缺氧实验最终报告

1 昆明医科大学机能学实验报告 实验日期 实验日期 2015 年年 9 月月 17 日日 带教教师 带教教师 小组成员 小组成员 专业班级 临床医学二大班专业班级 临床医学二大班 缺氧实验缺氧实验 一 实验目的一 实验目的 1 复制不同病因导致小鼠缺氧的模型 了解乏氧性 血液性 组织中毒性缺氧的分类 2 观察缺氧对呼吸系统 中枢神系统的影响 以及血液颜色变化 3 了解影响缺氧耐受性的因素 二 实验原理二 实验原理 分别复制三型缺氧模型 观察缺氧对机体的影响 三 实验仪器设备实验仪器设备 小鼠缺氧瓶 100ml 125ml 带塞广口瓶 一氧化碳发生装置广口瓶 恒温水浴箱 5ml 或 2ml 刻度吸管 1ml 注射器 酒精灯 剪刀 镊子 钠石灰 甲酸 浓硫酸 5 硝酸钠 0 1 氰化钾 生理盐水 四 实验方法与步骤四 实验方法与步骤 取小鼠四只 标记编号 甲 乙 丙 丁 分别称重记录 甲 NS 0 1ml 10g 腹腔注射 乙 0 25 水合氯醛 0 1ml 10g 放进缺氧装置中 丙 1 咖啡因 0 1ml 10g 等待 10min 每 2min 记录呼吸频率 死亡 记录时间及耗氧量 甲鼠尸体待留 计算耗氧 量 观察皮肤颜色 活动度 丁 放入缺氧装置 40 水浴锅放入装小鼠缺氧瓶 记录死亡时间 活动状态以及耗氧量 一氧化碳中毒性缺氧 小鼠一只 检查装置气密性 连接一氧化碳发生装置 将一只小鼠放入广口瓶 然后与一氧化碳发生装置连接 先取甲酸 1 5ml 放入试管内 再 加入浓硫酸 1ml 连接 加热试管 用酒精的间断加热 加速 CO 产生 不可使液体沸腾 观察记录一般状况 观察记录如下 死亡 记录时间 计算小鼠耗氧率 R 3 亚硝酸中毒缺氧 小鼠一只 批阅人批阅人 成绩成绩 2 观察记录一般状况 小鼠 腹腔注射 5 亚硝酸钠 0 3ml 观察记录如下 死亡 记录时间 计算小鼠耗氧 率 R 4 取出甲鼠及 2 3 实验小鼠尸体部分肝叶进行对比 记录颜色 五 实验结果五 实验结果 表 1 各型缺氧对机体的影响 呼吸频率 次 10 秒 组 别 0 1 3 5 7 9 存活时间 分 中枢神经 系统变化 肝脏 血液颜 色 皮肤粘膜 颜色 乏氧性缺氧乏氧性缺氧 NS 组 组 10 19 25 29 30 逐渐减慢 10 75 正常 兴 奋 抑制 死亡 暗 红 紫绀 一氧化碳中毒一氧化碳中毒 20 14 15 20 15 逐渐减慢 12 极兴奋 兴奋 抑 制 嗜睡 死亡 樱 桃 红 粉红 亚硝酸钠中毒亚硝酸钠中毒 16 25 30 34 30 28 13 逐渐减慢 13 33 正常 兴 奋 抑制 狂躁 抽 搐 死亡 巧 克 力 色 紫绀 0 20 40 60 80 氰化物中毒氰化物中毒 玫 瑰 红 粉红玫瑰红 表 2 影响机体缺氧耐受性的因素 乏氧性缺氧 呼吸频率 次 10 秒 分组0 1 3 5 7 9 存活时 间 分 中枢神经系统 变化 耗氧率 ml g min 耗氧量 A 体重 W 高温高温 4 08 正常 兴奋 抑制 死亡 0 016 3 3ml51 7g 生理生理 盐水盐水 10 19 25 26 29 30 10 75 镇静 兴奋 躁动 淡漠 死亡 0 015 7 6ml46 1g 咖啡咖啡 因因 19 18 23 5 12 极兴奋 抑制 淡 漠 嗜睡 躁动 死亡 0 012 3ml49 5g 水合水合 氯醛氯醛 10 22 27 30 31 33 27 逐渐减慢 14 2 镇静 兴奋 躁动 淡漠 死亡 0 017 11 9ml49 3g 3 六 分析与讨论六 分析与讨论 1 各种模型所致缺氧的发生机制 1 乏氧性缺氧 低张性缺氧 以动脉血氧分压降低 血氧含量减少为基本特征的缺氧 原因有 吸入气氧分压过低 外呼吸功能障碍 氧分压 PaO2 和动脉血氧含量 动脉血氧饱和度 静脉血分流入动脉 血氧容量正常或增高 动 静脉血氧含量差降低或正常 机体缺氧 2 血液性缺氧 等张性缺氧 由于血红蛋白含量减少 或血红蛋白性质改变 使血液 携氧能力降低或与血红蛋白结合的氧不易释出引起的缺氧 原因有 血红蛋白含量减少 各种原因引起的严重贫血 CO 中毒 CO 血红蛋白 HbCO 亲和力极高 增加其余三个血红素 对氧的亲和力 释氧能力 缺氧 NaNO2 中毒 血红蛋白性质改变 Fe2 氧化 Fe3 形成 HbFe3 OH 高铁血红蛋白血症 3 组织性缺氧 指由于组织 细胞利用氧障碍所引起的缺氧 氰化物中毒时 氰化物进入 机体后分解出具有毒性的氰离子 抑制细胞内酶的活性 使呼吸链酶活力降低 同时氰离 子能与氧化型细胞色素氧化酶中的三价铁结合 阻止其还原成二价铁 使传递电子的氧化 过程中段 导致细胞不能利用血液中的氧而造成内窒息 导致组织细胞用氧障碍 药物对线粒体氧化磷酸化的抑制 线粒体功能和结构损伤 组织对氧的利用减少 静脉血氧分压 血氧含量 呼吸酶合成减少 和血氧饱和度高于正常 细胞用氧障碍 缺氧 2 各种缺氧对呼吸 中枢神经系统有何影响 血液颜色有无不同 为什么 各种缺氧对呼吸 中枢神经系统有何影响 血液颜色有无不同 为什么 1 呼吸系统 代偿性反应 以低张性缺氧时呼吸系统的变化最明显 PaO2 60mmHg 作用 颈动脉体和主动脉体化学感受器 呼吸中枢兴奋 PaO2 呼吸加深加快肺泡通气量 肺通气量增加是对急性低张性缺氧的最重要代偿反应 损伤性反应 A 高原肺水肿 缺氧引起外周血管收缩 肺毛细血管内压增高 回心血量增加和 肺血量增多 加上缺氧性肺血管收缩反应使肺血流阻力增加 导致肺动脉高压 肺动脉收 缩不均一 非炎性漏出 肺毛细血管壁通透性增加 肺水肿 氧弥散障碍 PaO2 B 中枢性呼吸衰竭 PaO2 30mmHg 抑制呼吸中枢 肺通气量减少 4 在本次低张性缺氧试验中 小鼠先是由于代偿机制的存在 呼吸频率保持正常 过了一 段时间后 躁动不安 呼吸加快 又过了一段时间 呼吸急促 最终死亡 小鼠在密闭瓶 中随着呼吸的进行 瓶中氧分压降低 所以鼠体内血氧含量降低 引起代偿性反应 刺激 颈动脉体和主动脉体的外周化学感受器 冲动经窦神经和迷走神经传入延髓 反射性引起 呼吸加快 增加肺泡通气量和肺泡气氧分压 随着实验进行 瓶中氧分压降低 二氧化碳 分压升高 缺氧对呼吸中枢的直接抑制作用大于氧分压降低对外周化学感受器的兴奋作用 发生中枢性呼吸衰竭 小鼠死亡 一氧化碳中毒性缺氧实验中 小鼠呼吸先加快后又减慢 最后休克直至死亡 一氧化碳 与血红蛋白的亲和力是氧的 210 倍 而碳氧血红蛋白难以解离 使 Hb 失去携氧的能力 而且 HbCO 的存在还抑制氧合血红蛋白的解离 阻碍氧的释放和传递 造成机体急性缺氧 血症 因此 轻度一氧化碳中毒时小鼠代偿性呼吸加深加快以增大呼吸面积 提高氧的弥 散 胸廓运动幅度增大 胸内负压增高 有利于氧的摄取和运输 随着实验进行 高浓度 的 CO 与细胞色素氧化酶中的二价铁结合 直接抑制细胞内呼吸 引起脑缺血 使小鼠休 克 最后死亡 亚硝酸钠中毒性试验中 Hb 中的二价铁在氧化剂的作用下氧化成三价铁形成高价铁血 红蛋白症 一方面血红蛋白丧失携带氧的能力 另一方面提高剩余的二价铁与氧的亲和力 使氧离曲线左移 氧不易释放 造成缺氧 轻度中毒时 小鼠出现代偿性反应 呼吸加快 随着实验的进行 小鼠发生严重缺氧 呼吸变慢 口唇青紫 昏迷 最后死亡 氰化物中毒性缺氧实验中 氰化物进入机体后分解出具有毒性的氰离子 抑制细胞内酶 的活性 使呼吸链酶活力降低 同时氰离子能与氧化型细胞色素氧化酶中的三价铁结合 阻止其还原成二价铁 使传递电子的氧化过程中段 导致细胞不能利用血液中的氧而造成 内窒息 中枢神经系统对缺氧最敏感 故大脑首先受损 导致中枢性呼吸衰竭而死亡 2 中枢神经系统 缺氧 中枢兴奋 中枢抑制 烦躁 激动 判断力下降 疲劳 嗜睡 昏迷 急性缺氧 慢性缺氧 严重缺氧 PaO2 28mmHg 可以产生严重程度不同的 CNS 功能障碍 血液颜色有不同 因为形成的血红蛋白不同 A 低张性缺氧 暗红 脱氧血红蛋白 低张性缺氧时进入血液的氧减少 动脉血氧分压降低 血液中与血红蛋白结合的氧 量减少 血氧含量减少 动静脉的脱氧血红蛋白浓度增高 当毛细血管血液中脱氧血红蛋 白浓度达到或超过某一数值时 皮肤和粘膜呈青紫色 即发绀 B 一氧化碳中毒 樱桃红 碳氧血红蛋白 一氧化碳与血红蛋白结合形成碳氧血红蛋白 且 co 比 o2 更易与 Hb 结合 当 co 与 Hb 分子中的某个血红素结合后 将增加其余三个血红素对氧的亲和力 使 Hb 结合的氧 不易释放 同时 co 还可抑制红细胞内糖酵解使 2 3 DPG 生成减少 进一步加重组织缺氧 HbCO 增多 所以小鼠肝脏血皮肤粘膜呈樱桃红色 C 亚硝酸钠中毒 咖啡色 羟化高铁血红蛋白 亚硝酸钠吸收入血 使大量的血红蛋白氧化为高铁血红蛋白 高铁血红蛋白中的 三价铁与羟基结合牢固 失去结合氧的能力 而且当血红蛋白分子中的四个亚铁离子中有 一部分被氧化成三价铁后 剩余的二价铁虽能结合氧 但不易解离 使氧离曲线左移 使 组织缺氧 因生成高铁血红蛋白所以小鼠肝脏血皮肤粘膜呈咖啡色 D 氰化物中毒 玫瑰红 氧合血红蛋白 组织性缺氧时 因组织 细胞利用氧的能力减弱而引起缺氧 氰化物中毒时 5 CN 与细胞色素 aa3 铁原子中的配位键结合 形成氰化高铁 cyt aa3 是细胞色素氧化酶不 能还原 失去传递电子的功能 呼吸链中断 生物氧化受阻 导致细胞用氧障碍 由于组 织对氧的利用减少 静脉血氧分压 血氧含量和血氧饱和度都高于正常 使毛细血管中氧 合血红蛋白较正常时多 使小鼠肝脏血皮肤粘膜呈玫瑰红色 3 讨论影响缺氧耐受性的因素有哪些 为什么 讨论影响缺氧耐受性的因素有哪些 为什么 1 环境温度 当环境温度升高时 机体内的酶活性增加 促进机体代谢 机体耗氧量 随之增加 耗氧量高 耐受性低 在乏氧性缺氧试验中 丁小鼠放置在缺氧瓶内 并且置 于 40 的水浴锅中 属于高温环境 此只小鼠是此组试验中存活时间最短的 高温增加了 机体酶活性 代谢增快 呼吸频率增加 缺氧耐受性减低 2 机体的机能状态 机体的机能状态不同 机体的代偿能力就不同 所以机体可以通过 呼吸 循环和血液系统的代偿反应增加组织的供氧 代偿反应存在着个体差异 所以每个 小鼠对缺氧的耐受性也不一定相同 3 咖啡因和水合氯醛 咖啡因具有提高中枢神经系统功能活动的作用 可兴奋呼吸中 枢 使呼吸加深加快 机体代谢率增加 组织耗氧量增加 降低机体对缺氧的耐受 水合 氯醛有中枢抑制作用 小鼠腹腔注射水合氯醛后 中枢活动功能受到抑制 小鼠处于安静 状态 能量需求减少 组织耗氧量减少 缺氧耐受增强 7 结论结论 1 当环境温度升高时 机体内的酶活性增