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用心 爱心 专心 第六章第六章 蛋白质和蛋白质和 DNADNA 技术技术 1 1 我们通常选用猪 牛 羊等动物的血液进行实验 来提取和分离血清蛋白 请回答下列 我们通常选用猪 牛 羊等动物的血液进行实验 来提取和分离血清蛋白 请回答下列 有关问题 有关问题 1 1 实验前取新鲜血液 静置凝固后会析出淡黄色的液体实验前取新鲜血液 静置凝固后会析出淡黄色的液体 血清 其中含有的蛋白质血清 其中含有的蛋白质 有有 等 等 2 2 血清蛋白提取和分离的活动程序为 血清蛋白提取和分离的活动程序为 在染色和脱色步骤中 所用试剂分别为在染色和脱色步骤中 所用试剂分别为 3 3 能利用电泳技术分离血清蛋白的原理是能利用电泳技术分离血清蛋白的原理是 解析 本题考查提取和分离血清蛋白的相关知识 解析 本题考查提取和分离血清蛋白的相关知识 1 1 血清中含有两种球蛋白 凝集素等多种蛋白质 血清中含有两种球蛋白 凝集素等多种蛋白质 2 2 血清蛋白的提取和分离步骤为 点样血清蛋白的提取和分离步骤为 点样 电泳电泳 染色染色 脱色脱色 制干胶板 其中染色 制干胶板 其中染色 脱色所用试剂分别为质量分数为脱色所用试剂分别为质量分数为 0 05 0 05 的考马斯亮蓝的考马斯亮蓝 R R250 250染色液 体积分数为 染色液 体积分数为 7 7 的醋的醋 酸溶液 酸溶液 3 3 血清蛋白为两性电解质 在一定条件下带有电荷 可在电场中移动 故可用电泳技血清蛋白为两性电解质 在一定条件下带有电荷 可在电场中移动 故可用电泳技 术进行分离 术进行分离 答案 答案 1 1 两种球蛋白两种球蛋白 凝集素凝集素 2 2 点样点样 电泳电泳 电泳电泳 染色染色 脱色脱色 制干胶板制干胶板 质质 量分数为量分数为 0 05 0 05 的考马斯亮蓝的考马斯亮蓝 R R250 250染色液 染色液 体积分数为体积分数为 7 7 的醋酸溶液的醋酸溶液 3 3 血清蛋白为血清蛋白为 两性电解质 在一定条件下带有电荷 可在电场中移动两性电解质 在一定条件下带有电荷 可在电场中移动 2 2 血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分 负责血液中 血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分 负责血液中 O O2 2和部分和部分 COCO2 2的运输 的运输 请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题 请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题 1 1 将实验流程补充完整 将实验流程补充完整 A A 为为 B B 为为 凝胶色谱 凝胶色谱 法的基本原理是根据法的基本原理是根据 而达到蛋白质分离的有效方法 而达到蛋白质分离的有效方法 2 2 洗涤红细胞的目的是去除洗涤红细胞的目的是去除 洗涤次数过少 无法除去 洗涤次数过少 无法除去 离心速度 离心速度 过高和时间过长会使过高和时间过长会使 一同沉淀一同沉淀 达不到分离的效果 洗涤干净达不到分离的效果 洗涤干净 用心 爱心 专心 的标志是的标志是 释放血红蛋白的过程中起作用的是 释放血红蛋白的过程中起作用的是 3 3 在洗脱过程中加入物质的量浓度为在洗脱过程中加入物质的量浓度为 2020 mol Lmol L 的磷酸缓冲液的磷酸缓冲液 pH pH 为为 7 0 7 0 的目的是的目的是 如果红色区带 如果红色区带 说明色谱柱制 说明色谱柱制 作成功 作成功 答案 答案 1 1 血红蛋白的释放血红蛋白的释放 样品的加入和洗脱样品的加入和洗脱 相对分子质量的大小相对分子质量的大小 2 2 杂蛋白杂蛋白 血血 浆蛋白浆蛋白 血浆蛋白血浆蛋白 白细胞和淋巴细胞白细胞和淋巴细胞 离心后的上清液中没有黄色离心后的上清液中没有黄色 蒸馏水和甲苯蒸馏水和甲苯 3 3 准确模拟生物体内的生理环境 保持体外的准确模拟生物体内的生理环境 保持体外的 pHpH 和体内的一致和体内的一致 均匀一致的移动均匀一致的移动 3 3 下图为细胞内 下图为细胞内 DNADNA 复制过程示意图 该过程在体外也可进行 以获得大量相同的复制过程示意图 该过程在体外也可进行 以获得大量相同的 DNADNA 片片 段 该项技术称之为段 该项技术称之为 PCRPCR 技术 又称多聚酶链式反应 请分析回答 技术 又称多聚酶链式反应 请分析回答 1 PCR 1 PCR 过程与细胞内过程与细胞内 DNADNA 复制相比 主要有两点不同 复制相比 主要有两点不同 2 PCR 2 PCR 技术过程的三个步骤 技术过程的三个步骤 3 3 假设假设 PCRPCR 过程中 只用一条过程中 只用一条 DNADNA 片段作为模板 请计算片段作为模板 请计算 3030 次循环后 反应物中大次循环后 反应物中大 约有多少个这样的约有多少个这样的 DNADNA 片段 片段 4 PCR 4 PCR 技术能在几小时内将极微量的技术能在几小时内将极微量的 DNADNA 片段特异性地扩增上百万倍 从而解决了样片段特异性地扩增上百万倍 从而解决了样 品中品中 DNADNA 含量低 难以分离的难题 试举两例 说明含量低 难以分离的难题 试举两例 说明 PCRPCR 技术的应用 技术的应用 答案 答案 1 PCR 1 PCR 过程的引物是一小段单链过程的引物是一小段单链 DNADNA 或或 RNARNA 而细胞内 而细胞内 DNADNA 复制的引物是复制的引物是 RNARNA PCRPCR 过程是高温变性解旋 不需要解旋酶过程是高温变性解旋 不需要解旋酶 2 2 变性变性 复性复性 延伸延伸 3 2 3 230 30 4 4 刑侦案刑侦案 件 亲子鉴定 疑难疾病的诊断 基因序列分析等件 亲子鉴定 疑难疾病的诊断 基因序列分析等 任选两例任选两例 4 4 19701970 年 特明和巴尔的摩证实了年 特明和巴尔的摩证实了 RNARNA 病毒能以病毒能以 RNARNA 为模板合成为模板合成 DNADNA 并发现了催化此过 并发现了催化此过 程的酶 图为形成程的酶 图为形成 cDNAcDNA 的过程和的过程和 PCRPCR 扩增过程示意图 请据图回答 扩增过程示意图 请据图回答 1 1 催化催化 过程的酶是过程的酶是 2 2 过程也称为过程也称为 DNADNA 的变性 此过程在温度高达的变性 此过程在温度高达 90 90 95 95 时才能完成 说明时才能完成 说明 DNADNA 分分 子具有子具有 性 性 用心 爱心 专心 3 3 由图中信息分析可知 催化由图中信息分析可知 催化 过程的酶都是过程的酶都是 两者在作用特性上的区别 两者在作用特性上的区别 是是 4 4 江苏有一道凉菜江苏有一道凉菜 白斩鸡 鸡肉嫩而不韧 味美鲜香 其加工过程中添加了从木白斩鸡 鸡肉嫩而不韧 味美鲜香 其加工过程中添加了从木 瓜中提取的酶制成的瓜中提取的酶制成的 嫩肉粉 嫩肉粉 下列有关嫩肉粉的叙述中 正确的是下列有关嫩肉粉的叙述中 正确的是 A A 嫩肉粉嫩肉粉 可能是通过催化细胞间的纤维素水解而实现可能是通过催化细胞间的纤维素水解而实现 嫩肉嫩肉 的的 B B 与高温蒸煮相比 与高温蒸煮相比 嫩肉粉嫩肉粉 是通过降低反应活化能而实现是通过降低反应活化能而实现 嫩肉嫩肉 的的 C C 嫩肉粉嫩肉粉 应在蒸煮鸡肉时加入 才能实现应在蒸煮鸡肉时加入 才能实现 嫩肉嫩肉 D D 嫩肉粉嫩肉粉 是一种化工产品 不利于人体健康 实际应用中能少则少 能无则无是一种化工产品 不利于人体健康 实际应用中能少则少 能无则无 解析 由题图可知 解析 由题图可知 RNA DNARNA DNA 为逆转录过程 需要逆转录酶 为逆转录过程 需要逆转录酶 都是都是 DNADNA 复制过程 复制过程 需要需要 DNADNA 聚合酶 聚合酶 PCRPCR 扩增使用的某些酶具有耐高温的特性 扩增使用的某些酶具有耐高温的特性 答案 答案 1 1 逆转录酶逆转录酶 2 2 稳定稳定 3 DNA 3 DNA 聚合酶聚合酶 催化催化 过程的酶耐高温过程的酶耐高温 4 B 4 B 5 5 下面是某校某班同学在 下面是某校某班同学在 生物技术实践生物技术实践 课中进行的实验 请回答 课中进行的实验 请回答 1 1 在在 2020 世纪世纪 5050 年代 酶已经大规模地应用于各个生产领域 到了年代 酶已经大规模地应用于各个生产领域 到了 7070 年代又发明了年代又发明了 固定化酶与固定化细胞技术 在实际生产中 固定化酶技术的优点是固定化酶与固定化细胞技术 在实际生产中 固定化酶技术的优点是 与固定化酶技术相比 固定 与固定化酶技术相比 固定 化细胞固定的是化细胞固定的是 在制备固定化酵母细胞的实验中 常用的包埋材料是 在制备固定化酵母细胞的实验中 常用的包埋材料是 2 2 某一同学运用某一同学运用 PCRPCR 技术 准备对分离得到的大肠杆菌一个技术 准备对分离得到的大肠杆菌一个 DNADNA 分子进行体外扩增 分子进行体外扩增 他往扩增仪中加入模板他往扩增仪中加入模板 DNADNA 四种脱氧核苷酸 此外还应加入 四种脱氧核苷酸 此外还应加入 和和 DNADNA 体外扩增过程包括了三个连续的步骤分别是变性 体外扩增过程包括了三个连续的步骤分别是变性 和和 3 3 还有同学将大肠杆菌破碎并提取得到大肠杆菌蛋白质 一同学利用琼脂糖凝胶电泳还有同学将大肠杆菌破碎并提取得到大肠杆菌蛋白质 一同学利用琼脂糖凝胶电泳 技术将得到的蛋白质进行分离 在电泳过程中 影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白技术将得到的蛋白质进行分离 在电泳过程中 影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白 质分子的质分子的 以及分子的形状等 而另一位同学则利用凝胶过滤法分以及分子的形状等 而另一位同学则利用凝胶过滤法分 离蛋白质离蛋白质 下图下图 他在操作中加样的正确顺序是 他在操作中加样的正确顺序是 待蛋白质接近色柱底端时 待蛋白质接近色柱底端时 用试管连续收集流出液 先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是用试管连续收集流出液 先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是 答案 答案 1 1 酶既能与反应物接触 又容易与产物分离 固定在载体上的酶能反复利用酶既能与反应物接触 又容易与产物分离 固定在载体上的酶能反复利用 多酶系统多酶系统 一系列 多种酶一系列 多种酶 海藻酸钠海藻酸钠 2 DNA 2 DNA 聚合酶聚合酶 引物引物 复性复性 延伸延伸 3 3 带电带电 性质性质 分子大小分子大小 先收集到的蛋白质分子量大 后收集到的分子量小先收集到的蛋白质分子量大 后收集到的分子量小 6 6 在遗传病及刑侦破案中常需要对样品 在遗传病及刑侦破案中常需要对样品 DNADNA 进行分析 进行分析 PCRPCR 技术能快速扩增技术能快速扩增 DNADNA 片段 在片段 在 几个小时内复制出上百万份的几个小时内复制出上百万份的 DNADNA 拷贝 有效地解决了因为样品中拷贝 有效地解决了因为样品中 DNADNA 含量太低而难含量太低而难 以对样品进行分析研究的问题 据图回答相关问题 以对样品进行分析研究的问题 据图回答相关问题 用心 爱心 专心 1 1 在相应的横线上写出引物在相应的横线上写出引物 并在复性这一步骤中将引物 并在复性这一步骤中将引物 置于合适的位置 置于合适的位置 2 2 在相应的横线上写出循环一次后生成的在相应的横线上写出循环一次后生成的 DNADNA 分子 分子 3 3 若将作为原料的四种脱氧核苷酸用若将作为原料的四种脱氧核苷酸用 3232P P 标记 请分析循环一次后生成的 标记 请分析循环一次后生成的 DNADNA 分子的分子的 特点 特点 循环 循环 n n 次后生成的次后生成的 DNADNA 分子中不含放射性的单链占总单分子中不含放射性的单链占总单 链的比例为链的比例为 4 PCR 4 PCR 反应过程的前提条件是反应过程的前提条件是 PCRPCR 技术利用了技术利用了 DNADNA 的的 原理解决了原理解决了 这个问题 这个问题 5 5 在对样品在对样品 DNADNA 分析过程中发现 分析过程中发现 DNADNA 掺杂着一些组蛋白 要去除这些组蛋白可加入掺杂着一些组蛋白 要去除这些组蛋白可加入 的物质是的物质是 解析 解析 1 1 DNADNA 聚合酶不能从头开始合成聚合酶不能从头开始合成 DNADNA 只能从 只能从 3 3 端延伸端延伸 DNADNA 链 所以引物就链 所以引物就 提供了提供了 3 3 端 子链延伸方向为端 子链延伸方向为 5 3 5 3 引物 引物 与与 b b 链部分碱基互补 引物链部分碱基互补 引物 则与则与 a a 链部分碱基互补 且连接到链部分碱基互补 且连接到 a a 链的链的 3 3 端 故引物端 故引物 的结构为的结构为 5 5 G G A A OHOH HOHO A A G G 5 5 复性结果为 复性结果为 3 3 C C C AC A G G 5 5 2 2 经过一次循环后 产生的两个经过一次循环后 产生的两个 DNADNA 分子分别含有引物分子分别含有引物 和引物和引物 3 3 由于作为原料的四种脱氧核苷酸被由于作为原料的四种脱氧核苷酸被 3232P P 标记 所以新合成的子链均含有放射性 一 标记 所以新合成的子链均含有放射性 一 次循环后的两个次循环后的两个 DNADNA 分子各有一条链含分子各有一条链含 3232P P 若复制 若复制 n n 次 产生子链共次 产生子链共 2 2n n 2 2 其中只 其中只 有有 DNADNA 母链不含母链不含 3232P P 则其所占比例为 则其所占比例为 2 22 2n n 2 2 1

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