农药残留详细操作细则

农药残留详细操作细则农药残留详细操作细则 此细则主要依据国家标准 GB T 5009 199 2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残 留量快速检测 来定制的 本实验室主要使用 酶抑制率法 分光光度法 来对蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残 留进行快速检测 试验主要仪器 DT103 农药残留快速测试仪 步骤步骤 1 开机 开机 插上电源 打开仪器背面绿色电源开关 仪器显示开机画面 按画面提示操作 按下 回车键 仪器开始自检 时间约 1min 自检完毕后 仪器进入待机检测状态 2 试剂配制 试剂配制 以配套试剂 AB204 农残速测试剂 为例 2 1 缓冲液 取 1 包缓冲剂加入 500mL 蒸馏水或纯净水中 搅拌溶解制成磷酸缓冲液 pH7 6 常温保存 2 2 显色剂 取 1 瓶显色剂加 25mL 缓冲液溶解 使用时取 100 L 4 冰箱保存 2 3 底 物 取 1 瓶底物加 12 5mL 蒸馏水或纯净水溶解 使用时取 100 L 4 冰箱保 存 或取 1 瓶底物加 2 5mL 蒸馏水或纯净水溶解 使用时取 20 L 4 冰箱保存 2 4 胆碱酯酶 酶制剂无需配制 可直接取用 使用时取 100 L 4 冰箱保存 3 预贴标签 预贴标签 根据控制中心下达的标签已经到火车达时间 可以现在烧瓶上贴上相应的标签 4 样品提取 样品提取 4 1 从窗口取样板蔬菜 4 2 用自来水稍冲洗掉泥土 然后稍晾干 贴样板标签 4 3 取 2g 果蔬样品 块茎类取 4g 叶菜剪成 1cm 左右见方的碎片 块茎类取横截面 样品或取其表皮 放入贴有相应标签的三角瓶中 每个样板重复 3 次 做 3 个样本 4 4 在三角瓶加入 10mL 缓冲液 振荡 1 2min 倒出提取液 静置 2min 待测 若 提取液混浊或杂质太多可过滤后再测 5 测试 测试 5 1 对照测试 于 1 号反应瓶中加入 2 5mL 缓冲液 再分别加入 100 L 酶液和显色剂 混匀 静置反应 10min 样品测试 于 2 7 号反应瓶中加入 2 5mL 待测液 再分别加入 100 L 酶液和显色 剂 混匀 静置反应 10min 5 2 后加入 100 L 或 20 L 底物 摇匀并立即倒入比色杯中 5 3 及时将相应比色杯放入相应通道中 既 1 号反应瓶中溶液倒入比色杯后放到 1 通道 合上盖 按 B 键 显示屏下方延迟 10s 后 测量时间开始倒计时 计时完毕 显示屏 显示吸光度增量 0 及抑制率 按 M 键 显示屏显示吸光度增量 t 及抑制率 数 据自动保存 如有需要按 P 键打印 6 结果判定 结果判定 若样品抑制率 50 表示样品农残超标 为阳性结果 7 打印结果同时通知控制中心 填写检验报告 打印结果同时通知控制中心 填写检验报告 8 在结果表单上签名 盖章 存档 在结果表单上签名 盖章 存档 9 若第 若第 7 部中出现部中出现 1 个阳性 则重新检测一次 若出现个阳性 则重新检测一次 若出现 2 个阳性 则马上通知控制中个阳性 则马上通知控制中 心 心 10 若再次检测无阳性 若再次检测无阳性 如何报告任需讨论 若再出现阳性 马上通知控制中心 如何报告任需讨论 若再出现阳性 马上通知控制中心 11 结果都需要打印出结果 并签名 盖章 存档 结果都需要打印出结果 并签名 盖章 存档 12 实验结束后对仪器进行清洗 摆放整齐 实验结束后对仪器进行清洗 摆放整齐 附加说明 附加说明 1 葱 蒜 萝卜 韭菜 芹菜 香菜 茭白 蘑菇及番茄汁液中 含有对酶有影响的 植物次生物质 容易产生假阳性 处理这类样品时 可采取整株 体 蔬菜浸提或采用表 面测定法 对一些含叶绿素较高的蔬菜 也可采取整株 体 蔬菜浸提的方法 减少色素 的干扰 2 当温度条件低于 37 酶反应的速度随之放慢 药片加液后放置反应的时间应相 对延长 延长时间的确定 应以空白对照卡用手指 体温 捏 3min 时可以 变蓝 即可往 下操作 注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性 空白对照卡不 变色的原因 一是药片表面缓冲溶液加的少 预反应后的药片 表面不够湿润 二是温度太 低 需进行适当的保温 注意事项注意事项 酶活性要求 本试剂盒中酶试剂正常活性 0 0 3 符合 GB T 5009 199 2003 方法的 要求 保存 试剂盒应保存 4 冰箱 保质期 12 个月 使用 任何试剂使用时 用一瓶打开一瓶 用完后才使用新的 防止变质 器具专用原则 任何用于移液的器具和容器都应各自贴上标签 单独使用 以免交叉 污染 试剂只出不入原则 测试时 从任何试剂瓶吸出的试剂 禁止再次注射回试剂瓶 环境温度对测试的影响 当环境温度过低时 一般低于 20 测试时需作必要保温措 施 常温方法 本试剂可用常温方法测试 测试时试剂室温放置 10min 测试 1min 的吸光 度变化值 0 正常活性 0 在 0 15 0 3 之间 另附另附 农药速测卡法农药速测卡法 国家标准方法 国家标准方法 GB T5009 199 2003 一 整体测定法一 整体测定法 1 选取有代表性的蔬菜样品 擦去表面泥土 剪成 1cm 左右见方碎片 取 5g 放入带 盖瓶中 加入 10mL 纯净水或缓冲溶液 震摇 50 次 静置 2min 以上 2 取一片速测卡 撕去上盖膜 用白色药片沾取提取液 放置 10min 以上进行预反应 有条件时 在 37 恒温装置中放置 10min 预反应后的药片表面必须保持湿润 3 将速测卡对折 用手捏 3min 或用恒温装置恒温 3min 使红色药片与白色药片叠合 发生反应 根据白色药品的颜色变化判读结果 4 每批测定应设一个纯净水或缓冲液的空白对照卡 二 表面测定法 粗筛法 二 表面测定法 粗筛法 1 擦去蔬菜表面泥土 滴 2 3 滴洗脱液在蔬菜表面 用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦 2 取一片速测卡 撕去上盖膜 将蔬菜上的液滴滴在白色药片上 3 放置 10min 以上进行预反应 有条件时 在 37 恒温装置中放置 10min 预反应后 的药片表面必须保持湿润 4 将速测卡对折 用手捏 3min 或用恒温装置恒温 3min 使红色药片与白色药片叠合 发生反应 根据白色药品的颜色变化判读结果 5 每批测定应设一个洗脱液的空白对照卡 附加说明 附加说明 1 葱 蒜 萝卜 韭菜 芹菜 香菜 茭白 蘑菇及番茄汁液中 含有对酶有影响的 植物次生物质 容易产生假阳性 处理这类样品时 可采取整株 体 蔬菜浸提或采用表 面测定法 对一些含叶绿素较高的蔬菜 也可采取整株 体 蔬菜浸提的方法 减少色素 的干扰 2 当温度条件低于 37 酶反应的速度随之放慢 药片加液后放置反应的时间应相 对延长 延长时间的确定 应以空白对照卡用手指 体温 捏 3min 时可以 变蓝 即可往 下操作 注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性 空白对照卡不 变色的原因 一是药片表面缓冲溶液加的