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文档简介

从人脐血单核细胞高效诱导产生多能干细胞(iPSc),干细胞(stem cells)是在生命的生长发育中起“主干”作用的原始细胞,它的神奇之处就是这些原始细胞具有自我更新、无限增殖扩容及多向分化的潜能。,干细胞的分类,按来源分类,按分化潜能分类,受精卵,胚胎肝细胞,诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPS cells)是指将体细胞进行重编程,转化为具有胚胎干细胞特性和功能的多能干细胞。,4孔板中的iPS细胞,豚鼠胎儿iPS细胞,40显微镜视野下iPS细胞,A,B,诱导,脐带血单核细胞(UCBMCs)来源的iPS细胞的特点:容易获得,避免了使用人胚胎干细胞 涉及到的伦理问题;原代培养周期较短,只需1-2天; UCBMCs具有低免疫原性,HLA配 型不 严格。,人脐带血单核细胞诱导成iPSCs的过程,人脐带血单核细胞诱导的iPSC形态,比例,200um。人脐带血单核细胞诱导的iPSC表达碱性磷酸酶,饲养层细胞被作为阴性对照,比例200 um。,C. 人脐带血单核细胞诱导的iPSC的细胞核型。D. 在人脐带血单核细胞诱导的iPSC系中mRNA 的表达检测通过 RT-PCR。人脐带血单核细胞诱导的iPSC表达Pou5f1 (Oct4), Sox2, Nanog, Klf4, Rex1, Lin28a and Lin28b。水作为阴性对照, H9 为阳性对照。,在人脐带血单核细胞诱导的iPSC细胞系中表达多能性标志物 Oct4, Sox2, NANOG, SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60 and TRA-1-81 . SSEA: 特异胚胎抗原,比例: 100um。,E. 人脐带血单核细胞诱导的iPSC的免疫荧光结果。,A.来源于0627-10号人脐带血 单核细胞诱导的IPSCs第8 天形成的拟胚体。B. 来源于0627-10号人脐带 血单核细胞诱导的IPSCs第 8天拟胚体三胚层标志物的 蛋白检测, 外胚层(Gad1 and Pax6),中胚层(Enolase and Osteonectin),内胚层 (Nicastrin and Alpha- fetoprotein. )。C.来源于0627-10号人脐带血 单核细胞诱导的IPSCs诱导 形成的畸胎瘤。,苏木精和伊红染色的畸胎瘤包括三胚层组织,上皮细胞(外胚层),软骨细胞(中胚层),脂肪细胞(中胚层),肌肉细胞(中胚层),肠细胞(内胚层),腺细胞(内胚层)。,iPS细胞的应用前景,iPS细胞面临的一些问题,重编程效率低诱导效率远不足1%。iPS的安全

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