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文档简介
1 / 30微生物实习个人总结岁月如梭,光阴似箭,不知不觉在微生物室实习的时间已经结束了,但收获颇丰。 通过积极协助老师完成细菌学方面检验项目的同时,自己的基础操作能力有了很大程度的提高,操作起来熟练了非常多。而且通过染色在显微镜下能辨认的细菌也更多了,像球菌科的葡萄球菌感染、链球菌、淋球菌以及杆菌科的肠杆菌,真菌孢子在显微镜下也能一眼辨认;全片查找结核杆菌的阳性率也提高了。对什么类型的标本应做什么平板接种,培养温度等也有了进一步的掌握,比如:痰标本应接种在血平板,巧克力平板,沙保平板而且还要做涂片染色以监测痰标本的合格程度。血平板和巧克力平板主要观察病人痰标本里的基础菌群的生长状态,沙保主要观察是否有念珠菌生长。总之在微生物一个月的实习日子里感觉自己受教颇多,通过亲身实践操作把自己在学校学到的理论知识同实践很好的结合了起来,在带教老师的悉心指导下已熟悉掌握了各类标本的接种、细菌培养以及细菌的初步鉴定、细菌的药敏试验等。实习总结 院: 资源环境学院2 / 30别: 08 植保微生物 1 班五 组: 刘 璐 黄亚琴 王衬娟 李卓林 冯文俊王新荣 王振中 卓 侃 阮小蕾 何艺郡2016 年 5 月 4 日 2016 年 5 月 17 日学 班 第 指导老师:实习日期:(转 载于: 海达 范文 网:微生物实习个人总结) 目录水中细菌总数的测定 03土壤中放线菌的分离纯化和菌落形态观察 05糯米甜酒的酿制 10刘璐的实习心得与感想 113 / 30黄亚琴的实习总结 14王衬娟实习感想 16冯文俊的实习心得 18第五组微生物学实习心得 20水中细菌总数的测定【摘要】:水是一种宝贵的自然资源,既是地球上的生命之源,也是人类的生命之源。水也是微生物广泛分布的第二个天然理想的环境. 水质中含有大量的细菌,进行水质的微生物学检测,实验室一般是检测水中细菌菌落总数。本文主要通过平板菌落计数法对矿泉水中细菌总数进行测定,结果表明目前市场上出售的矿泉水符合我国饮用水标准。【前言】:水是生命之源,人的生存离不开水环境,水质的好坏对人民生活起着至关重要的作用,而判断水质的标准,微生物在水中的数量,种类是必不可少的。由于矿泉水在我们生活中经常饮用,因此我们选择矿泉水作为我们的水样来测定水中细菌的总数。细菌总数是指 1ml 水样在4 / 30普通营养琼脂培养基中,37经过 24h 培养后,所生长的菌落数。良好的饮用水细菌总数应100CFU/ml,而500CFU/ml 则不适宜饮用,而矿泉水的细菌总数应50CFU/ml。我国饮用水卫生标准规定每毫升水样细菌总数 37培养 24 小时不得大于 100 个,每毫升矿泉水水样细菌总数 37培养 24 小时不得大于 50 个。众所周知,水体中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关,它是评价水质污染程度的重要指标之一。水中细菌总数可说明被有机物污染的程度,细菌数越多,有机物质含量越大。本实验采用的是平板菌落计数技术测定水中细菌总数。一、实验材料1 瓶矿泉水、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、1ml 灭菌吸管、灭菌培养皿、无菌操作台、封口膜二、实验原理:水中细菌总数的测定有多种方法:倾注法、涂布法和双层培养法。本实验采用倾注法,即将 1mL 水样加入平板内,再倒入融化的培养基,立即混匀,冷却凝固后倒置培养。其优点是:(1)通用;(2)较易使菌落均匀分布,计数容易;5 / 30(3)取样量大,结果重现性好。倾注法缺点是:(1)该法不利于严格好氧菌的繁殖生长,分布在培养基内的部分细胞所形成的菌落较小,甚至无法形成菌落,(2)加上有些活菌受热损伤,使检测到的细菌总数偏低。三、实验步骤1.用灭菌吸管吸取 1ml 水样,注入灭菌培养皿中。(每个人做一个培养皿,共 5 个)2.分别倾注约 15ml 已溶化并冷却到 45左右的牛肉膏蛋白胨培养基,并立即放在平整的桌面上,作平面旋转摇动,使水样与培养基充分混匀。3.另取一灭菌培养皿,不加水样,倾注牛肉膏蛋白胨培养基 15ml,做空白对照。4.培养基凝固后,倒置于 37,培养 24 小时或者更长的时间,于第二天、第三天。第六天分别进行菌落计数。5 个平板的平均菌落数,即为 1ml 水样的细菌总数。四、结果与分析讨论6 / 30结果分析与讨论:在培养 6 天后,5 个培养基中有 4 个均长了 1 个菌落,另外一个没有长菌落,从而计数出矿泉水中细菌总数为 CFU/ml。但是,在对照平板上,长出了一个细菌,说明在倒平板时,该培养皿被污染了。1.从实验结果来看,矿泉水中细菌总数很少,符合每毫升矿泉水水样细菌总数 37培养 24 小时不得大于 50 个的卫生标准。2.实验结果中菌落数目偏小,有可能是在到平板时,牛肉膏蛋白胨培养基温度太高,将有些细菌杀死了。3.在空白对照平板上出现了一个菌落,说明该培养基被污染了,有可能是在培养基在盖盖子的时候,有杂菌进入。【参考文献】:1. 张清敏,李洪远,王兰. 环境生物学实验技术M. 北京:化学工业出版社,XX80.7 / 302. 徐飞,王开元,江迎春. 水中细菌总数测定方法的优化研究J. 研究创新,土壤中放线菌的分离纯化和菌落形态观察【摘要】:土壤中存在各做微生物,本实验从土壤微生物群体中分离纯化得到放线菌,主要是通过制备土壤稀释液、涂布或是划线、培养、挑菌、再培养的步骤,最后进行菌落形态的观察。【前言】:我们知道, 人类在地球上生生不息的繁衍,无论是原始时代, 还是现代社会, 都是土壤为我们提供了最基本的食物来源, 所以肥沃的土壤已成为庄稼丰收的重要保证。而土肥沃与否, 与土壤中的微生物有着密切的关系, 土壤中的微生物已成为土壤肥力的一个重要指标大部分对作物生长发育是有益的,它们对土壤的形成发育、物质循环和肥力演变等均有重大影响,对作物来讲是影响其生长发育的重要环境条件之一。在土壤中放线菌是以需氧性异养状态生活,它们的主要活动是分解土壤中的纤维素、木质素和果胶类物质等,通过这些作用来改善土壤的养分状况,便于作物直接吸收利用土壤养分。在酸性的土壤中,8 / 30以霉菌的活动为主,而在中性和微碱性的土壤中,则是以放线菌的活动为主。本实验对土壤中的放线菌进行分离和纯化,从而得到较为纯净的放线菌,以便进行菌落形态的观察。20162016 学年度第一学期高职生物技术及应用 1401 班农业微生物课程实习总结根据教学计划安排,本学期高职园林技术 1401 班农业微生物课程进行了为期 1 周的教学实习。现将实习总结如下:一、课程实习内容及结果1.通过微生物培养基制备技术实际操作,使学生掌握了培养基制备的基本方法和注意事项;2.通过灭菌与消毒技术练习,使学生掌握了消毒及灭菌技术操作规范;9 / 303.无菌操作技术,学会了防止一切微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法。 4.微生物的纯种分离技术纯种分离技术是微生物学中重要的基本技术之一。我们通过从土壤中分离微生物,学会了从混杂的微生物群体中获得只含某一种或某一株微生物的过程。5.参观当地生产与加工企业,本学期实习我们带领学生参观了咸阳市西郊污水处理厂,了解了生物膜法处理污水的工艺过程。 二、实习收获通过这次实习,学生从最基本的微生物实验室各种灭菌操作、仪器洗涤到微生物的实验室培养、观察、分析、规律的总结达到了理论与实践的结合,使学生将所学过的各学科知识融会贯通,增强了知识体系的巩固。其中,也学会了不少仪器的使用,包括高压灭菌锅、超净工作台、培养箱等等一系列仪器的使用。增强了实践动手操作能力,培养了学生的科学素养,使其在今后的学习工作中获得了不少宝贵的经验。通过科学实践活动,学生们既可以对科学技术产生浓厚兴趣,10 / 30团队精神,保障身心健康发展,从而达到扩大视野、增长才干、培养志趣、陶冶情操的目的。实习指导老师:王晓娥二 0 一四年十二月十六日华南农业大学2016微生物学教学实习总结一、实习实验内容土壤微生物的分离、培养及识别1. 实验目的和内容目的:1)掌握从土壤中分离微生物的方法2)掌握常用的分离纯化微生物的操作技术11 / 30内容:1)用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌2)用平板划线方法分离微生物3)斜面接种及穿刺接种2. 实验原理从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化,方法有:单细胞挑取法、平板划线法和稀释倒平板法。本实验利用稀释倒平板从土壤中分离细菌、放线菌和霉菌。基本原理为:将含有各种微生物的土壤悬浮液进行稀释后涂布接种到各种选择培养基平板上,在不同条件下培养,从而使各种微生物在各自的培养基上形成单菌落。单菌落是一个细胞繁殖而成的集合体,即是一个纯培养。平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散为单个细胞,取一定量的稀释样液接种到不同选择性培养基的平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,进行平板菌落计数。12 / 303. 实验材料1) 培养基 已灭菌的牛肉膏、高氏一号、查氏培养基。2) 仪器及用具 99mL 无菌水 1 瓶,含 9mL 无菌水的试管 6支,80%乳酸,95%乙醇,无菌培养皿,1mL 无菌移液管,土壤样品、天平、称量纸、钥匙、试管架、涂布器。4. 操作步骤土壤稀释分离法分离纯化细菌、放线菌和霉菌1. 土壤样品采集待测地块上,若地块面积小于 50 平方米,对角线三点采样,若大于 50 平方米,对角线五点采样。 一般定点于耕作层0-20cm,先除去表土 1-2cm,以无菌铲采土足量充分混匀后用无菌塑料袋分装。2. 无菌操作制备土壤稀释液1) 制备土壤悬液:称取土样 1g,迅速倒入含有 99mL 无菌13 / 30水的三角瓶中,振荡 510min,使土样充分打散,即成 10-2 的土壤悬液。2) 稀释:用无菌移液管吸 10-2 的土壤悬液 1mL,吹入 9mL无菌水即成 10-3 稀释液,如此重复,可依次制成 10-310-8 的稀释液。注意:操作时管尖不能接触液面,每一个稀释度换用一支移液管,每次吸入土液后,要将移液管插入液面,吹吸 3 次,每次吸上的液面要高于前一次,以减少稀释中的误差。3. 涂布法测定菌落数的方法1) 涂布法:将菌悬液滴在平板表面中央位置,右手拿无菌涂布器平放于平板表面,将菌液先沿一条直线轻轻来回推动,使之均匀分布,然后改变方向沿另一垂直线来回推动,平板边缘可改变方向用涂布器再涂布几次。2) 接种量和培养基:细菌:取 10-6、10-7、10-8 两管稀释液各,分别接入两14 / 30个牛肉膏蛋白胨琼脂平板中,涂布均匀。放线菌:取 10-2、10-3、10-4 两管稀释液,在每管中加入 10%酚液 56 滴,摇匀,静置片刻,然后分别从两管中吸出加入高氏 1 号培养基平板中,涂布均匀。霉菌:取 10-2、10-3、10-4 两管稀释液各,分别接入查氏培养基中,涂布摇匀。4. 培养 将接种好的细菌、放线菌、霉菌平板倒置,即皿盖朝下放置,于 2830中恒温培养,细菌培养 12d,放线菌培养 57d,霉菌培养 35d。观察生长的菌落,用于进一步纯化分离或直接转接斜面。5. 划线分离细菌 用接种环从待纯化的菌落或待分离的斜面菌种只沾取少量菌样,在相应培养基平板中划线分离。划线的方法多样,目的是获得单个菌落。常用的划线方法有两种:连续划线和分区划线。6. 穿刺接种霉菌 用接种针将培养出的霉菌挑出,接种到新的查氏培养基上。5.注意事项15 / 301) 一般土壤中,细菌最多,放线菌及霉菌次之,而酵母菌主要见于果园及菜园土壤中。故从土壤中分离细菌时,要取较高的稀释度,否则菌落连成一片不能计数。2) 在土壤稀释分离操作中,每稀释 10 倍,最好更换一次移液管,使计数准确。3) 放线菌的培养时间较长,故制平板的培养基用量可适当增多。6.实验结果与分析本小组任务是用涂布法分离土壤中的真菌,选用的是查氏培养基,因细菌长势比真菌快,且培养基中未加链霉素、抗生素等抑制细菌生长的物质,因此本次实验用于分离的9 个培养皿全部长出了细菌,只有处理浓度为 10-4 土壤悬液中的一个皿中长出了少量真菌菌落。划线法分离细菌:其中一个皿划线重复,未达到划线稀释的目的,最后没有长出单菌落,另一个皿虽划线无重复,但是划线次数较少,也没有分离出单菌落。16 / 30霉菌分离:接种的地方有霉菌菌落长出,但其他地方也有霉菌菌落,分离结果不好。水的细菌学检查细菌总数的测定1目的要求通过实验掌握水样的采集和水样中细菌总数的测定方法。2. 实验原理1) 水中细菌总数的测定水中的细菌总数越多,说明水中有机物的含量就越高,水体被有机物污染的程度越重。 水中细菌的种属繁多,以一定的培养基平板上生长出来的菌落,计算出来的水中的细菌的总数实际上是一种近似值。绝大多数腐生性和致病性的细菌,可在肉膏蛋白胨培养基上进行生长。因此应用平板菌落计数技术来测定水样中的细菌总数基本上能代表水样中细菌的数量。17 / 302) 水中细菌总数的测定和计算在肉膏蛋白胨培养基上,1ml 水样,经 37,24h 培养后所生长出来的总菌数。我国饮用水的卫生学指标:在 1ml自来水中细菌总数不得超过 100 个。3. 实验器材培养基:肉膏蛋白胨琼脂培养基;灭菌水其他用具:灭菌三角瓶,灭菌培养皿,灭菌试管 等4. 操作步骤1) 水样的采集自来水:水龙头火焰灼烧 3min,再开放水龙头流水 5min 后,以灭菌三角瓶接取水样。 湖水:取距水面 10-15cm 的深层水样,最好立即实验,否则放入冰箱中保存。2) 细菌总数测定18 / 30自来水A、用灭菌管吸取 1ml 水样,注入灭菌培养皿中,做两个皿。B、分别倾入约 15ml 已溶化并冷却到 45左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基,在桌上作平面旋摇,使水样与培养基充分混匀。C、另取一空的灭菌培养皿,倾入约 15ml 肉膏蛋白胨琼脂培养基,作空白对照。D、培养基凝固后,倒置于 37中,培养 24h,进行菌落计数 。湖水A、稀释水样:a、取 4 个灭菌空试管,分别加入 9ml 灭菌水。b、取 1ml 水样注入第一管 9ml 灭菌水内、摇匀。19 / 30c、再自第一管取 1ml 至下一管灭菌水内,如此 稀释到第四管,稀释度分别为 10-1、10-2、10-3、10-4。B、自最后三个稀释度的试管中各取 1ml 稀释水加入空的灭菌培养皿中,每一稀释度做两个培养皿。C、各倾入约 15ml 已溶化并冷却到 45左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基,在桌上作平面旋摇,使水样与培养基充分混匀。D、培养基凝固后,倒置于 37中,培养 24h,进行菌落计数。3) 菌落计数1、自来水:两个平板的平均菌落数即为 1ml 水样的细菌总数。2、湖水:先计算相同稀释度的平均菌落数。若其中一个平板有较大20 / 30片状菌苔生长时,则不应采用,而应以无片状菌苔生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到平板的 1/2,而其余的一半菌落分布又很均匀时,则可将此一半的菌落数乘 2 以代表全平板的菌落数。首先选择平均菌落数在 30-300 之间的,当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的细菌总数。若有两个稀释度的平均菌落数均在 30-300 之间,则按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于 2,采取两者的平均值,若大于 2,则取其中较小的菌落总数。若所有稀释度的平均菌落数均大于 300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数。若所有稀释度的平均菌落数均小于 30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数。若所有稀释度的平均菌落数均不在 30-300 之间,则以最近300 或 30 的平均菌落数乘以稀释倍数。21 / 305. 实验结果自来水:对照平板菌落为:0。自来水样两平板的菌落数分别为:3、1。所以 1ml 水样的细菌总数为 2 个/ml。湖水数。湖水中的细菌总数为102 个/ml。6. 思考题1、从自来水水样细菌总数检测的结果判断是否符合饮用水的卫生标准?答:由于我国饮用水的卫生学指标为:在 1ml 自来水中细菌总数不得超过 100,而小组测定的自来水中细菌数为 2 个/ml。所以从自来水水样细菌总数检测的结果看,符合饮用水的卫生标准。2、你所测的池塘水、河水、湖水的污秽度如何?通过实验你对保护水资源有何认识? 答:我组所测的湖水污秽度较22 / 30高,可能存在误差。通过实验使我们明白只有保护水源,保证其清洁,才能保证我们人类自身的利益,无论是饮食方面,还是环境方面。3、试与其他同学的实验结果进行比较,从中判断你的实验结果误差如何?原因是什么? 答:与其他同学的实验结果相比较,我组自来水水样细菌总数与他组相差不大,但湖水细菌总数少一些,可能原因是用倾注法倒入培养基时,培养基未冷却至 45一下,所以高温杀死了大量细菌。4、请回答:干热灭菌、高压湿热灭菌、过滤除菌的原理及适用范围。答:1 干热灭菌:通过烧灼或烘烤等方法,使微生物酶、蛋白质变性而杀死微生物。干热灭菌包括:烘箱热空气法:适用于金属和玻璃器皿的灭菌,也是唯一可用于油料和粉料物质的灭菌方法。火焰焚烧法:常使用酒精灯火焰焚烧接种环、接种针和试管口等经焚烧不会损坏的物品。 2 高压湿热灭菌:热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强,水分子的存在有助于破坏23 / 30维持蛋白质三维结构的氢键和其他相互作用弱键,更易使蛋白质变形,还可以使细胞膜脂溶解。高压真气还可以破坏核酸结构,杀灭那些蛋白质外壳变性后仍具有侵染性的病毒。热蒸汽比空气穿透力强,能更加有效地杀灭微生物。蒸汽存在潜热,当气体转变为液体时可放出大量热量,顾可迅速提高灭菌物体的温度。水煮沸法:适用于注射器、解剖用具及家庭餐具的消毒。高压蒸汽锅法:主要用于各种耐热耐湿物品的物品,如一般培养基、生理盐水等各种溶液、工作服及实验器材等。3 过滤除菌:将液体通过某种多孔的材料,使微生物与液体分离。可用于对热敏感液体的灭菌,如含有酶或维生素的溶液、血清等。还可用于啤酒生产代替巴斯德消毒。二、实习学习参观益力多公司参观及珠江啤酒集团参观益力多乳制品制作流程及工艺24 / 30原料溶解罐杀菌机种菌罐培养罐糖浆罐调和液储存罐混合机成形机灌装机封盖机收缩包装机微生物与益力多乳制品制作乳制品生产过程中利用的微生物是乳酸菌。益力多乳制品主要与干酪乳杆菌代田株密切相关,它利用人们提供的底物原料,在适宜的条件下大量生长、繁殖,是一种益生菌。益力多乳制品提供的是一种活菌,而不是益力多菌的代谢产物,据说,在一瓶益力多饮品中就有 100 亿个活性细菌。益力多菌符合益生菌的 7 个条件,即:1.能够耐受胃液、胆汁、以存活的状态到达肠内;2.能够在肠内增殖;3.被科学实验证明能够改善肠内菌群;4.能够确保安全性;5.原来就是人体肠道菌群的一种;6.存活在食品中并能保持有效的菌数;7.价廉且容易处理。产品一般可以改善微生物与酶的平衡或刺激特异性与非特特异性免疫,从而改善肠道菌群构成。饮用益力多菌可抑制肠内有害菌的增殖,有害菌所产生的各种有害物质则相应减少。此外,益力多菌产生的乳酸及乙酸能刺激肠道运行而改善排便。有研究表明,益力多菌能25 / 30浙江大学优秀实习总结汇编微生物技术及应用岗位工作实习期总结转眼之间,两个月的实习期即将结束,回顾这两个月的实习工作,感触很深,收获颇丰。这两个月,在领导和同事们的悉心关怀和指导下,通过我自身的不懈努力,我学到了人生难得的工作经验和社会见识。我将从以下几个方面总结微生物技术及应用岗位工作实习这段时间自己体会和心得:一、努力学习,理论结合实践,不断提高自身工作能力。在微生物技术及应用岗位工作的实习过程中,我始终把学习作为获得新知识、掌握方法、提高能力、解决问题的一条重要途径和方法,切实做到用理论武装头脑、指导实践、推动工作。思想上积极进取,积极的把自己现有的知识用于社会实践中,在实践中也才能检验知识的有用性。在这两个月的实习工作中给我最大的感触就是:我们在学校学到了很多的理论知识,但很少用于社会实践中,这样理论26 / 30和实践就大大的脱节了,以至于在以后的学习和生活中找不到方向,无法学以致用。同时,在工作中不断的学习也是弥补自己的不足的有效方式。信息时代,瞬息万变,社会在变化,人也在变化,所以你一天不学习,你就会落伍。通过这两个月的实习,并结合微生物技术及应用岗位工作的实际情况,认真学习的微生物技术及应用岗位工作各项政策制度、管理制度和工作条例,使工作中的困难有了最有力地解决武器。通过这些工作条例的学习使我进一步加深了对各项工作的理解,可以求真务实的开展各项工作。二、围绕工作,突出重点,尽心尽力履行职责。在微生物技术及应用岗位工作中我都本着认真负责的态度去对待每项工作。虽然开始由于经验不足和认识不够,觉得在微生物技术及应用岗位工作中找不到事情做,不能得到锻炼的目的,但我迅速从自身出发寻找原因,和同事交流,认识到自己的不足,以至于迅速的转变自己的角色和工作定位。为使自己尽快熟悉工作,进入角色,我一方面抓紧时间查看相关资料,熟悉自己的工作职责,另一方面我虚心向领导、同事请教使自己对微生物技术及应用岗位工作的情况有了一27 / 30个比较系统、全面的认知和了解。根据微生物技术及应用岗位工作的实际情况,结合自身的优势,把握工作的重点和难点, 尽心尽力完成微生物技术及应用岗位工作的任务。两个月的实习工作,我经常得到了同事的好评和领导的赞许。三、转变角色,以极大的热情投入到工作中。从大学校门跨入到微生物技术及应用岗位工作岗位,一开始我难以适应角色的转变,不能发现问题,从而解决问题,认为没有多少事情可以做,我就有一点失望,开始的热情有点消退,完全找不到方向。但我还
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