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文档简介
1 20132013 高考生物二轮复习精品资料专题高考生物二轮复习精品资料专题 1313 生物技术实践 教学案 生物技术实践 教学案 学生版 学生版 2013 2013 考纲解读考纲解读 1 微生物的分离和培养 2 某种微生物数量的测定 3 培养基对微生物的选择利用 4 利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用 5 酶的存在与简单制作方法 6 酶活力测定的一般原理和方法 7 酶在食品制造和洗涤等方面的应用 8 制备和应用固相化酶 9 从生物材料中提取某些特定的成分 10 运用发酵加工食品的基本方法 11 测定食品加工中可能产生的有害物质 12 植物的组织培养 13 蛋白质的提取和分离 14 PCR 技术的基本操作和应用 知识网络构建知识网络构建 2 3 重点知识整合重点知识整合 一 微生物的营养 1 微生物的营养 营养要素 来源 功能 无机碳 源 CO2 NaHCO3 CaCO3等含碳无 机物 碳源 有机碳 源 糖 脂肪 蛋白质 有机酸 石油 花生粉饼等 构成细胞和合成一些代谢 产物 有些既是碳源又是异养微 生物的能源 营养要素 来源 功能 无机氮源 NH3 铵盐 硝酸盐 N2等 氮 源 有机 氮源 牛肉膏 蛋白胨 核酸 尿素 氨 基酸 合成蛋白质 核酸 及含氮的代谢产物 营养要素 来源 功能 生长因子 特 殊营养物质 维生素 氨基 酸 碱基 酶和核酸的组成成分 参与代谢过程中的酶促反应 水和无机机盐 外界摄入 水不仅是优良溶剂而且可维持生物 大分子的稳定 无机盐是细胞内的成分 和调节物质等 2 培养基种类及用途 划分标准 培养基种类 特点 用途 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 观察微生物的运动 分类鉴 定 物理 性质 固体培养基 加凝固 剂 如琼脂 微生物分离 鉴定 活菌计 数 保藏菌种 4 划分标准 培养基种类 特点 用途 天然培养基 含化学成分不明 确的天然物质 工业生产 化学 成分 合成培养基 培养基成分明确 用化 学成分已知的化学物质配 成 分类 鉴定 划分标 准 培养基种 类 特点 用途 用途 选择培养 基 培养基中加入某种 化学物质 以抑制不需 要微生物的生长 促进 所需要的微生物的生长 培养 分离出特定微生物 如培养酵 母菌和霉菌时 可在培养基中加入青霉 素 培养金黄色葡萄球菌时 可在培养 基中加入高浓度的食盐 用途 鉴别培养 基 根据微生物的代谢 特点 在培养基中加入 某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物 如可用伊 红 美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中 是否有大肠杆菌 若有 菌落呈深紫色 并带有金属光泽 3 微生物的分离与计数 1 土壤中分解尿素的细菌的分离 筛选菌株 利用选择培养基筛选 过程 土壤取样 样品的稀释 微生物的培养与观察 2 分解纤维素的微生物的分离 原理 即 可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌 5 流程 土壤取样 选择培养 梯度稀释 涂布平板 挑选菌落 3 鉴定方法 鉴定分解尿素的细菌 含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基 细菌 指示剂 变红 则该菌能分解尿素 鉴定纤维素分解 菌 4 计数方法 显微镜直接计数法 利用特定细菌计数板或血球计数板 在显微镜下计数一定容积样品中的细菌数量 该 方法不能区分细菌的死活 间接计数法 活菌计数法 常用稀释涂布平板法 稀释涂布平板法的理论依据是 当样品的稀释度足够高时 培 养基表面生长的一个菌落即代表一个活菌 为了保证结果准确 一般选择菌落数在 30 300 的平板进行计数 每个稀释倍数涂布 3 个平板进行计数 取平均值 特别提醒 消毒和灭菌的区别 条件 结果 常用方法 应用范围 煮沸消毒法 一般物品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 消毒 较为 温和的物 理或化学 方法 仅杀 死物体表 面或内部 部分微生 物 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手 用氯 气消毒水源等 条件 结果 常用方法 应用范围 灼烧灭菌 接种工具 干热灭菌 玻璃器皿 金属用 具等 灭菌 强烈的理化 因素 杀死物体内外 所有的微生物 包 括芽孢和孢子 高压蒸汽 灭菌 培养基及容器的灭 菌 6 二 酶的应用 1 酶的存在与简单制作方法 1 酶在生物体内的存在 或分布 部位 酶是在生物体活细胞中合成的 多数酶在细胞内直接参与生物化学反应 少数的酶要 分泌到细胞外发挥作用 2 酶的制备 胞内酶的制取 需要破碎生物组织细胞 可用破碎仪 研磨器或匀浆器等机械将组 织细胞破碎 使酶从活细胞中释放出来 进入细胞外的溶液中 经过滤 离心制备成粗酶 液 胞外酶的制备 对于唾液淀粉酶 胰蛋白酶等分泌到细胞外的酶 可以直接从动物 分泌物或细胞外的组织间隙中提取 2 酶活性 力 测定的一般原理和方法 1 酶活性 力 的含义 酶的活性 力 是指酶催化一定化学反应的能力 2 酶活性 力 测定的一般原理和方法 酶的活性 力 通常以单位时间内底物的消耗量 或者在单位时间内产物的生成量来表示 3 酶的活性及影响酶活性因素的实验探究 以果胶酶在生产中的应用为例探究温度或 pH 对果胶酶活性的影响 1 探究不同温度 或 pH 对酶活性的影响时 温度 或 pH 作为自变量 通常通过设置 合理的梯度来确定最适值 最适值是通过比较相同时间内获得的产量或效果来确定的 2 在混合苹果泥和果胶酶之前 要将苹果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温 或同 pH 处理 目的是保证底物和酶在混合时的温度 或 pH 相同 避免苹果泥与果胶酶混合时 影响混合物的温度 或 pH 从而影响实验效果 3 果胶酶将果胶分解为小分子物质 小分子物质可以通过滤纸 因此苹果汁的体积大 小反映了果胶酶催化分解果胶的能力 在不同的温度和 pH 下 果胶酶的活性越大 苹果汁 的体积就越大 4 探究不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果 1 实验原理 加酶洗衣粉的酶制剂有多种 包括蛋白酶 脂肪酶 淀粉酶 纤维素酶 等 加入不同的酶制剂 会制成用于不同污渍洗涤的加酶洗衣粉 复合酶洗衣粉加入的酶 制剂种类较多 对各种污渍都有较好的洗涤效果 7 2 实验操作程序 烧杯编号 步骤 注入自来水 500 mL 500 mL 500 mL 加入物质 等量 奶渍布 奶渍布 奶渍布 控制水温 37 37 37 加入洗衣粉 等量 蛋白酶洗衣 粉 复合酶洗衣 粉 脂肪酶洗衣粉 玻璃棒搅拌 等速 5 分钟 5 分钟 5 分钟 观察实验现象 5 固定化酶和固定化细胞的比较 项目 固定化酶 固定化细胞 常用方法 化学结合法 物理吸附 法 包埋法 优点 可反复使用 有利于工艺的连续化 管道化 同时降低了生产成 本 可以连续发酵 节约成本 保持酶在细胞内的原始状况 增加了 酶的稳定性 操作容易 不足 酶在固定化时活力有 所损失 不适用于多酶反 应 细胞膜 细胞壁会阻碍底物的渗透和扩 散 降低反应效率 三 生物技术在食品加工及其他方面的应用 1 运用发酵加工食品的基本方法 果酒 果醋 腐乳 泡菜 微 生物类 酵母菌 真菌 兼性厌 醋酸杆菌 细 菌 好氧细菌 毛霉 真菌 好氧菌 乳酸菌 细菌 厌氧 菌 8 型 氧菌 原 理 酵母菌无 氧呼吸产生酒 精 醋酸杆菌有 氧呼吸产生 醋酸 毛霉代谢产 生蛋白酶和脂肪 酶 乳酸菌无氧呼吸产 生乳酸 控 制条件 前期有氧后期 无氧 20 左 右 有氧 30 35 有氧 15 18 无氧 常温 实验流程 特别提醒 在泡菜的腌制过程中会产生亚硝酸盐 亚硝酸盐在一定条件下可转化为能致癌 致 畸和致突变的物质 亚硝胺 在盐酸酸化条件下 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后 与 N 1 萘基乙 二胺盐酸盐结合形成玫瑰 紫 红色染料 通过目测比较 可大致估算亚硝酸盐的含量 2 植物激素与组织培养生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的作用及特点 1 在生长素存在的情况下 细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 2 使用顺序不同 结果不同 具体如下 使用顺序 实验结果 先使用生长素 后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂 但细胞不分化 先使用细胞分裂素 后使用生长素 细胞既分裂又分化 同时使用 分化频率提高 3 用量比例不同 结果也不同 的比值Error Error 生长素用量 细胞分裂素用量 9 3 植物芳香油三种提取方法的比较 提取方法 实验原理 方法步骤 适用范围 水蒸气蒸 馏 利用水蒸气将挥发性 较强的植物芳香油携带出 来 水蒸气蒸 馏 分离油层 除水过滤 适用于提取玫瑰油 薄荷油等挥发性强的芳 香油 压榨法 通过机械加压 压榨 出果皮中的芳香油 石灰水浸 泡 漂洗 压榨 过滤 静置 再 次过滤 适用于柑橘 柠檬 等易焦糊原料的提取 有机溶 剂萃取 使芳香油溶解在有机溶剂 中 蒸发溶剂后就可获得 芳香油 粉碎 干 燥 萃取 过滤 浓缩 适用范围广 要求 原料的颗粒要尽可能细 小 能充分浸泡在有机 溶液中 4 DNA 和蛋白质技术 1 DNA 的粗提取和鉴定 基本原理 a DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同 在 0 14 mol L 的 NaCl 溶液中的溶 解度最低 b DNA 不溶于酒精溶液 c DNA 不被蛋白酶水解 d DNA 在水浴加热条件下可被二苯胺染成蓝色 主要步骤 选取材料 破碎细胞 获取含 DNA 的滤液 去除滤液中的杂质 DNA 的 析出与鉴定 注意事项 a 选择动物细胞时 细胞比较容易破碎 选择植物细胞时则要先溶解细胞膜 如加洗 涤剂 研磨等 b 以鸟类的红细胞为材料时 需向血液中加入柠檬酸钠抗凝 c 二苯胺需现配现用 2 PCR 技术的基本操作和应用 10 目的 获取大量的目的基因 原理 双链 DNA 的复制 条件 需要 DNA 模板 引物 一般为单链 DNA 四种脱氧核苷酸 耐高温的 DNA 聚合酶和酶促反应所需的离子 同时还要控制温度 过程 a 变性 在 95 时 DNA 解旋 b 复性 在 50 时引物与 DNA 单链结合 c 延伸 在 72 时合成 DNA 子链 两个引物间的序列 3 蛋白质的提取和分离 实验原理 依据蛋白质的各种特性可以将不同种类的蛋白质分离 常用方法 a 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小分离蛋白质 b 电泳 利用待分离样品中各种分子带电性质的差异及分子本身大小 形状的不同产 生不同的迁移速度 由此将各种分子分离 c 蛋白质的提取和分离一般分为四步 样品处理 粗分离 纯化和纯度鉴定 特别提醒 人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核 也没有 DNA 不适于作为 DNA 提取的材 料 但却是提取血红蛋白的理想材料 凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果 但直径过大会造成洗脱液体积增大 样品 稀释度增大 凝胶色谱柱的高度与分离度有关 红细胞洗涤过程中 洗涤三次后 上清液仍有黄色 可增加洗涤次数 否则无法除 去血浆蛋白 离心时转速要低 时间要短 否则白细胞等会一同沉淀 达不到分离效果 血红蛋白释放过程中 蒸馏水的作用是涨破红细胞 甲苯的作用主要是溶解细胞膜 高频考点突破高频考点突破 考点一考点一 微生物的培养与应用微生物的培养与应用 1 培养基及其种类 1 成分 包含碳源 氮源 水分 无机盐 有些微生物还需在培养基中额外补充生长 因子 11 2 制备 计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 3 种类 划分标准培养基种类特点用途 液体培养基不加凝固剂工业生产 半固体培养 基 观察微生物的运动 分类鉴定 物理 性质 固体培养基 加凝固剂 如琼脂 微生物的分离 鉴定 活菌计数 菌种保藏 选择培养基 培养基中加入某种化学物质 以 抑制不需要的微生物的生长 促进所 需要的微生物的生长 培养 分离出特定微 生物 用途 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点 在培养 基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生 物 2 微生物的纯化培养的方法 1 平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作 将聚集的菌种逐步稀释分散到 培养基的表面 在数次划线后培养 可以分离到由一个细胞繁殖而来的菌落 2 稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养 基的表面 进行培养 在稀释度足够高的菌液里 聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞 从而能在培 养基表面形成单个的菌落 3 微生物的分离和计数 1 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 筛选菌株 利用选择培养基筛选菌株 测定微生物数量的常用方法 统计菌落数目 公式 每克样品中菌株数 C V M 或显微镜直接计数 过程 土壤取样 样品的稀释 微生物的培养与观察 12 设置重复组与对照组 a 设置重复组 统计某一稀释度下平板上的菌落数时 要至少涂布 3 个平板作重复组 增强实验结果 的说服力与准确性 b 设置对照组 判断培养基中是否有杂菌污染时 需将未接种的培养基与接种的培养基同时进行培养 判断选择培养基是否具有筛选作用时 需将牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养 观 察两种培养基上菌落数目 进行对比得出结论 2 分解纤维素的微生物的分离 实验原理 即 可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌 实验流程 土壤取样 梯度稀释 挑选菌落 选择培养 选择培养基 涂布平板 鉴别培养基 4 测定微生物数量的方法 1 直接计数法 常用的是显微镜直接计数 2 间接计数法 常用的是稀释涂布平板计数法 例 1 右图为不同培养阶段酵母菌种各数量 葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线 请 回答下列问题 1 曲线 AB 段酵母菌呼吸发生的场所是 曲线 BC 段酵母呼吸的方式为 13 2 酵母菌种群数量从 C 点开始下降的主要原因除葡萄糖大量消耗外 还有 3 在 T1 T2时段 单位时间内酵母菌消耗葡萄糖量迅速增加的主要原因有 4 某同学在 T3时取样 统计的酵母菌种群数量明显高于 D 点对应的数量 原因可 能有 和用血球计数板计数时出现错误等 变式探究 有些细菌可分解原油 从而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同学欲 从含原油的土壤中筛选出高效降解原油的菌株 回答问题 1 在筛选过程中 应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的 固体培养基土 从功能上讲 该培养基属于 培养基 2 纯化菌种时 为了得到单菌落 常采用的接种方法有两种 即 和 3 为了筛选出高效菌株 可比较单菌落周围分解圈的大小 分解圈说明该菌株的降 解能力 4 通常情况下 在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌 和 无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近进 行 以避免周围环境中微生物的污染 变式探究 炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病 炭疽杆菌两端截平 呈竹节状排列 菌落呈卷发状 对炭疽病疑似患者 可根据噬菌体的宿主专一性 通过实 验确诊 1 细菌培养 采集疑似患者的样本 分离培养 获得可疑菌落 2 细菌鉴定 实验流程如图所示 对配制的液体培养基等需采取 方法灭菌 实验所用液体培养基的碳源为 填 无机碳 或 有机碳 14 挑选可疑菌落制片后 用 观察 可看到呈竹节状排列的杆菌 接种可疑菌后 35 培养 24 小时 液体培养基变浑浊 原因是 对照组试管中应加入 与实验组同时培养 6 小时后 若实验 组液体培养基的浑浊度比对照组 填 高 或 低 则可明确疑似患者被炭疽 杆菌感染 反之则排除 对排除的疑似患者及易感人群 可接种炭疽杆菌疫苗 刺激机体产生相应抗体 与 产生抗体相关的细胞除 T 细胞 B 细胞外 还有 考点二考点二 酶的应用酶的应用 1 直接使用酶 固定化酶和固定化细胞的比较 直接使用酶固定化酶固定化细胞 制作方法 化学结合法固定化 物理吸附法固定化 包埋法固定化 是否需要 营养物质 否否是 催化反应单一或多种单一一系列 反应底物 各种物质 大分子 小分 子 各种物质 大分子 小分子 小分子物质 缺点 对环境条件非常敏感 易失活 难回收 成本 高 影响产品质量 不利于催化一系列酶 促反应 反应物不易与酶接近 尤其是 大分子物质 反应效率下降 优点 催化效率高 耗能低 低 污染 既能与反应物接触 又能与产物分离 可以重复利用 成本低 操作容易 2 酶在食品制造和洗涤等方面的应用 1 加酶洗衣粉中酶制剂的种类与功效 加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉 目前常用的酶制剂有四类 蛋白酶 脂肪酶 15 淀粉酶和纤维素酶 其中 应用最广泛 效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶 碱性蛋白酶能将血渍 奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子 的肽 使污迹从衣物上脱落 脂肪酶 淀粉酶和纤维素酶也能将大分子的脂肪 淀粉和纤 维素水解为小分子的物质 使洗衣粉具有更好的去污能力 2 果胶酶在果汁生产中的应用 在果汁生产中 果胶不仅会影响出汁率 还会使果汁混浊 果胶酶能够分解果胶 将 其变成可溶性的半乳糖醛酸 使浑浊的果汁变澄清 例 2 下列有关酶的制备和应用的叙述 正确的是 A 酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶 B 透析 电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化 C 棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤 D 多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层 变式探究 如图 1 表示制备固定化酵母细胞的有关操作 图 2 是利用固定化酵母细 胞进行酒精发酵的示意图 下列叙述正确的是 多选 A 刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液 B 图 1 中 X 溶液为 CaCl2溶液 其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠 C 图 2 发酵过程中搅拌的目的是使培养液与酵母菌充分接触 D 图 1 中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图 2 装置中 考点三考点三 生物技术在食品加工及其他方面的应用生物技术在食品加工及其他方面的应用 16 1 果酒 果醋制作的注意事项 1 材料的选择与处理 选择新鲜的葡萄 榨汁前应先冲洗 再除去枝梗 以避免去除枝梗时引起葡萄破损 增加被杂菌污染的机会 2 防止发酵液被污染 需要从发酵制作的过程进行全面的考虑 因为操作的每一步都可能混入杂菌 为避免 杂菌污染 榨汁机要洗净并晾干 发酵装置要洗净并用 70 的酒精消毒 若用简易的发酵 装置 每隔一定时间排气时只需拧松瓶盖 不要完全揭开瓶盖等 3 控制发酵条件 果酒果醋 温度 20 左右 最适合繁殖 18 25 酒精 发酵 30 35 最适合生长 氧气前期通 O2 然后控制无 O2氧气充足 其他时间 10 12 天 pH 5 0 6 0时间 约 7 8 天 2 腐乳制作的注意事项 1 影响腐乳品质的条件 水 盐 酒 温度 发酵时间等 水的控制 含水量约 70 用含水量过高的豆腐制腐乳 不易成形 盐的控制 盐浓度过高 会影响腐乳的口味 浓度过低 腐乳易腐败变质 酒的控制 酒精含量一般控制在 12 左右 酒精含量过高 使腐乳成熟期延长 酒 精含量过低 杂菌繁殖快 豆腐易腐败 温度的控制 温度为 15 18 适合毛霉生长 发酵时间控制在 6 个月左右 2 防止杂菌污染 用来腌制腐乳的玻璃瓶 洗刷干净后要用沸水消毒 装瓶时 操作要迅速小心 加放卤汤后 要用胶条将瓶口密封 封瓶时 最好将瓶 口通过酒精灯的火焰 防止瓶口被污染 3 泡菜制作的注意事项 1 泡菜坛的选择 选择气密性好的泡菜坛 用水封闭坛口使坛内与坛外空气隔绝 这 是最简易的造成无氧环境的方法 这样 坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发 酵 如不封闭 则会有许多需氧菌生长 蔬菜会腐烂 17 2 腌制条件的控制 腌制过程中要注意控制腌制的时间 温度和食盐的用量 发酵时 间受到温度的影响 18 20 腌制 15 天左右 温度高 时间短一些 温度过高 食盐 用量不足 10 腌制时间过短 都容易造成细菌大量繁殖 亚硝酸盐含量增加 4 生物成分提取 物质方法原理步骤 凝胶色谱法根据相对分子质量的大小 血红蛋白 电泳法 根据各种分子带电性质的 差异及分子本身的大小 形状 的不同 样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定 玫瑰精油 水蒸气蒸馏法 利用水蒸气将挥发性较强 的植物芳香油携带出来 水蒸气蒸馏 分离油层 加 NaCl 除水过滤 橘皮精油压榨法 通过机械加压 压榨出果 皮中的芳香油 石灰水浸泡 漂洗 压榨 过滤 静置 再次过滤 胡萝卜素萃取法 使提取物溶解在有机溶剂 中 蒸发后得到提取物 粉碎 干燥 萃取 过滤 浓缩 例 3 下列与果酒 果醋和腐乳制作相关的叙述 正确的是 A 腐乳制作所需要的适宜温度最高 B 果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵 C 使用的菌种分别是酵母菌 醋酸菌 乳酸菌 D 使用的菌种都具有细胞壁 核糖体 DNA 和 RNA 变式探究 下图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程 下列叙述正确的是 A 过程 和 都只能发生在缺氧条件下 B 过程 和 都发生在酵母细胞的线粒体中 18 C 过程 和 都需要氧气的参与 D 过程 所需的最适温度基本相同 答案 C 考点四考点四 DNADNA 和血红蛋白的提取和分离和血红蛋白的提取和分离 1 DNA 粗提取与鉴定 1 哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核 不适于作为 DNA 提取的材料 但却是提取血 红蛋白的理想材料 2 实验过程中两次用到蒸馏水 第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破 释放出 DNA 第二次目的是稀释 NaCl 溶液 使 DNA 析出 3 鉴定 DNA 加入二苯胺试剂并沸水浴加热 观察是否出现蓝色 2 血红蛋白的提取和分离操作程序 1 样品处理 红细胞的洗涤 血红蛋白的释放 分离血红蛋白溶液 2 粗分离 透析 除去样品中分子量较小的杂质 3 纯化 用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化 4 纯度鉴定 一般用 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 来测定蛋白质的相对分子质量 例 4 在利用鸡血进行 DNA 的粗提取与鉴定 的实验中 相关叙述正确的是 A 用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0 14 mol L 滤去析出物 B 调节 NaCl 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶 都可以去除部分杂质 C 将丝状物溶解在 2 mol L NaCl 溶液中 加入二苯胺试剂即呈蓝色 D 用菜花替代鸡血作为实验材料 其实验操作步骤相同 变式探究 关于 DNA 粗提取和鉴定 的实验原理的叙述中 正确的是 A 用猪血作为实验材料的原因是猪血的红细胞有细胞核 DNA 含量多 B 利用 DNA 在 2 mol L 的氯化钠溶液中溶解度最低 易析出的特性提取 DNA C 利用 DNA 不溶于酒精 而细胞中的其他物质可溶于酒精的特性提纯 DNA D 利用 DNA 与二苯胺作用而显现紫色的特性鉴定 DNA 难点探究难点探究 19 难点一难点一 微生物的培养和应用微生物的培养和应用 1 微生物的营养 营养要素 来源 功能 无机碳 源 CO2 NaHCO3 CaCO3等含 碳无机物 碳源 有机碳 源 糖类 脂质 蛋白质 有机酸 石油 花生粉饼等 构成细胞中的物质和一 些代谢产物 既是碳源又是能源 无机氮 源 无机氮 NH3 铵盐 硝 酸盐 N2等 将无机氮合成含氮的代谢 产物 氮源 有机氮 源 牛肉膏 蛋白胨 核酸 尿素 氨基酸 合成蛋白质 核酸及含氮 的代谢产物 生长因子 维生素 氨基酸 碱基 酶和核酸的组成成分 参与代谢过程中的酶促反应 2 微生物的纯化培养的方法 1 平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作 将聚集的菌种逐步稀释分散到 培养基的表面 在数次划线后培养 可以分离到由一个细胞繁殖而来的菌落 2 稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养 基的表面 进行培养 在稀释度足够高的菌液里 聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞 从而能在培 养基表面形成单个的菌落 3 测定微生物数量的方法 1 直接计数法 常用的是显微镜直接计数 2 间接计数法 常用的是稀释涂布平板计数法 特别提示 1 显微镜计数法计算的细菌中包括死细菌 稀释涂布平板法计数的是 20 活菌数 2 稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目要低 例 1 下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是 A 利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数 B 接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落 C 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌 D 用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少 难点二难点二 酶的应用酶的应用 1 直接使用酶 固定化酶和固定化细胞 直接使用酶 固定化酶 固定化细胞 制作方法 化学结合法固定化 物理吸附法固定化 包埋法固定法 是否需要 营养物质 否 否 是 催化反应 单一或多种 单一 一系列 反应底物 各种物质 大分子 小分子 各种物质 大分子 小分子 小分子物质 缺点 对环境条件非常敏感 易失活 难回收 成本 高 影响产品质量 不利于催化一系列酶 促反应 反应物不易与酶接 近 尤其是大分子物质 反应效率下降 优点 催化效率高 耗能低 低 污染 既能与反应物接触 又能与产物分离 可以重复利用 成本低 操作容易 2 加酶洗衣粉的洗涤效果的探究 1 判断加酶洗衣粉洗涤效果的方法 可在洗涤后比较污物的残留状况 如已消失 21 颜色变浅 面积缩小等 2 加酶洗衣粉的洗涤效果的探究方法 实验设计遵循的原则是对照原则和单一变量 原则 如探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果有何不同时 以控制洗衣粉 的种类为变量 其他条件完全一致 同时 普通洗衣粉处理污物与加酶洗衣粉处理污物形 成对照实验 3 变量的分析和控制 影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温 水量 水质 洗衣 粉的用量 衣物的材质 衣物大小 浸泡时间 洗涤的方式和洗涤的时间等 在选择适宜 的变量作为探究课题的时候 应注意切合实际 如选择水温时 我们可以选择一年中冬季 春季 秋季和夏季的实际常温 5 15 25 和 35 进行实验 例 2 下列有关酶的制备和应用的叙述 正确的是 A 酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶 B 透析 电泳和酸解等方法常用于酶的分离和纯化 C 棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤 D 多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层 难点三难点三 微生物的培养与分离微生物的培养与分离 例 3 有些细菌可分解原油 从而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同学欲从受原 油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株 回答问题 1 在筛选过程中 应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基 上 从功能上讲 该培养基属于 培养基 2 纯化菌种时 为了得到单菌落 常采用的接种方法有两种 即 和 3 为了筛选出高效菌株 可比较单菌落周围分解圈的大小 分解圈大说明该菌株的 降解能力 4 通常情况下 在微生物培养过程中 实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌 和 无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行 以避免周围 环境中微生物的污染 归纳总结 平板划线法适用于微生物的纯化 但不能用于微生物的计数 稀释涂布平板法常用于活菌计数法 而显微镜直接计数法 不能区分细菌的死活 22 用稀释涂布平板法进行计数时 为了保证结果准确 一般选择菌落数在 30 300 的平板进 行计数 难点四难点四 植物有效成分的提取植物有效成分的提取 不同物质的提取分离方法 提取方法 方法步骤 适用范围 水蒸气 蒸馏 水蒸气蒸馏 分离油层 除水过 滤 适用于提取玫瑰油 薄荷油等挥 发性强的芳香油 压榨法 石灰水浸泡 漂洗 压榨 过滤 静置 再次过滤 适用于柑橘 柠檬等易焦煳原料 的提取 有机溶 剂萃取 粉碎 干燥 萃取 过滤 浓缩 适用范围广 要求原料的颗粒要 尽可能细小 能充分浸泡在有机溶剂中 例 4 许多植物含有天然香料 如薄荷叶中含有薄荷油 现用薄荷叶提取薄荷油 回 答问题 1 薄荷油是挥发性物质 提取薄荷油时应选用 鲜 干 薄荷叶作原料 其原 因是 2 用萃取法提取薄荷油时 采用的溶剂是 原理是 3 用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时 在油水混合物中加入氯化钠的作用是 常用于分离油层和水层的器皿是 分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用 是 除去固体硫酸钠的常用方法是 历届高考真题历届高考真题 20122012 年高考试题年高考试题 一 选择题一 选择题 1 2012 年高考全国卷 5 关于细菌的叙述中 正确的是 A 不同种类细菌的生长均需要相同碳源 23 B 常用液体培养基分离获得细菌单菌落 C 细菌大量培养过程中 芽孢形成于细菌生长的调整期 D 培养基中含有高浓度 NaCl 有利于金黄色葡萄球菌的筛选 2 2012 江苏高考 21 下列关于制作果酒 果醋和腐乳的叙述 合理的是 A 在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长 B 条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸 C 果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小 D 将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时 底层和近瓶口处需加大用盐量 3 2012 江苏高考 18 下列关于 DNA 粗提取与鉴定实验 的叙述 正确的是 A 洗涤剂能瓦解细胞膜并增加 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度 B 将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C 常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA 的提取 D 用玻棒缓慢搅拌滤液会导致 DNA 获得量减少 4 2012 江苏高考 17 下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述 错误的是 A 从酶的固定方式看 吸附法比化学结合法对酶活性影响小 B 作为消化酶使用时 蛋白酶制剂以口服方式给药 C 尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶 可以反复使用 D 将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗 目的是洗去 CaCl2 和杂菌 5 2012 北京高考 5 高中生物学实验中 在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影 响最大的一项是 A 将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 zzstep B 将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上 C 将转基因植物叶片接种到无菌培养基上 D 将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上 24 6 2012 重庆高考 30 II II 乙醇可部分替代石油燃料 利于纤维素酶 酵母菌等 可将纤维素转化成乙醇 耐高温纤维素酶可以加速催化纤维素的水解 从而有利于酵母菌 发酵产生乙醇 1 某研究小组将产纤维素酶的菌株 通过诱变和高温筛选获得新菌株 为探究新菌 株所产纤维素酶能否耐受 80 高温 进行了以下实验 试管 1试管 2 z z s tep 第一步加入适量缓冲液加入等量纤维素酶溶液 缓冲液配制 第二步 30min 第三步加入 第四步 zzstep c om 60 水浴保温 10min 第五步加入 第六步沸水浴中加热 2min 观察实验现象 结果与结论 若 则表明该纤维素酶能耐受 80 高温 若 则表明该纤维素酶不能耐受 80 高温 2 酵母菌发酵产生的乙醇属于 填 初级 或 次级 代 谢产物 7 2012 山东高考 34 生物 生物技术实践 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健 医药工业等领域 辣椒素的获得途径如图 1 图中 和 分别表示辣椒组织培养中细胞的 和 过程 25 2 图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是 培养基中的生长素和细 胞分裂素用量的比值 填 高 或 低 时 有利于芽的分化 对培养基彻底 灭菌时 应采用的灭菌方法是 3 图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是 用酶解法将愈伤组织分离 成单细胞时 常用的酶是 和纤维素酶 4 提取辣椒素过程中 萃取加热时需安装冷凝回流装置 其目的是 8 2012 广东高考 29 食品种类多 酸碱度范围广 生物兴趣小组拟探究在食品生产 应用范围较广的蛋白酶 查阅相关文献 得知 1 pH 对不同蛋白酶的活力影响有差异 据图 12 可知 更适宜作为食品 添加剂 理由是 蛋白酶的活力可用 的量来表示 2 该蛋白酶的提取工艺流程如下 兴趣小组分别对酶保护剂浓度 提取液 pH 进行了探究实验 结果显示 酶保护剂浓度 在 0 02 0 06mol L 范围内 酶活力较高 提取液 pH 在 6 0 8 0 范围内 酶活力较高 他们认为 要进一步提高粗酶制剂的酶活力 以达到最佳提取效果 还需对酶保护剂浓度 和提取液 pH 进行优化 并确定以此为探究课题 请拟定该课题名称 设计实验结果记录表 9 2012 高考全国新课标卷 39 为了探究 6 BA 和 IAA 对某菊花品种茎尖外植体再生丛 芽的影响 某研究小组在 培养基中加入 6 BA 和 IAA 配制成四种培养基 见下表 灭菌后分别接种数量相同 生长状态一致 消毒后的茎尖外植体 在适宜条件下培养一段 时间后 统计再生丛芽外植体的比率 m 以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数 n 结 果如下表 26 回答下列问题 1 按照植物的需求量 培养基中无机盐的元素可分为 和 两类 上述培 养基中 6 BA 属于 类生长调节剂 2 在该实验中 自变量是 因变量是 自变量的取值范围是 3 从实验结果可知 诱导丛芽总数最少的培养基是 号培养基 4 为了诱导该菊花试管苗生根 培养基中一般不加入 填 6 BA 或 IAA 10 2012 海南卷 30 生物 选修 I 生物技术实践 15 分 回答下列关于腐乳制作的问题 1 腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品 多种微生物参与了该发酵过程 其中起 主要作用的微生物是 其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为 和 其产生的 能将豆腐中的脂肪水解为 和 2 发酵完成后需加盐腌制 加盐还可以抑制 生长 3 腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤 卤汤具有一定的防腐 作用外 还能使腐乳具有独特的 11 2012 上海卷 四 回答下列关于微生物和酶的问题 10 分 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性 研究者从热泉中筛选了高效产生高 温淀粉酶的嗜热菌 其筛选过程如图 15 所示 27 44 过程称为 过程是为了 45 号培养基称为 按功能分 该培养基中除了加入淀粉外 还需加 入另一种重要的营养成分 A 琼脂 B 葡萄糖 C 硝酸铵 D 碳酸氢钠 46 一般对配制的培养基采用高压灭菌 其中 高压 是为了 在高温淀粉酶运用到工业生产前 需对该酶的最佳温度范围进行测定 图 16 中的曲线 表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比 将酶在不同温度下保温足够长的 时间 再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性 由此得到的数据为酶的热稳定性数据 即图 16 中的曲线 47 根据图中的数据 判断该酶使用的最佳温度范围是 A 40 一 50 B 50 一 60 C 60 一 70 D 70 80 48 据图判断下列叙述错误的是 A 该酶只能在最佳温度范围内测出活性 B 曲线 35 数据点是在 80 时测得的 C 曲线 表明 80 是该酶活性最高的温度 D 曲线 表明该酶的热稳定性在 70 之后急剧下降 20112011 年高考试题年高考试题 1 2011 江苏卷 下列果酒 果醋和腐乳制作相关的叙述 正确的是 A 腐乳制作所需要的适宜温度最高 28 B 果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵 C 使用的菌种分别是酵母菌 醋酸菌 乳酸菌 D 使用的菌种都具有细胞壁 核糖体 DNA 和 RNA 2 2011 江苏卷 下列有关酶的制备和应用的叙述 正确的是 A 酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶 B 透析 电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化 C 棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤 D 多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层 3 2011 江苏卷 下列有关植物组织培养的叙述 正确的是 A 愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C 用人工薄膜将胚状体 愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D 植物耐盐突变体可通过添加适量 NaCl 的培养基培养筛选而获得 4 2011 江苏卷 在利用鸡血进行 DNA 的粗提取与鉴定 的实验中 相关叙述正确的 是 A 用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0 14mol L 滤去析出物 B 调节 NaCl 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶 都可以去除部分杂质 C 将丝状物溶解在 2mol NaCl 溶液中 加入二苯胺试剂即呈蓝色 D 用菜花替代鸡血作为实验材料 其实验操作步骤相同 5 2011 广东卷 以下关于猪血红蛋白提纯的描述 不正确的是 A 洗涤红细胞时 使用生理盐水可防止红细胞破裂 B 猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核 提纯时杂蛋白较少 C 血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D 在凝胶色谱法分离过程中 血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢 29 6 2011 山东卷 研究发现柚皮精油和乳酸菌素 小分子蛋白质 均有抑菌作用 两者 的提取及应用如图所示 1 柚皮易焦糊 宜采用 法提取柚皮精油 该过程得到的糊状液体可通过 除去其中的固体杂质 2 筛选乳酸菌 A 时可选用平板划线法或 接种 对新配制的培养基灭菌时 所用的设备是 实验前需对超净工作台进行 处理 3 培养基中的尿素可为乳酸菌 A 生长提供 电泳法纯化乳酸菌素时 若分离带电荷相同的蛋白质 则其分子量越大 电泳速度 4 抑菌实验时 在长满致病菌的平板上 会出现以抑菌物质为中心的透明圈 可通过 测定透明圈的 来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果 7 2011 新课标全国卷 有些细菌可分解原油 从而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同学欲从含原油的土壤中筛选出高效降解原油的菌株 回答问题 1 在筛选过程中 应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固 体培养基土 从功能上讲 该培养基属于 培养基 2 纯化菌种时 为了得到单菌落 常采用的接种方法有两种 即 和 3 为了筛选出高效菌株 可比较单菌落周围分解圈的大小 分解圈说明该菌株的降解 能力 4 通常情况下 在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌 和 无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近 进行 以避免周围环境中微生物的污染 2010 年高考试题 1 2010 江苏卷 25 右图 1 表示制备固定化酵母细胞的有关操作 图 2 是利用固定化 30 酵母细胞进行酒精发酵的示意图 下列叙述正确的是 A 剐溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液 B 图 1 中 X 溶液为 2 CaCl溶液 其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠 C 图 2 发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触 D 图 1 中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图 2 装置中 2 2010 新课标 37 生物 选修模块 1 生物技术实践 15 分 下列是与芳香油提取相关的问题 请回答 1 玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取 其理由是玫瑰精油具有 的性质 蒸馏 时收集的蒸馏液 是 不是 纯的玫瑰精油 原因是 2 当蒸馏瓶中的水和原料量一定时 蒸馏过程中 影响精油提取量的主要因素有蒸馏 时间和 当原料量等其他条件一定时 提取量随蒸馏时间的变化趋势是 3 如果蒸馏过程中不进行冷却 则精油提取量会 原因是 4 密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度 的地方 目的是 5 某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示 提取精 油时采摘花的最合适时间为 天左右 31 6 从薄荷叶中提取薄荷油时 能 不能 采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法 理由是 3 2010 新课标 38 生物 选修模块 3 现代生物科技专题 15 分 请回答 1 植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴 该技术可以保持品种的 繁殖种苗的速度 离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养 最终能够形成完整 的植株 说明该叶肉细胞具有该植物的全部 2 把试管苗转接到新的培养基上时 需要在超净工作台上进行 其原因是避免 的污 染 3 微型繁殖过程中 适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 而与 配 比适宜时可促进芽的增殖 若要抑制试管苗的生长 促使愈伤组织产生和生长 需尊使 用的生长调节剂是 脱落酸 2 4 D 4 将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后 单株鲜重和光合作 用强度的变化如图 据图分析 随着培养基中蔗糖浓度的增加 光合作用强度的变化趋 势是 单株鲜重的变化趋势是 据图判断 培养基中不含蔗糖时 试管苗光合作用产生的有机物的量 能 不能 满足自身最佳生长的需要 5 据图推测 若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力 应 降 低 增加 培养基中蔗糖浓度 以便提高试管苗的自养能力 32 4 2010 北京卷 1 在家庭中用鲜葡萄制作果酒时 正确的操作是 让发酵装置接受光照 给发酵装置适时排气 向发酵装置通入空气 酵母菌装置放在 45 处 5 2010 山东高考理综 34 生物 生物技术实践 生物柴油是一种可再生的清洁能 源 其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗 科学家发现 在微生物 M 产 生的脂肪酶作用下 植物油与甲醇反应能够合成生物柴油 如下图 用于生产生物柴油的植物油不易发挥 宜选用 方法从油料作物中提取 2 筛选产脂肪酶的微生物 M 时 选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供 培养基灭菌采用的最适方法是 法 3 测定培养液中微生物数量 可选用 法直接计数 从微生物 M 分离提取的脂肪 酶通常需要检测 以确定其应用价值 为降低生物柴油生产技术 可利用 技术使脂肪酶能够重复使用 4 若需克隆脂肪酶基因 可应用耐热 DNA 聚合酶催化的 技术 7 2010 广东卷 25 小李尝试制作果酒 他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试 验 见图 10 恰当的做法是 A 加入适量的酵母菌 B 一直打开阀 b 通气 C 一直关紧阀 a 偶尔打开阀 b 几秒钟 D 把发酵装置放到 4 冰箱中进行试验 8 2010 江苏卷 7 右图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程 下列叙述正确的 是 33 A 过程 和 都只能发生在缺氧条件下 B 过程 和都 只发生在酵母细胞的线粒体中 C 过程 和 都需要氧气的参与 D 过程 所需的最适温度基本相同 9 2010 浙江自选模块 题号 17 科目 生物 生物技术实践 模块 10 分 请在标有序号的空白处填空 并将序号及相应答案写在答题纸上 每空 1 分 共 10 分 某同学进行苹果汁制作实验 工艺如下图所示 1 图中用 4 KMnO的溶液浸泡苹果的目的是 黑曲霉提取液中 含有的 可水解果胶 从而使果汁澄清 固定化柱中填充的石英砂通过 方式将酶固定化 酶被固定在用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去 2 实验中 操作流程 A 和 B 的先后顺序为 在苹果汁澄清过程 中 应关闭的流速调节阀是 要测定从固定化柱流出的苹果汁中式 否还有果胶 可取一定量的果汁与等量的 混合 如果出现 现象 说明果胶还没有被完全水解 为使果胶完全水解 应将流速调 试验后 将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天 该固定化柱仍 可用于苹果汁制作实验 说明固定化酶可被 使用 生物技术实践 模块 10 分 题号 17 科目 生物 34 10 2010 海南卷 25 18 分 选修模块 1 生物技术实践 葡萄发酵可产生葡萄酒 请利用相关的知识回答问题 1 利用葡萄制作葡萄酒的过程中 发挥作用的微生物是 2 该微生物通过无氧呼吸可分解 产生的终产物是 和 3 甲 乙 丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中 在温度等适宜的条 件下进行发酵 如图所示 发酵过程中 每隔一段时间均需排气一次 据图分析 甲和 丙同学的操作有误 其中甲同学的错误是 导致发酵中出现的主要异常现 象是 丙同学的错误是 导致发酵中出现的主要异常 现象是 上述发酵过程结束后 甲 乙 丙同学实际得到的发酵产 品依次是 4 在上述制作葡萄酒的过程中 假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲 开 该操作错误是 2009 年高考试题 1 2009 理综 1 卷 下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述 错误的是 A 发酵时需要不断通入无菌空气
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