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1 紫外分光光度法测定苯甲酸含量 实验四 仪器分析实验 2 实验目的 1 了解756CRT型紫外可见分光光度计的结构 2 了解紫外分光光度法定性的原理和方法 3 掌握利用756CRT型紫外可见分光光度计测定苯甲酸含量的原理方和法 3 实验原理 紫外分光光度法 UltravioletSpectrophtometry 主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁 是研究物质电子光谱的分析方法 通过吸收曲线对求知样品进行定性分析 根据朗伯 比耳定律 A bc 只要绘出标准曲线 测出试液的吸光度 就可以得到未知样的含量 4 仪器与试剂 1 756CRT型紫外可见分光光度计 上海精仪公司 2 容量瓶 25mL 3 吸量管 5mL 4 苯甲酸 AR 储备液 0 05000g L 1 5 紫外分光光度计的使用 1 开机 2 吸收池配套性检查3 吸收曲线绘制4 工作曲线的绘制5 样品测定 6 实验步骤 1 开机 打开计算机 进入window98操作系统后 打开仪器开关 点击桌面上的 756CRT 操作软件 联机 后 系统直接进入初始化窗口 如已初始化过 系统提示 是否初始化 可选择 否 则系统进行系统设置后进入工作窗口 也可选择 是 则系统进入初始化窗口 待仪器初始化结束 进入操作主页面 然后仪器预热20分钟后开始进行测定工作 7 2 吸收池配套性检查石英吸收池在220nm装蒸馏水 以一个吸收池为参比 调节T为100 测定另一吸收池的透射比 其偏差应小于0 5 可配成一套使用 记录第二比色皿的吸光度值作为校正值 8 3 吸收曲线绘制 1 确定波长扫描参数 狭缝宽度 2nm 扫描速度 较快 采样间隔 1nm 测量方式 吸光度 绘图方式 重叠 重复次数 1波长范围 200 350nm 纵坐标 从0 1存储文件 选择路径和文件名 如E 学生实验 9 2 基线校正用蒸馏水作参比进行基线校正 点击 基线校准 开始进行基线校准 3 波长扫描将盛有苯甲酸标准溶液的比色皿分别放入样品光路 点击 开始扫描 得到苯甲酸溶液的吸收曲线 找到最大吸收波长 10 4 工作曲线的绘制 1 标准系列的配制于5支25mL容量瓶中 用5mL吸量管分别加入2 0 3 0 4 0 5 0 6 0mL的0 05000gL 1苯甲酸储备液用蒸馏水定容至刻度 摇匀 11 2 工作曲线的绘制 进入定量分析界面 按顺序进行标样设定 以所确定的苯甲酸最大吸收波长为测定波长 以蒸馏水为参比 分别测定这五个标准溶液吸光度值 绘制标准曲线 记下工作曲线方程和相关系数 12 5 样品测定 用2mL吸量管吸取未知液2mL于25mL容量瓶中 用蒸馏水将其稀释定容 摇匀 将此溶液放在光路上 在仪器上直接进行样品测定 记下其浓度值 13 结果记录和数据处理 1 工作曲线的绘制 14 问题讨论 1 紫外可见分光光度法
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