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不同生姜提取物对雄性小鼠生殖毒性的研究,答 辩 人：沈雪指导老师：卢静 军需科技学院食品质量与安全系,研究内容,研究背景,研究目的,研究方法,试验结果,结 论,国外已有人用生姜甲醇提取物体外作用于人的精液，分析生姜对雄性生殖系统的影响，结果发现生姜对人的精液参数产生了毒性作用,研究目的,体外实验证实生姜对人的精液参数产生毒性作用，体外实验所获得的结果可能与人体或动物的整体试验结果存在一定的差异，把结果外推到人体体内实验可能有一些问题，因此有必要进行整体动物实验。初步探讨采用整体动物实验，生姜提取物对雄性生殖系统的影响，为生姜新产品的开发提供毒理学依据。,研究方法,小鼠生殖脏器系数测定,小鼠睾丸染色体畸变试验,小鼠精子畸形试验,试验方法,20g姜粉,生姜提取物,50水浴3h,生姜醇提物,生姜水提物,每次加200mL水,200mL乙醇,煮煎3次,过滤,浓缩,动物分组阴性对照组（NCG）环磷酰胺注射组（CP）生姜水提物灌胃组（AEG）生姜水提物灌胃和环磷酰胺注射组（AEG+CP）生姜醇提物灌胃组（EEG）生姜醇提物灌胃和环磷酰胺注射组（EEG+CP）,动物分组,动物处理方法,给予受试物前隔夜禁食16小时，不禁水。按照体重给予受试物，环磷酰胺0.1ml/10g体重腹腔注射，生姜提取物和生理盐水均以0.1ml/10g体重灌胃。连续处理五天,生殖脏器系数测定,计算公式：睾丸（附睾/精囊）脏器系数（%）= 100,小鼠睾丸染色体畸变试验,适用于检测环境有害物质对整体哺乳动物睾丸生殖细胞染色体的损伤，是目前常用的一种较好的检测外源性化合物生殖毒性的方法 。,小鼠睾丸染色体畸变试验,操作： 小鼠处死双侧睾丸 磷酸盐缓冲液（1mL）剪碎离心管定容离心10minKCl溶液恒温20min离心10min 固定液10min 离心10min 固定20min 混匀滴片染色,小鼠精子畸形试验,优点：敏感性高、简明、快速、终点明确精子收集：小鼠处死双侧附睾 磷酸盐缓冲生理盐水（1ml） 剪碎再加12ml稀释静止35分钟精子悬液制片：涂片干燥无水甲醇固定（5分钟）染色（2%伊红10 20分） 洗片观察,试验结果,显微镜下观察睾丸染色体,显微镜下观察精子,生殖脏器系数的测定,* 表示与cp组比较P0.05,小鼠睾丸染色体畸变试验,* 表示与cp组
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