低温诱导植物染色体数目的变化

低温诱导植物染色体数目的变化 一 实验教学目标 1 知识目标 理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制 2 能力目标 学会低温诱导植物染色体数目变化的方法 3 情感态度价值观 体会实验结果带来的成就感 感受团队合作的快乐 二 实验原理 进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞 在有丝分裂后期 染色体的着丝 点分裂 子染色体在纺锤丝的作用下 分别移向两极 最终被平均分配到两个 子细胞中去 用低温处理植物分生组织细胞 能够抑制纺锤体的形成 以致影响染色体 被拉向两极 使细胞也不能分裂成两个子细胞 结果 植物细胞染色体数目发 生变化 三 实验仪器材料 洋葱或大葱 蒜 培养皿 滤纸 纱布 烧杯 镊子 剪刀 显微镜 载 玻片 盖玻片 冰箱 卡诺氏液 改良苯酚品红染液 体积分数为 15 的盐酸 溶液 体积分数为 95 的酒精溶液 4 实验方法 1 培养根尖 将洋葱放在装满清水的广口瓶 让洋葱的底部接触水面 2 低温诱导 待洋葱长出 1cm 左右的不定根时 将整个装置放入冰箱的低温室 4 内 诱导培养 36 小时 3 固定细胞形态 剪去诱导处理的根尖约 0 5 1cm 放入卡诺氏液中浸泡 0 5 1 小时 以固定细胞的形态 然后用体积分数约 95 的酒精冲洗 2 次 4 制作装片 取固定好的根尖 进行解离 漂洗 染色 制片 4 个步骤 具体 操作方法与 观察植物细胞的有丝分裂 实验相同 5 观察装片 先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相 视野中既有正常的二 倍体细胞 也有染色体数目发生改变的细胞 发生染色体数目变化的细胞中染 色体数目可能为正常细胞的两倍 确认某个细胞发生染色体数目变化后 再用 高倍镜观察 6 记录结果 对看到的发生染色体数目加倍的细胞拍照记录 试剂及用途 试剂及用途 1 卡诺氏液 固定细胞形态 2 95 酒精 冲洗附着在根尖表面的卡诺氏液 3 解离液 质量分数为15 HCI和体积分数为95 酒精1 1混合 使组织中的 细胞分离开 4 清水 洗去解离液 防止解离过度 便于染色 5 改良苯酚品红染液 使染色体着色 五 实验数据的采集分析 一 学生观察到的较好的实验结果后 由老师拍照记录 二 造成看不到染色体数加倍细胞原因较多 常见原因有 1 没有培养出分生区或没有剪取到分生区 2 低温诱导时间不足 3 解离不充分或漂洗不干净造成染色不足 4 染色时间控制不当 看不清染色体 5 没有低倍镜寻找过程 六 实验总结反思与修正 1 针对新洋葱不容易生根的问题 解决方法为 先将新洋葱放在干燥 通风 阳光下晒10天左右 再放入冰箱中低温室内 4 左右均可 3 5天左右 可以 解除休眠 就很容易发根了 2 针对剪取根尖时 很多根尖已经被上一个班级的同学剪掉 导致实验失败的 问题 解决方法为 每次剪取根尖时先把根从基部剪掉 然后剪取上面的根尖 这样 就可以避免以上问题的出现 3 针对调整解离时间和解离方式的问题 解决方法为 解离时间少于5分钟解 离效果不太好 在制作装片时细胞分散效果不好 解离时将根尖放在培养皿的 边上 倾斜放置培养皿 滴加1毫升的解离液解离即可 这样用量少 既节约又 更加安全 或者在酒精灯火焰上稍微加热 可以节省解离的时间 4 针对染色液的浓度和染色时间的问题 解决方法为 将初始染液稀释10倍 并且染色时间为3分钟 效果最好 如果染色液不稀释 就会把染色体染色太深 以至于在显微镜下观察时 看到的是深蓝的一片 很难分辨一条条的染色体 将染液稀释10倍 并且染色时间减少为3分钟 染色清晰 而且时间长也不影响 染色效