动物的克隆ppt课件

第3节 动物的克隆 第二章克隆技术 植物的克隆 外植体 脱分化 再分化 胚性细胞 特点 细胞质丰富 液泡小而细胞核大 一 动物细胞的培养和克隆形成 1 广义的动物组织培养 组培 包括 2 动物组织培养技术的发展 1885年 鸡神经板在生理盐水中培养成活 1903年 皮肤及白细胞培养于腹水及血清中 存活1个月 1907年 美 蛙胚神经管培养在蛙淋巴液中 观察到细胞的阿米巴运动 创立了悬浮培养法 细胞培养 组织培养和器官培养 3 动物细胞培养过程 思考题 1 植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗 动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗 为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢 如何将动物组织分散成单个的细胞呢 胰蛋白酶的作用是什么呢 由此可说明细胞间的物质是什么成份 没有 是 成块的组织细胞靠在一起 彼此限制了细胞的生长和增殖 先用剪刀剪碎 后用蛋白酶处理 胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质 思考题 细胞膜的主要成份是什么 胰蛋白酶能将细胞消化掉吗 既然胰蛋白酶能将细胞消化掉 那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢 能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗 为什么 动物细胞培养取材时 一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官 请解释原因 蛋白质和磷脂 能 注意时间的控制 不能 因为两的最适PH不同 而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂 增殖旺盛 思考题 11 动物细胞培养瓶内表面为何要光滑 无毒 12 培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂 增殖 13 如此时细胞数量并未达到人们的需求 应该怎样办 易于培养细胞贴壁 进行生长增殖 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时 细胞分裂就会停止分裂增殖 这种现象叫接触抑制 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理 然后继续增殖 这样的过程叫做传代培养 4 原代培养 传代培养 5 细胞系 细胞株 细胞系是泛指可传代的细胞 细胞株是具有特殊性质的细胞系 通过一定的选择或纯化后 细胞株一般具有恒定的染色体组型 同功酶类型 病毒敏感性和生化特性等 连续细胞系 有限细胞系 致瘤性 不死性 连续细胞株 有限细胞株 海拉 HeLa 细胞系电镜照片 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 如何界定原代培养和传代培养 细胞株和细胞系 随细胞增多 细胞就会停止分裂增殖 遗传物质改变 植物细胞和动物细胞培养的比较 获得细胞或细胞分泌蛋白 细胞的全能性 细胞株 细胞系 植物体 快速繁殖 培育无病毒植株等 葡萄糖 动物血清 蔗糖 植物激素 液体培养基 固体培养基 细胞增殖 6 动物细胞培养技术的应用 1 生产蛋白生物制品 病毒疫苗 干扰素 单克隆抗体等 3 用于检测有毒物质 2 获得大量自身的皮肤细胞 用于植皮 4 用于生理 病理 药理等方面的研究 为治疗和预防疾病提供理论依据 7 克隆培养法 把一个单细胞从群体中分离出来单独培养 使之繁衍成一个新的细胞群体 纯系 的技术 提高细胞克隆形成率的措施 适宜的培养基 动物血清 滋养细胞 激素刺激 调节pH等 应用 研究遗传规律和生理特性的重要材料 卵裂 动物细胞分化程度 受精卵 胰岛细胞 细胞的专门化 有利于提高各种生理功能的效率 三 动物的克隆繁殖 1 动物细胞全能性的表现程度 低等动物细胞的全能性一般比较容易体现 癌细胞仍能逆转为正常细胞 无论是分化还是癌变 变化的都是表现型 基因组成的完整性并没有改变 2 动物难以克隆的根本原因 基因表达的调控使得细胞中合成了专一的蛋白质 一类基因是维持生存的 另一类基因随着组织器官和发育阶段不同而选择性表达 如 哺乳动物的红细胞只有少量的线粒体 3 细胞核移植实验和动物的克隆繁殖 胚胎细胞核的移植成功率远高于成体细胞 绵羊 多莉 克隆过程 克隆羊成功的分子细胞生物学机理 体细胞克隆成功的意义 1 证明了高度分化的细胞也可以回复到类似受精卵时期的功能 2 证明了细胞质具有调控细胞核发育的作用 应用 为遗传疾病的治疗 优良品种的培育等提供了重要途径 对濒危动物的保存也有重要意义 重组移核细胞丢失了源于乳腺细胞的调节蛋白 经过三次分裂后 原乳腺细胞的调节蛋白便全部被卵细胞质中的蛋白因子替换了 因此核DNA被重新编排 细胞开始表达自己的基因 体细胞核移植技术的应用前景 世界上第一只克隆绵羊 多莉 的培育等程序如图所示 请仔细看图后回答问题 写出 所指的细胞工程各称 实施细胞工程 时 所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是 多莉面部的毛色是 判断依据 继植物组织培养之后 克隆绵羊培育成功 证明动物细胞也具有 请举例说明克隆绵羊培育成功的实际意义 细胞工程常用的技术手段小结 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物的克隆 植物的克隆 1 动物细胞培养 2 动物细胞融合 3 单克隆抗体 5 胚胎移植 4 核移植 6 胚胎分割移植 解决某些妊娠时间长 每胎产子数量少的优良种畜的繁殖速度问题 4 动物胚胎分割移植 二 动物的细胞融合技术及其应用 诱导方式 物理法 离心 振荡 电融合技术 化学法 聚乙二醇 生物法 灭活的仙台病毒 1 细胞融合与细胞杂交 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合 形成杂种细胞 2 杂交瘤技术和单克隆抗体制备 1 传统抗体生产方