之差 2 mg 常常压压干燥法操作干燥法操作过过程 程 固体试样 清洗称量皿 烘至恒重 m3 称取样品加称量皿 m1 放入调好温度的烘箱 101 105 烘 2 4 小时 于 干燥器冷却 称重 再烘 1 小时 于干燥器冷却 称至恒重 m2 两次重 量差不超过 0 002g 即为恒重 水分的计算 水分 g 100g m1 m2 m1 m3 100 简简答答题题 烘箱干燥法 烘箱干燥法产产生生误误差的原因差的原因 1 样品中含有非水分易挥发性物质 酒精 醋酸 香精油 磷脂等 2 样品中的成分和水分的结合 限制水分挥发 使测的结果偏低 如蔗糖水解为二 分子单糖 3 食品中的脂肪与空气中的氧发生氧化 使样品重量增重 4 在高温条件下物质的分解 果糖对热敏感 果糖大于 70 C6H12O6 C6H6O3 3H2O 5 被测样品表面产生硬壳 妨碍水分的扩散 尤其是对于富含糖分和淀粉的样品 6 烘干后样品重新吸水 减减压压干燥法干燥法 一 原理 一 原理 利用水的沸点随压强降低的原理 将样品称量后放入真空干燥箱内 在 选定的真空度与加热温度下干燥至恒重 干燥后样品所失去的质量百分比即为 水分含量 二 适用范二 适用范围围 一般用于 100 以上容易变质 被破坏或不易除去结合水的样品 如糖浆 味精 砂糖 糖果 蜂蜜 果酱和脱水蔬菜等样品都可采用真空干燥法测 定水分 蒸蒸馏馏法法 一 原理 一 原理 两种互不相溶的液体 二元体系的沸点低于其中各组份分沸点 将食品 中的水分与有机溶剂 甲苯 苯 二甲苯等 共沸蒸出 冷凝并收集馏出液 二 特点和使用范二 特点和使用范围围 此法为一种高效的换热方法 加热温度比直接干燥法低 水分可以被迅速 的移去 在密闭的容器中进行的 设备简单 操作方便 广泛用于各类果蔬 油类等多种样品的水分的测定 特特别别是是香料香料 此法是 此法是 唯一公唯一公认认的水分含量的的水分含量的标标准分析方法 准分析方法 这种方法用于含水量低 不易干烘的样品 以及含有易挥发性物质例如醚类 芳香油 挥发酸 CO2 等的样品 目前 AOAC 规定蒸馏法用于饲料 啤酒花 调 味品的水分测定 特别是香料 蒸馏法是唯一的 公认的水分检验分析方法 三 操作 三 操作 a 要预先以水饱和后 除去水 蒸馏 收集馏出液备用 b 要先接好冷水 且先打开冷凝水进行冷凝 c 准确称量适量的样品 估计含水量 2 5mL 加入蒸馏瓶中 然后加入苯 50 75mL 从冷凝管顶加入苯至刻度装满 d 加热慢慢蒸馏 速度为 2 滴 秒馏出液 至水分大部分蒸出后 再加快蒸馏速度 直至接收器刻度的水分不再增加为止 关闭热源 e 从冷凝管顶端注入少量甲苯洗净蒸馏器和冷凝管壁上吸附的水分 读取刻度管 中水层容量 四 四 计计算 算 水分 V W 100 V 接收管内水的体积 W 样品质量 五 五 优优缺点 缺点 缺点 水与有机溶剂易发生乳化现象 可加少量戊醇或异丁醇破乳剂 防止出 现乳浊液 样品中水分可能没有完全挥发出来 充分蒸馏 水分有时附在冷凝管壁上 造成读数误差 用溶液充分冲洗 4 水分在溶液中部分溶解 水在甲苯溶解度 0 05 5 溶液中水溶性低沸点组分会随水 起被蒸馏出来 使结果偏高 6 计算时以水的毫升数代替水的质量是不科学的 应该由体积换算成质量 m 水 V 优点 热交换充分 受热后发生化学反应比干燥法少 设备简单 管理方便 卡卡尔尔 费费休法休法 一 原理 一 原理 二 范二 范围围 费休法广泛地应用于各种液体 固体 及一些气体样品中水分含量的测 定 常作为水分痕量级标准分析方法 可用于此法校定其他的测定方法 在食品分析中 能用于含水量从 lppm 到接近 l00 的样品的测定 结果的准 确度优于直接干燥法 也是测定脂肪和油品中痕量水分的理想方法 卡尔费休法不仅可测得样品中的自由水 而且可测出结合水 即此法测得结果 更客观地反映出样品中总水分含量 样品中有强还原性物料 包括维生素 C 的样品不能测定 适用范围 应用于面粉 砂糖 人造奶油 可可粉 糖蜜 茶叶 乳粉 炼乳及香料 等食品中的水分测定 水分活度定水分活度定义义 溶液中水的逸度与纯水的逸度之比值 可近似表示为溶液中水蒸 气分压与纯水蒸汽压之比 第五章第五章 灰分的灰分的测测定定 灰分的概念 灰分的概念 在高温 500 600 灼烧时 食品发生一系列物理和化学变化 最后 有机成分挥发逸散 而无机成分 主要是无机盐和氧化物 则残留下来 这些残留 物称为灰分 它标示食品中无机成分总量的一项指标 采用灰化采用灰化过过程中 程中 样样品会品会发发生物理化学生物理化学变变化化 1 样品中的水分及低沸点易挥发物如低级胺 酸 脂 醚 醇和萜类物质先蒸发 掉 2 样品中的有机物在高温下与空气中的氧气作用 被彻底氧化成二氧化碳 二氧 化氮 一氧化氮和水等挥发了 3 有机酸的金属盐变为碳酸盐和其他氧化物 4 有些无机物变为磷酸盐 硫酸盐和卤化物 5 有些金属如铅 汞 硒会直接挥发掉 灰分主要由 K Ca Na Mg Al Fe S P Si 及其它微量元素的氧化物或盐等 灰分不完全或不确切地代表无机物的总量 如某些金属氧化物会吸收有机物分 解产生的 CO2 而形成碳酸盐 使无机成分增多了 有的又挥发了 如 Cl I Pb 为 易挥发元素 P S 等也能以含氧酸的形式挥发散失 从这个观点出发通常把食 品经高温灼烧后的残留物称为 粗灰分 总灰分 加速灰化的方法加速灰化的方法 有些样品难于灰化 如含磷较多的谷物及其制品 磷酸过剩于阳离子 灰化过 程中易形成 KH2PO4 NaH2PO4 等 会熔融而包住 C 粒 即使灰化相当长时间也 达不到恒重 对这类样品 可采用下述方法加速灰化 样品初步灼烧后 取出 冷却 从灰化容器边缘慢慢加入少量无离子水 使 残灰充分湿润 不可直接洒在残灰上 以防残灰飞扬损失 用玻璃棒研碎 使水 溶性盐类溶解 被包住的 C 粒暴露出来 把玻璃棒上粘的东西用水冲进容器里 在水浴上蒸发至干涸 至 120 130 烘箱内干燥 再灼烧至恒重 经初步灼烧后 放冷 加入几滴 HNO3 H2O2 等 蒸干后再灼烧至恒重 利用 它们的氧化作用来加速 C 粒灰化 也可加入 10 NH4 2CO3 等疏松剂 在灼烧 时分解为气体逸出 使灰分呈松散状态 促进灰化 这些物质的添加不会增加残灰的质量 灼烧后完全消失 糖类样品残灰中加入硫酸 可以进一步加速 加入 MgAc2 Mg NO3 2 等助灰化剂 这类镁盐随灰化而分解 与过剩的磷酸 结合 残灰不熔融而呈松散状态 避免了碳粒被包裹 可缩短灰化时间 但产生 了 MgO 会增重 也应做空白空白试验试验 添加 MgO CaCO3 等惰性不熔物质 它们的作用纯属机械性 它们和灰分混 杂在一起 使 C 粒不受覆盖 应应做空白做空白试验试验 因为它们使残灰增重 用 FeCl3 蓝蓝墨水的混合物墨水的混合物或铅铅笔笔在坩埚外壁及盖子上编号 总总灰分灰分测测定的方法 定的方法 瓷坩瓷坩埚埚的准的准备备 根据取样量的大小 样品的性质 如易膨胀等 来选取坩埚的大小 有时样品太 多 宜选素瓷蒸发皿 使用的容器大会使称量的误差增大 有的蒸发皿在光电天 平中放不下 将两个坩埚用 1 4 的 HCl 煮沸 1 2 小时 洗净凉干 用 FeCl3 蓝墨水的混合物或铅笔在坩埚外壁及盖子上编号 打开马福炉 用坩埚钳夹住 先放在炉口预热 因炉内各部位的温度不一 致 假如设定 600 炉内热电偶附近为 600 10 中间部位为 590 10 前面部分为 560 10 不论炉子大小 门口部分温度最低 真正灼烧时往里面放 把盖子搭在旁边 不能放在靠近门口部分 每次开 始放入炉内或取出时 都要放在门口缓冲一下温差 不然就会破裂 稍停一下在关炉门 于规定温度 500 600 灼烧半小时 再移至炉口冷却到 200 左右 再移入干燥器中 冷却至室温 准确称量 再入高温炉中烧 30 分钟 取出冷却称重 直至恒重 两次称重之差不大 于 0 5 mg 记录数据备用 高温炉 高温炉 马马福炉 蒙弗炉 的准福炉 蒙弗炉 的准备备 样样品的品的预处预处理理 可用测定水分之后的样品 富含脂肪的样品先提取脂肪后再测灰分 对于液体样品应先在水浴上蒸干 否则直接炭化 液体沸腾易造成溅失 果蔬 动物组织等含水分较多的样品 先制备成均匀样品 再准确称取样品 置于已知重量坩埚中 放烘箱中干燥 先 60 70 后 105 再炭化和灰化 谷物 豆类等水分含量较少的固体样 粉碎均匀后可直接称取 炭化 炭化炭化样样品 品 原因原因 在高温炉之前 要先进行炭化处理 以防温度高 试样中的水分急剧蒸发使样品 飞扬 防止易发泡膨胀的物质在高温下发泡而溢出 减少碳粒被包裹住的可能性 炭化操作一般在电炉或煤气灯下进行 半盖坩埚盖 小心加热使样品在通气情况 下逐渐炭化 直至无黑烟产生 对易膨胀 发泡的如含糖多的 含蛋白多的样品 可在样品上加数滴辛醇或纯 植物油 再进行炭化 5 灰化灰化 炭化后 把坩埚移入已达规定温度的高温炉口 稍停片刻 再慢慢移入炉膛内 以下操作同求坩埚恒重时一样 至恒重 6 结结果果计计算算 100 灰分灰分 31 21 mm mm 100 如有空白试验为如有空白试验为 31 21 mmB mm m 1 空坩空坩埚质埚质量 量 g m 2 样样品品 空坩空坩埚质埚质量 量 g m 3 残灰残灰 空坩空坩埚质埚质量 量 g B 空白空白试验试验残灰重 残灰重 g 马福炉的准备 瓷坩埚的准备 称样品 炭化样品 灰化 1 小时 取出 入干燥器冷却 30 分钟 恒重 不恒重继续灰化 1 小时 结果计算 第六章第六章 氨基酸氨基酸总总量的量的测测定定 甲甲醛醛滴定法滴定法 1 原理 因为氨基酸含有 COOH 基 而 COOH 基显示酸性 又含有 NH2 NH2 则显示碱 性 由于 COOH 基和 NH2 的相互作用 使氨基酸成为中性的内盐 氨基酸具有酸和碱两重性质 加入甲醛溶液时 NH2与甲醛结合 其碱性消失 破坏内盐的存在 相对增加了 COOH的酸性解离 就可用碱来滴定 COOH基 茚茚三三酮酮的比色法的比色法 原理 氨基酸在一定碱性条件下与茚三酮起反应 生成蓝紫色化合物 可比色定 量 而羟羟脯氨酸脯氨酸和脯氨酸脯氨酸因其 氨基被取代并不放出 NH3 而生成黄色化合物 440nm 有最大吸收 Rf 值值为迁移率 rate of flow 在恒定条件下 每种氨基酸有其一定的 Rf 值 Rf 原点到层析点之间的距离 原点到溶剂前沿的距离 边缘边缘效效应应 在用多元系统进行展层时 其中极性较弱的和沸点较低的溶剂 例如氯仿 甲醇系 统中的氯仿 在薄层板的两边易挥发 它们在薄层两边的浓度比在中部的浓度小 在薄层的中部含有更多的极性较大或沸点较高的溶剂 于是位于薄层两边的 Rf 值要比中间的高 即所谓 边缘效应 为减轻或消除边缘效应 可在层析缸的内壁贴上浸湿了展开剂的滤纸 使层析缸 内溶剂蒸汽的饱和程度增加 氨基酸的性氨基酸的性质质与与 Rf 之之间间的关系的关系 层析的分离是基于氨基酸的非极性性质 物质的极性越小 即非极性越大 在有机溶剂中分配就越多 迁移率 Rf 就 越大 非极性氨基酸在有机溶剂中展层的速度快于极性氨基酸 阳离子交阳离子交换树换树脂 脂 阳树脂活性基团可用 SO3H COOH 或苯酚基 C6H4OH 等离 子交换树脂 阴离子交阴离子交换树换树脂 脂 含有季胺基 N CH3 3OH 胺基 NH2 或亚胺基 NR H 等碱 性基团 酸性氨基酸带的正电荷少 等电点比较低 碱性氨基酸带的正电荷多 被置换下 来的pH比较高高 洗脱洗脱顺顺序序 酸性氨基酸 中性氨基酸 芳香族氨基酸 碱性氨基酸 日立 832 型氨基酸分析仪的洗脱顺序 天门冬 苏 丝 谷 脯 甘 丙 半胱 缬 蛋 异亮 亮 酪 苯丙 赖 氨 组 精 丹磺丹磺酰氯酰氯法法 在碱性条件下 丹磺酰氯可以与 N 端氨基酸的游离氨基作用 得到 丹磺酰 氨基酸 再用反相液相色谱可以分离 此法的优点是丹磺酰 氨基酸有很 强的荧光性质 检测灵敏度可以达到 1 10 9mol 激发波长 298nm 发射波长 546nm 第六章第六章 蛋白蛋白质质含量的含量的测测定定 凯氏定氮法 双缩脲反应 福林 酚试剂法 染料结合反应 紫外测定 酸碱滴定法 凯凯氏定氮法氏定氮法 1 原理 原理 整个过程分三步 消化 蒸馏和吸收 滴定 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化 使蛋白质分解 其中碳和氢被氧化为 二氧化碳和水逸出 而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵 然后加碱 蒸馏 使氨蒸出 用 H3BO3 吸收后 再以标准 HCl 溶液滴定 根据标准酸消耗量可以计算出 蛋白质的含量 2 步 步骤骤 1 样品消化 称取适量样品 0 1 2g 固体 移入干燥的消化管中 加入 0 2g 硫酸铜 3g 硫酸 钾及 20mL 硫酸 轻轻摇匀后进行消化 先小火消化 待消化液呈蓝绿色澄清透明后 再继续大火加热 0 5h 至溶液呈透 明淡黄绿色为止 停火冷却后 将消化液用水定容至 100 mL 空白对照 取与处理样品相同量的硫酸铜 硫酸钾 硫酸按同一方法作试剂空白 试验 2 碱化蒸馏 向接收瓶内加入 10mL2 硼酸及 2 滴混合指示剂并使冷凝管下端插入液面下 吸取 10 0mL 样品消化稀释液注入凯氏定氮仪的反应室中 用 10mL 蒸馏水冲洗 进样入口 再加 10mL50 氢氧化钠溶液 通入蒸汽开始蒸馏 并通过冷凝管而进 入接收瓶内 以第一滴馏液滴下开始计时 蒸馏 5min 取下接收瓶 停止蒸馏 3 滴定 用微量酸式滴定管 以 0 05mol L 盐酸标准溶液进行滴定 溶液由蓝绿色变为灰 红色为终点 4 空白试验 同时取 10 0mL 空白消化稀释液同上操作 5 计算 总氮量 N V2 V1 0 014 W 100 0 014 氮的毫克当量数 蛋白质 总氮 K K 换换称等数 称等数 3 注意事 注意事项项 1 所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制 2 消化时不要用强火 应保持和缓沸腾 勿使炭化物质上升到消化管上部 待消 化液均匀沸腾后 再加大火力 3 消化时应注意不时转动凯氏烧瓶 以便利用冷凝酸液将附在瓶壁上的固体残 渣洗下 并促进其消化完全 4 如硫酸缺少 过多的硫酸钾会引起氨的损失 而硫酸不与氨作用 因此当硫酸 过多被底物消耗掉或样品中脂肪含量过高时 要添加硫酸量 5 样品中若含脂肪较多时 消化过程中易产生大量泡沫 为防止泡沫溢出瓶外 在开始消化时应用小火加热 并时时摇动 或者加入少量辛醇或液体石蜡或硅油 消泡剂 并同时注意控制热源强度 6 般消化至呈透明后 继续消化 30min 即可 但对于含有特别难以氨化的氮 化合物的样品 如含赖氨酸 组氨酸 色氨酸 酪氨酸或脯氨酸等时 需适当延长 消化时间 有机物如分解完全 消化液呈蓝色或浅绿色 但含铁量多时 呈较深 绿色 各种各种试剂试剂的作用 的作用 加硫酸硫酸钾钾 作为增温剂 提高溶液沸点提高溶液沸点 加硫酸硫酸铜铜 作为催化催化剂剂 氧化汞 汞 均有毒 价格贵 硒粉 二氧化钛 加氧化氧化剂剂 如双氧水 次氯酸钾等加速有机物氧化速度加速有机物氧化速度 论论述述题题 测测定含有三聚定含有三聚氰氰胺的牛乳中蛋白胺的牛乳中蛋白质质的含量 的含量 基本思路 样品 加入三氯乙酸除去蛋白质 测样品和上清中蛋白质含量 差值 双双缩脲缩脲法法 原理 原理 脲 尿素 NH2 CO NH2 加热至 150 160 时 两分子缩和成双缩脲 双缩 脲能和硫酸铜的碱性溶液生成紫色络和物 这种反应叫双缩脲反应 缩二脲反应 蛋白质分子中含有肽键 CO NH 与双缩脲结构相似 碱性条件下 蛋白 质与铜作用生成蛋白质 铜络合物 溶液紫红色的深浅与蛋白质含量在一定范围 内符合朗伯一比尔定律 而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关 可用分光光度 计来测其吸光度 确定含量 560nm 方法特点及方法特点及应应用范用范围围 双缩脲法对白 红蛋白产生的颜色反应相近 不受温度影响 可快速测定 蛋白质含量 但灵敏度低 测定范围为 1 20mg 蛋白质 适用于精度要求 不高的蛋白质含量测定 常用于谷物蛋白质含量测定 三羟甲基氨基甲烷 一些氨基酸和 EDTA 等对本反应有干扰 Folin 酚法酚法测测定蛋白定蛋白质质含量含量 1 原理 原理 Folin 酚试剂法包括两步反应 第一步是在碱性条件下 蛋白质与铜作用生成蛋白质 铜络合物 第二步是此络合物将磷钼酸 磷钨酸试剂 Folin 酚试剂 还原 产生深蓝色 磷钼蓝和磷钨蓝混合物 颜色深浅与蛋白质含量成正比 因为 Folin 酚试剂在碱性溶液中极不稳定 易被酚类化合物氨基酸 酪氨酸酪氨酸 色氨色氨 酸酸 半胱氨酸半胱氨酸 还原为蓝色化合物 钼兰和钨兰混合物 在 750nm 有最大吸收 2 适用范 适用范围围 Folin 试剂显色反应由酪氨酸 色氨酸和半胱氨酸引起 不同蛋白质含量不同而 使显色强度稍有不同 本法也可用于游离酪氨酸和色氨酸含量测定 紫外吸收法紫外吸收法 1 原理 原理 构成蛋白质的 20 种氨基酸在可见光区都没有光吸收 但在远紫外区 220nm 均 有光吸收 在近紫外区 220 300nm 只有酪氨酸酪氨酸 苯丙氨酸苯丙氨酸和色氨酸色氨酸有吸收光的能 力 最大吸收峰在 280nm 波长处 在此波长范围内 在蛋白质浓度 3 8mg mL OD280nm 光密度与其浓度呈正比关系 可作定量测定 2 应应用 用 紫外吸收法测蛋白质含量迅速 简便 不消耗样品 低浓度盐类不干扰测定 因 此 已在蛋白质和酶的生化制备中广泛采用 尤其在柱层析分离纯化中 常用 280nm 进行紫外检测 来判断蛋白质吸附或洗脱情况 考考马马斯亮斯亮蓝蓝 G 250 法法 1 原理原理 考马斯亮蓝 G 250 Coomassie brilliant blue G 250 测定蛋白质含量属于染料 结合法的一种 考马斯亮蓝 G 250 在游离状态下呈红色 最大吸光吸收在 488 nm 当它与蛋 白质结合后变为青色 蛋白质 色素结合物在 595nm 波长下有最大光吸收 蛋白 质与考马斯亮蓝 G 250 结合在 2min 左右的时间内达到平衡 完成反应十分迅速 其结合物在室温下 1h 内保持稳定 595nm 光吸收值与蛋白质含量成正比 因此可用于蛋白质的定量测定 2 特点 特点 该法是 1976 年 Bradford 建立 试剂配制简单 操作简便快捷 考马斯亮蓝 G 250 法是目前灵敏度最高的蛋白质测定方法 最低蛋白质 检测量可达 1ug 比 Folin 一酚法约高 4 倍 测定蛋白质浓度范围为 0 1000 g mL 是一种常用的微量蛋白质快速测定方法 第八章第八章 脂脂质质的的测测定定 脂类总量测定 抽提法 酸水解法 比重法 折射法 电测和核磁共振法 抽提法的原理 抽提法的原理 抽提法的原理 脂类的共同特点是在水中的溶解度非常小 能溶于脂肪溶剂中 再根据 相似相溶的规律具体选择 不同来源的食品所含的脂肪在结构上有许多差异 所以也没有一种通用 的提取剂 脂类的结构比较复杂 到现在没有一种溶剂能将纯脂肪萃取出来 也就 是说提取出来的都是粗脂肪 不同有机溶不同有机溶剂剂的特点 的特点 1 乙 乙醚醚 优优点点 1 乙醚的沸点低为 34 6 2 溶剂脂肪能力强大于石油醚 缺点缺点 1 能被 2 的水饱和 含水的乙醚抽提能力降低 氧与水能形成氢键使穿透组 织能力降低 即抽提能力下降 2 含水的乙醚使非脂成分溶解 使结果偏高 糖蛋白质等 3 乙醚易燃 乙醚在空气中最大允许浓度为 400 ppm 超过这个极限易爆炸 2 石油 石油醚醚 优优点 点 1 石油醚的沸点比乙醚高 40 80 不太易燃 2 吸收水分比乙醚少 允许样品含微量的水分 3 它没有胶溶现象 不会夹带胶溶淀粉 蛋白质等物质 采用石油醚提取剂 测定值比较接近真实值 缺点 缺点 石油醚溶解脂肪的能力比乙醚弱些 3 氯氯仿仿 甲醇甲醇 优优点 点 一种有效的溶剂 获得的脂质提取物纯净 不仅能提取游离脂 对脂蛋白 磷脂 提取效率较高 特别适用于水产品 家禽 蛋制品中脂肪的提取 加标回收率为 93 8 98 3 因该法准确可靠 1983 年 AOAC 将氯仿 甲醇法确定为测定食品中脂肪的正式 方法 缺点 缺点 1 氯仿是一种可疑的致癌物 甲醇能损害视神经 2 操作过程繁琐费时 3 溶剂消耗量大 索氏提取法 索克斯列特抽提法 索氏提取法 索克斯列特抽提法 一 原理一 原理 将经前处理的 分散且干燥的样品用乙醚或石油醚等溶剂回流提取 使样品 中的脂肪进入溶剂中 回收溶剂后所得到的残留物 即为粗脂肪 粗脂肪 残留物中除游离脂肪 游离脂肪酸 甾醇 磷脂等 还含有树脂 蜡状 物 挥发油 类脂色素物质等 二 使用条件 二 使用条件 适用于脂类含量较高 结合态脂类含量少或经水解处理过的 样品应能烘 干 磨细 不易吸湿结块 此法经典 对大多数样品的测定结果比较可靠 但费时长 8 16 h 需要 专门的仪器 索氏提取器 三 步三 步骤骤 1 滤纸筒的制备 2 样品处理 a 固体样品 精密称取干燥并研细的样品 2 5g 必要时拌以海砂 无损地移 入滤纸筒内 b 半固体或液体样品 称取 5 0 10 0g 于蒸发皿中 于沸水浴上蒸干后 再于 95 105 烘干 研细 全部移入滤纸筒内 蒸发皿及粘附有样品的玻璃棒都用沾 有乙醚的脱脂棉擦净 将棉花一同放进滤纸筒内 3 抽提 将滤纸筒或滤纸包放入索氏抽提器内 连接已干燥至恒重的脂肪接受瓶 无水 乙醚或石油醚加入接受瓶的 2 3 体积 于水浴上 约 45 左右 加热使乙醚或石油 醚不断的回流提取 使冷凝下滴的乙醚成连珠状 120 150 滴 min 或回流 7 次 h 以上 抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹 至抽提完全为止 用滤纸 试 抽提完毕后 用长镊子取出滤纸包 在通风处使乙醚挥发 抽提室温以 12 25 为宜 4 称重 取下接受瓶 回收乙醚或石油醚 待接受瓶内乙醚剩 1 2mL 在水浴上蒸于 再于 100 105 干燥 2h 取出放干燥器内冷却 30min 称重 并重复操作至恒重 四 四 结结果果计计算算 脂肪 m2 m1 m 100 m2 接受瓶和脂肪的质量 g ml 接受瓶的质量 g m 样品的质量 g 五 五 注意及注意及说说明明 1 测定用样品 抽提器 抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理 这是因为 第一 抽提体系中有水 会使样品中的水溶性物质溶出 导致测定结果偏高 第二 抽提体系中有水 则抽提溶剂易被水饱和 从而影响抽提效率 第三 样品中有水 抽提溶剂不易渗入细胞组织内部 结果不易将脂肪抽提干净 2 试样粗细度要适宜 试样粉末过粗 脂肪不易抽提干净 试样粉末过细 则有 可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失 影响测定结果 3 装样品的滤纸筒一定要严密 不能往外漏样品 也但不要包得太紧 影响溶剂 渗透 放入滤纸筒时高度不要超过回流弯管 否则超过弯管的样品中的脂肪不能提 尽 造成误差 4 对糖多及糊精的样品 要先以冷水使糖及糊精溶解 经过滤除去 将残渣连同 滤纸一起烘干 再一起放入抽提管中 5 在挥发乙醚或石油醚时 切忌用直接火加热 应该用电热套 电水浴等 烘前 应驱除全部残余的乙醚 因乙醚稍有残留 放入烘箱时 有发生爆炸的危险 7 在抽提时 冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管 可防止空气中水分进入 也可避免乙醚挥发在空气中 如无此装置可塞一团干燥的脱脂棉球 8 抽提是否完全 可凭经验 也可用滤纸或毛玻璃检查 由抽提管下口滴下的乙 醚滴在滤纸或毛玻璃上 挥发后不留下油迹表明已抽提完全 9 反复加热会因脂类氧化而增重 重量增加时 以增重前的重量作为恒重 氯氯仿仿 甲醇法甲醇法 一 特点 一 特点 氯仿 甲醇法提取效率高 获得的脂质提取物纯净 不仅能提取游离脂 对结合脂 的提取也十分有效 二 适用范适用范围围 适用于含结合态脂类 特别是含磷脂多的样品 因而受到了人们的公认并获得了 广泛应用 不仅用于生物样品 也同于食品中脂质的测定 酸水解法酸水解法 一 原理一 原理 将试样与盐酸溶液一同加热进行水解 使结合酯或包藏在组织里的脂肪游 离出来 再用乙醚和石油醚提取脂肪 回收溶剂 干燥后称量 提取物的重量即 为脂肪含量 二 二 适用范适用范围围与特点与特点 适用 各类 各种状态的食品中脂肪测定 特别是加工后的混合食品 易吸湿 不 好烘干的 用索氏提取法不行的样品 效果更好 不适用 不适于测定含磷脂高的食品 如 鱼 贝 蛋品等 因为在盐酸加热时 磷脂几 乎完全分解为脂肪酸和碱 使测定值偏低 不适于测定含糖高的食品 因糖类遇强酸易炭化而影响测定 乳脂肪乳脂肪测测定的方法 定的方法 罗兹罗兹 哥特里法哥特里法 碱性乙醚提取法 重量法测定乳脂肪 巴布科克法巴布科克法和盖勃法盖勃法 罗兹罗兹 哥特里哥特里 Rose Gottlieb 法法 一 原理一 原理 牛乳是乳浊液 呈白色 乳脂肪球分散在水中的乳浊液 酪蛋白颗粒分散在 水中的悬浊液 分子离子态的物质溶解在水中的水溶液 三者巧妙共存的 复合体 每个酪蛋白颗粒 分别是由数千乃至数万个不同类型的酪蛋白分 子与乳液中胶态的磷酸钙和构椽酸等 结合在一起形成的大小不等的分 子团集合体 这就是酪蛋白胶体颗粒 由于颗粒表面和脂肪球表面 疏水 基 的相互作用布朗运动 才使乳液保持着一种既不沉淀也不凝结的稳 定状态 利用氨 乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜 使非脂成分溶解于氨 乙 醇溶液中 而脂肪游离出来 再用乙醚 石油醚提取出脂肪 蒸馏去除溶 剂后 残留物即为乳脂肪 乳类脂肪虽然也属游离脂肪 但是因脂肪被乳中酪蛋白钙盐包裹 又处于 高度分散系中 故不能直接被乙醚和石油醚提取 需预先用氨水处理 故 称为碱性乙醚提取法 二 二 测测定方法定方法 取一定量样品 牛奶 10mL 乳粉 1 0g 用 10mL 水分数次溶解 于抽脂瓶中 1 25mL 加入氨水 充分混合 置于 60 水浴加热 5min 再振摇 2min 加入 10mL 乙醇 充分摇匀 用冷水浴冷却 加入 25mL 乙醚 振摇半分 钟 加入 25mL 石油醚 振摇半分钟 静置 30min 待上层液澄清时 读取醚层 体积 放出一定体积醚层烧瓶中 蒸馏回收乙醚和石油醚 烘干至恒重 称 重 脂肪重量为 G 三 三 计计算算 V 量取的醚层体积 G V 醚溶液中称取的脂肪重量 1 028g mL 牛乳的密度 巴布科克法和盖勃法 巴布科克法和盖勃法 测测定乳脂肪 定乳脂肪 原理原理 牛奶中加入浓 H2SO4 时 乳中的乳糖和蛋白质等非脂成分溶解 将牛奶 中的酪蛋白钙盐转变成可溶性的重硫酸酪蛋白 使脂肪球膜被软化破坏 脂肪游离出来 再利用加热离心 使脂肪完全迅速分离 直接读取脂肪层的数值 便可知 被测乳的含脂率 这是公认的标准分析法 盖勃法盖勃法 盖勃氏法原理盖勃氏法原理 在牛乳中加硫酸 可破坏牛乳的胶质性 使脂肪更容易浮出液面 在操作 中还需要加入异戊醇 降低脂肪球的表面张力 促进脂肪球的离析 但是异戊醇的溶解度很小 不能加的太多 如果加的太多 异戊醇会进入 脂肪中 使脂肪体积增大 而且会有一部分异戊醇和硫酸作用生成硫酸脂 第八章第八章 糖糖类类物物质质的的测测定定 实验实验室常用的澄清室常用的澄清剂剂 1 中性醋酸铅 适用于植物性的萃取液 它可除去蛋白质 丹宁 有机酸 果胶 缺点 脱色力差 不能用于深色糖液的澄清 否则加活性炭处理 2 碱性醋酸铅 适用深色的蔗糖溶液 可除色素 有机酸 蛋白质 缺点 沉淀颗粒大 可带走果糖 3 醋酸锌 30 亚铁氰化钾 15 亚铁氰酸锌 用于富含蛋白质的提取液 常用于沉淀蛋白质 对乳制品最理想 是动物 性样品的沉淀剂 4 活性炭 对色素的吸附力强 但可吸附 6 8 的蔗糖 但对还原糖影响不大 可 测西瓜西瓜的糖含量 5 Al OH 3 Cu OH 2 可用于浅色溶液的澄清 但是效果不是很理想 用于牛 乳等样品 深色深色饮饮料中料中总总糖的糖的测测定定 先水解 将蔗糖转化为果糖和葡萄糖 再加入活性炭 吸附 费费林氏林氏试剂试剂滴定滴定 一 一 原理 原理 还原糖是指含有自由醛基 如葡萄糖 或酮基 如果糖 的单糖和某些二糖 如 乳糖和麦芽糖 在碱性溶液中 还原糖能将 Cu2 Hg2 Fe3 Ag 等金属离子 还原