开题报告--振荡法提取玉米皮中黄酮

河北联合大学轻工学院河北联合大学轻工学院 本科毕业论文开题报告本科毕业论文开题报告 题题 目 目 振荡法提取玉米皮中黄酮的 工艺研究 学学 部 部 材料化工部材料化工部 专专 业 业 生物技术生物技术 班班 级 级 0808 生物生物 班班 姓姓 名 名 学学 号 号 指导教师 指导教师 2012 年年 3 3 月月 4 4 日日 一 题目来源背景一 题目来源背景 一 一 毕业论文课题来源毕业论文课题来源 该毕业论文题目来源于教师科研 二 二 现状现状 在自然界中黄酮类化合物广泛分布于植物中 属于植物次级代谢产物 在植物 的叶子和果实中少部分以游离形式存在 大部分与糖合成苷类 近年来随着分离提 取技术的发展 发现了大量新黄酮类化合物 也掀起了对它们的研究热潮 开发了 数种含有黄酮类物质的产品 研究发现黄酮具有抗氧化 抗过敏 抗菌消炎 降血 糖 抗病毒 抗肿瘤 增强心血管功能和护胃保肝 保护神经系统 改善记忆力等 功效 黄酮还常应用于功能食品作为添加剂 目前很多桔梗等都没有被利用而废弃 掉 这些废弃物中含有丰富的可利用物质 三 三 前景 前景 现已发现约4 000余种黄酮类化合物 主要存在于植物的叶 果 实 根 皮中 实验证明其具有广泛的生理和药理活性 包括抗病毒 抗癌 抗氧 化 抗炎 抗衰老等 因此对该化合物的研究已成为国内外医药界研究的热门话 题 是一类具有广泛开发前景的天然药物 在医药 食品等领域均具有巨大的应用 前景 二 主要研究内容 应用价值 改进及创新二 主要研究内容 应用价值 改进及创新 一 一 研究内容 研究内容 以玉米皮为原料 采用振荡法 研究乙醇浓度 温度 固液比 粒度 提取时 间 提取次数 浸泡时间对黄酮提取率的影响 在单因素试验研究的基础上 采用 响应面分析优化玉米芯黄酮的提取工艺 二 二 应用价值 应用价值 由于黄酮类化合物具有降压 降血脂 抗骨质舒松 抗心 律失常等多种药理和保健作用 特别是具有抗自由基及抗癌 防癌的作用 使其在医 药 食品领域的应用具有广阔的前景 由于黄酮类化合物可能存在几种不同的作用 机制与合成途径 研究者们对其实验结果的解释可能仍然存在不足之处 因此还需 要考虑其黄酮的稳定性以及加工和贮藏过程中黄酮与其它成分的相互作用 今后黄 酮类化合物的研究还需要关注的是生物利用度 代谢动力学 体内的氧化损伤以及 长期服用产生的慢性后果等方面 开发出可靠的 令人信服的模型或系统以精确评 估黄酮类化合物在人体内的代谢作用也是十分必要的 因此对该化合物的研究已成 为国内外医药界研究的热门话题 是一类具有广泛开发前景的天然药物 在医药 食品等领域均有巨大的应用前景 三 三 改进及创新改进及创新 目前基本上很少有人选用玉米皮作材料来提取黄酮类物质 并且采用振荡法利 用响应面分析优化玉米皮中黄酮的最佳提取工艺条件 三 拟采用的研究方法 手段及实验准备情况三 拟采用的研究方法 手段及实验准备情况 一 实验准备情况 实验准备情况 以玉米皮为原料 仪器和试剂仪器和试剂 主要仪器主要仪器 恒温水浴锅 电子分析天平 721 可见分光光度计 SHB 一三循环水 式真空泵 高速万能粉碎机 TI IZ C 恒温振荡器 分析筛 量筒 100ml 10ml 25ml 比色管 移液管 试管 50ml 容量瓶 锥形瓶 主要试剂主要试剂 玉米皮 芦丁 无水乙醇 氢氧化钠 亚硝酸钠 以上均为国产分析 纯 实验所用水均为蒸馏水 二 研究方法 手段研究方法 手段 1 玉米皮黄酮提取工艺流程 选取玉米皮 水洗 低温烘干 粉碎过筛 玉米皮粉末 浸泡 振荡提取 过滤 测定黄酮含量 2 芦丁标准液的配制及标准曲线的绘制 准确称取105 烘干至恒重的芦丁标准品0 0250g于100mL容量瓶中 用80 乙 醇溶解 定容 冷藏放置于冰箱中 准确吸取 0 0 2 0 4 0 6 0 8 0 10 0 12 0 14 0 16 0mL于50mL容量瓶中 加5 亚硝酸 钠1 5mL 混匀 放置6min 加入10 硝酸铝1 5mL 混匀 放置6min 加4 氢氧 化钠20mL 加蒸馏水定容至刻度 摇匀 放置15min 在波长510nm下测定吸光度 以芦丁含量 g mL 为横坐标 吸光值为纵坐标绘制标准曲线 3 总黄酮含量的测定 总黄酮含量的测定 取待测液10ml于50ml容量瓶中 加5 亚硝酸钠1 5mL 混匀 放置6min 加入 10 硝酸铝1 5mL 混匀 放置6min 加4 氢氧化钠20mL 加蒸馏水定容至刻度 摇匀 放置15min 在波长510nm下测定吸光度 黄酮得率 黄酮类物质质量 干物质质量 100 4 试验设计 4 1玉米皮黄酮提取的单因素试验 4 1 1 乙醇浓度对玉米皮黄酮提取效果的影响 称取玉米皮粉末 60 目 0 5000g 按料液比 1 20 g mL 分别加入浓度为 20 30 40 50 60 70 80 90 的乙醇溶液 浸泡 30 分钟 置于 50 水浴恒温振荡器中振荡浸提 1h 离心 再按同样条件浸提 1 次 离心 合并提 取液 定容至 25mL 测定总黄酮的提取率 4 1 2 样品粒度对黄酮提取效果的影响 称取粒度为 20 40 60 80 100 120 目粉末各 0 5000g 按料液比 1 20 g mL 加入最佳浓度乙醇溶液 浸泡 30 分钟置于 50 水浴恒温振荡器中振荡浸 提 1h 离心 再按同样条件振荡浸提 1 次 离心 合并提取液 定容至 25mL 测 定总黄酮的提取率 4 1 3 固液比对黄酮提取效果的影响 称取粒度 80 目的玉米皮粉末 0 5000g 按料液比 1 10 1 15 1 20 1 25 1 30 加入最佳浓度乙醇溶液 置于 50 水浴恒温振荡器中 振荡侵提 1h 离心 离心 再按同样条件振荡浸提 1 次 离心 合并提取液 定容 至 25mL 测定总黄酮的提取率 4 1 4 提取温度对黄酮提取效果的影响 称取粒度 80 目的玉米皮粉末 0 5000g 按固液比 1 15 g ml 加入最佳浓度 乙醇溶液 置于 20 30 40 50 60 70 80 90 100 水浴恒温振荡器中振荡 侵提 1h 离心 再按同样条件侵提 1 次 离心 合并提取液 定容至 25ml 测定 黄酮的提取率 4 1 5 提取时间对黄酮提取效果的影响 称取粒度 80 目的玉米皮粉末 0 5000g 按固液比 1 15 g ml 加入最佳浓度 乙醇溶液 置于 50 水浴恒温振荡器中振荡侵提 1 2 3 4 5 6h 离心 再按 同样条件侵提 1 次 离心 合并提取液 定容至 25ml 测定黄酮的提取率 4 1 6 提取次数对黄酮提取效果的影响 称取粒度 80 目的玉米皮粉末 0 5000g 按固液比 1 15 g ml 加入最佳浓度 乙醇溶液 置于 80 水浴恒温振荡器中振荡侵提 2h 离心 再按同样条件侵提 1 2 3 4 5 次 离心 合并提取液 定容至 25ml 测定黄酮的提取率 4 2玉米芯黄酮提取的响应面分析与优化玉米芯黄酮提取的响应面分析与优化 在单因素试验的基础上 选择适宜的乙醇体积分数 料液比 温度 时间 设置4因素3水平 利用中心组合设计 确定最佳提取工艺 5 预期目标预期目标 通过本论文的实验工作 综合运用以往所学的理论和专业知识 确定振荡法提 取玉米皮中黄酮的最佳工艺条件 四 进度安排四 进度安排 认真查阅文献资料 为进试验室打好基础 总结一些不足找出原因及时作 出改正 在试验的工作过程中注意各种细节问题 以谨慎的态度对待每一 次的实验 认真总结实验中出现的各种问题 及时的向老师请教 和同学 讨论找出解决的方法 设计时间安排 设计时间安排 第 1 3 周 玉米皮的作用和用途 黄酮的性质 用振荡法提取玉米皮黄酮 等方面的资料 明确本课题的设计内容 理清实验的思路 了解试验操作 的注意事项 注意一些关系成败的实验细节 总结试验所需的全部试剂 仪器等设备然后写出开题报告 第 4 6 周 课题方案 设计思路和具体内容 实验步骤的确定 第 7 11 周 查阅详细资料 仔细琢磨有关内容 动手反复操作实验以求得 最佳值 第 12 13 周 分析实验数据初步完成毕业论文及时与导师交流 修改论文 中不足之处 第 14 16 周 撰写设计说明书 答辩 五 主要参考文献 外文参考文献不少于五 主要参考文献 外文参考文献不少于 2 2 篇 篇 1 陈毓荃 生物化学实验方法和技术 J 科学出版社 2002 159 160 2 丛峰松 生物化学实验 J 上海交通大学出版社 2005 135 136 3 萧能 生物化学实验原理和方法 J 北京大学出版社 2005 4 黄河胜 马传庚 陈志武 黄酮类化合物药理作用研究进展 J 中国中药杂志 2000 10 13 16 5 杜崇民 刘春宇 黄酮类化合物抗肿瘤研究进展 J 中国野生植物资源 2007 3 4 7 6 曹纬国 刘志勤 邵云 陶燕铎 黄酮类化合物药理作用的研究进展 J 西北植 物学报 2003 12 2241 2247 7 梁英 韩鲁佳 黄芩中黄酮类化合物药理学作用研究进展 J 中国农业大学学 报 2003 6 9 14 8 钱俊臻 黄酮类化合物提取方法的研究进展 J 化工文摘 2008 6 35 37 40 9 李巧玲 黄酮类化合物提取分离工艺的研究进展 J 山西食品工业 2003 4 6 7 10 梁大伟 江银枝 黄酮类化合物合成的研究进展 J 化学研究 2008 4 102 106 11 杨博 吴茜 李志裕 尤启冬 黄酮化合物的合成研究进展 J 化学通报 2009 1 20 26 12 朱华 梁东艳 廖月葵 总黄酮化合物药理作用研究进展 J 广西中医药 2003 3 3 5 13 BOYER R F Morden experimental biochemistry 3rd ed New York Addion Wesley Longman 2000 14