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海海 南南 大大 学学 本科生毕业论文 设计 开题报告本科生毕业论文 设计 开题报告 题 目 饲料中豆粕蛋白替代鱼粉蛋白对珍珠龙胆石斑鱼生长 肠道及肝脏组织学的饲料中豆粕蛋白替代鱼粉蛋白对珍珠龙胆石斑鱼生长 肠道及肝脏组织学的 影响影响 学生姓名牟明明牟明明学 号20122111310044 学 院海洋学院海洋学院专业年级2 0 1 2 级级水产养殖学水产养殖学 指导教师吴小易吴小易职 称副教授副教授 计划完成时间2 0 1 6 年年5 月月 一 选题的目的 意义 理论 现实 和国内外研究概况 目的 饲料中豆粕蛋白替代鱼粉蛋白对珍珠龙胆石斑鱼生长 肠道及肝脏组织学的 影响 意义 珍珠龙胆石斑鱼又称龙虎斑或珍珠斑 是用龙胆石斑 公 与老虎斑 母 培育出来的杂交新种石斑鱼 其肉质细嫩 成长快速 抗病力强 有虎斑头 龙胆尾 的外型 显现杂交优势 商品鱼市场价格好 也可以做为观赏鱼 市场前景广阔 珍珠 龙胆石斑鱼 27 元 斤 鱼粉作为优质的动物性饲料蛋白源 广泛应用于水产饲料中 随着水产饲料产量的增加 对鱼粉需求的总量也随之增加 鱼粉资源日益紧张 造成 鱼粉价格居高不下 为缓解鱼粉的供需矛盾 降低饲料成本 针对具有高性价比的植 物性替代蛋白源的研究和开发显得十分迫切 尤为重要 国内外研究概况 近些年来 使用植物蛋白源替代饲料中鱼粉的研究已有大量的 报道 在不同养殖类型的水产动物中都有较好的使用效果 然而 也产生一些制约植 物蛋 白源大量应用的亟需解决的问题 如生长速度的降低 饲料系数的增高 蛋白质 利用率的下降 以及肝脏 肠道组织病变等 现有研究表明 其中原因主要表现在适 口性不佳 氨基酸不平衡和抗 营养因子等 为解决上述问题 常用的方法有使用复合 植物蛋白源 添加植酸酶 改良适口性及添加晶体氨基酸等 参阅文献 1 张璐 艾庆辉 麦康森等 植酸酶和非淀粉多糖酶对鲈鱼生长 和消化酶活性的影响 水产学报 2 姜光丽 周小秋 大豆分离蛋白对幼建鲤肝胰脏发育及消化道蛋白酶活力 的影响 水产学报 3 张 帆 张文兵 麦康森 孙瑞健 饲料中豆粕替代鱼粉对大黄鱼生长 消化酶活性和消化道组织学的影响 4 向枭 周兴华 陈建 李代金 王文娟 周小秋 饲料中豆粕蛋白替代鱼粉蛋白对 齐口裂腹鱼幼鱼生长性能 体成分及血液生化指标的影响 水产学报 二 本课题的理论依据 研究内容和研究方法 步骤及进度安排 理论依据 动物性油脂主要含饱和脂肪酸 植物油脂主要成分是不饱和脂肪酸 不 饱和脂肪酸易于消化 并有软化血管的作用 动物油脂多属饱和性 容易引起动脉硬化 而 植物油脂多属未饱和性 可以避免动脉硬化 不饱和脂肪酸根据双健个数的不同 分为单 不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸二种 是食物脂肪中 单不饱和脂肪酸有油酸 多不饱和 脂肪酸是亚油酸 亚麻酸 花生四烯酸等 人体不能合成亚油酸和亚麻酸 必须从膳食中 补充 根据双健的位置及功能又将多不饱和脂肪酸分为 6 系列和 3 系列 亚油酸和 花生四烯酸属 6 系列 亚麻酸 DAH EPA 属 3 系列 不饱和脂肪酸能保持细胞 膜的相对流动性 以保正细胞的正常生理功能 使胆固醇酯化 降低血中胆固醇和甘油三 酯 降低血液粘稠度 该善血液微循环 研究内容 饲料中豆粕蛋白替代鱼粉蛋白对珍珠龙胆石斑鱼生长 肠道及肝脏组织学的影响 研究步骤 一 实验饲料制作 试验分别以豆粕替代 0 对照组 10 20 30 40 50 60 的鱼粉蛋白设计出 7 种等氮等能的饲料配方 按照配 方配制试验饲料 A1 A2 A3 A4 A5 A6 和 A6 按照饲料配方 将所需的各种干饲 料原料粉碎 经过 40 目筛筛选 按饲料配方中的比例称重预混合 然后放入搅拌机 A 200T Mixer Bench Model unit Resell Food Equipment Ltd Ottawa Canada 中搅拌 30 分钟 在搅拌过程中 加入鱼油 大豆卵磷脂 同时按照每 100g 干物质混合物加 30 50ml 水的 比例缓慢添加水 使原料成团 在此过程中 用 6mol L 的 NaOH 调节饲料的 pH 使 pH 为 7 原料成团后 用双螺杆挤压式制粒机 中国 广州 华南理工大学 化学工程学院 制成直径 3 0mm 的实验饲料颗粒 自然风干至水分含量低于 10 然后用密封袋封存于 20 备用 饲料按照 AOAC 1985 标准方法测定粗蛋白 总脂肪和水分含量 二 试验鱼苗以及实验设计 珍珠龙胆石斑鱼幼鱼来自中国海南基益丰水产养殖有限公司 实验开 始 幼鱼按每池 30 尾的密度饲养在室内水泥池中驯化 2 周 驯化期间投喂商业饲料使鱼 苗适应养殖环境 2W 后 将初始体重为 4 37g 的实验鱼随机分配到 12 个网箱中 每箱 22 尾鱼 实验鱼初始体重 4 73g 饲养于 12 个容积为 0 46m 的流水网箱 1 2m 0 7m 0 5m 中 网箱每 3 个放置于 1 个 6m 的水泥池 3m 2m 1m 放养 密度为 22 尾 网箱 每三个网箱一种蛋白含量的饲料 实验鱼采用定量投喂的方法 实验 周期为 8 周 每周称取网箱中鱼的总体重 根据每个网箱鱼总体重调整投喂量 实验第 1 至第 8 周投喂率分别为体重的 9 7 5 5 4 4 3 3 每天等量投喂 2 次 早上 8 00 下午 4 00 实验期间 每天检测水质 盐度 28 水温 28 溶氧 6 0 6 2 mg L 氨氮 0 0 20 mg L 三 样品采集 养殖实验进行 8W 后取样 取样前 实验鱼饥饿 24h 然后对每箱鱼进行麻醉 10mg L MS 222 计数和称重 每箱随机抽取 9 条鱼 2 条用于分析体组成 另外 7 条 用肝素钠注射器抽取血液后进行称重 解剖 称量内脏重 肝重和肠系膜脂肪重 同时取 背部两侧的白肌 去除皮肤留样备用 内脏以及肝脏称重后 每箱各取四份完整肠道和肝 脏 放入 5mlEP 管中 其中两尾的肠道以及肝脏收集编号后 迅速放入液氮中冷冻保存留 作酶活力分析 另两尾鱼的肠道及肝脏收集编号后加入 Bouin 液后常温保存 血液样品在 3500g 的离心力下离心分离 10 分钟 抽取上清液保存在液氮中 四 分析方法 基本成分分析按照 AOAC 1985 的标准办法 将样品置于烘干机中 125 烘至恒重得到 水分含量 粗蛋白 N 6 25 测定则在进行酸消化后使用凯氏定氮法滴定获得 1030 Auto analyzer Tecator Sweden 脂肪按照索氏抽提法利用石油醚在脂肪抽提机中抽提 Soxtec System HT6 Tecator Sweden 灰分则将样品置于马弗炉中 650 3h 后称量获得 五 计算公式 增重率 WG 100 末均重 g 初均重 g 初均重 g 饲料效率 FE 100 末均重 g 初均重 g 饲料摄取量 g 饲料系数 饲料消耗量 g 增重量 g 100 肝体比 HIS 100 肝脏重量 g 体重 g 肠系膜脂肪比 100 肠系膜脂肪重量 g 体重 g 六 数据统计 所有数据均以平均值 标准差的方式表示 使用统计软件 SPSS12 0 进行单因子方差分析 ANOVA n 3 使用 Turkey 多重比较来分析数据之间的差异性 进度安排 查阅资料 拟定论文题目 1 月初 1 月 5 撰写开题报告 1 月 5 1 月 12 号 落实实验动物 场地 器械 1 月 12 2 月初 试验实施阶段 2 月初 4 月中旬 数据整理 4 月中旬 4 月 22 号 撰写毕业论文初稿 4 月 22 号 4 月 30 整理调查 实验数据 毕业论文定稿 5 月 三 本课题的重点 难点 预期结果和成果形式 重点 难点 饲料的配比要称量精确 在长期的饲养过程中要严格分组 不能混淆 在后 期的实验阶段 各组平行实验要分开进行 一组一组来 不要同时做 环境的同等控制 预期结果和成果形式 估计龙胆石斑鱼的生长性能最佳时豆粕蛋白替代比例为 30 40 左右 随着豆粕替代鱼粉蛋白比例的增大 估计鱼体水分 粗灰分 肥满度差异不显著 根据相关原理肝体指数则随豆粕蛋白替代水平增加而增大 谷草转氨酶 AST 和谷丙 转氨酶 ALT 随着豆粕替代比例增加而逐渐升高 饲料中豆粕

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