TOSOH-HLC-723G7型全自动糖化血红蛋白分析仪标准操作规程

1 TOSOHTOSOH HLC 723G7HLC 723G7 型全自动糖化血红蛋白分析仪型全自动糖化血红蛋白分析仪 标准操作规程标准操作规程 1 1 检验原理检验原理 基于高效液相色谱分析法原理 通过阳离子交换柱利用电位差将血红蛋白组分分离 利用 3 种不同浓度洗脱液使包括血红蛋白 Ac1 在内的多种血红蛋白进行梯度分离 分离成 6 个 部分 经检测器检测分离后的各血红蛋白组分的吸光度 以百分率形式表示出各血红蛋白 的组分结果与色谱图 传送打印 2 2 标本标本 2 12 1 标本的准备 2 1 12 1 1 标本的采集和抗凝 2 1 1 12 1 1 1 全血模式 抽取静脉血 用 EDTA 抗凝 当用同一个试管进行 HbA1c 检测和葡萄 糖等检测时 需用 EDTA 和 NaF 抗凝 全血置 4 可以存放一周 2 1 1 22 1 1 2 稀释血模式 采集静脉血或末梢血 用去离子水或溶血素 清洗液进行稀释 稀释 血需立刻检测 2 22 2 标本的容器 2 2 12 2 1 HLC 723G7 分析仪上既可使用原始样本管 也可以使用样品杯 在样本管架上的放 置顺序是随机的 2 2 22 2 2 最少样本量要求 原始样本管中全血为 1ml 样品杯中全血为 50 l 样本杯中的 稀释血为稀释后 400 l 建议患者样本的稀释比例以 1 150 为佳 2 2 32 2 3 原始样本管和样品杯的放置 2 2 3 12 2 3 1 原始管 分析仪可以从不同尺寸的原始采血管中通过盖帽穿刺的方式直接吸取样 本 尺寸为 15 75mm 和 15 100mm 的试管可以直接放置在试管架上 尺寸为 12 14mm 的原始管在使用适配器后也可放置 在一个标准附件中附带有 13 的适配 器 12 和 14mm 的试管适配器编号请见 消耗品 2 2 3 22 2 3 2 样品杯 如果只有少量样品或红血球压积较低时 需要进行预稀释处理 将稀释 后的样本颜色与稀释后的质控品或校准品的颜色作比照可以控制稀释处理的尺度 全血 50 L 稀释液 400 L 1ml全血 2 3 3 仪器与试剂仪器与试剂 3 13 1 TOSOH HLC 723G7 型全自动糖化血红蛋白分析仪 3 23 2 消耗品的种类 规格和储存条件 消耗品名称规格储存要求 TSKgel G7 HSi 1 个 盒4 15 保存 G7 洗脱缓冲液 No 1 S 800ml 包4 25 保存 开封后 3 月内用完 G7 洗脱缓冲液 No 2 S 800ml 包4 25 保存 开封后 3 月内用完 G7 洗脱缓冲液 No 3 S 800ml 包4 25 保存 开封后 3 月内用完 溶血素 清洗液 L 2000ml 瓶4 25 保存 开封后 3 月内用完 HbA1c 校准品 定值 1 2 4ml 5 盒2 8 保存 开封后 1 周内用完 HbA1c 质控品 低值 高值 0 5ml 4 盒2 8 保存 开封后 1 周内用完 过滤器5 片 包常温干燥 打印纸 40m 60mm 3 33 3 层析柱的准备和更换 3 3 13 3 1 在下述情况下需要置换层析柱 3 3 1 13 3 1 1 当层析柱计数达到 1500 个检测 3 3 1 23 3 1 2 当超过初始压力 2MPa 经更换过滤膜得不到改善时 3 3 1 33 3 1 3 当色谱峰 特别是 SA1c 峰 阴影指示 变得平坦或分解 2 部分时 3 3 23 3 2 步骤 3 3 2 13 3 2 1 等待检测结束 STAND BY 显现 或按 STOP 键使检测仪恢复到 STAND BY 状态 3 3 2 23 3 2 2 打开显示屏下的门 移开插销 打开层析柱炉 3 3 2 33 3 2 3 取走旧层析柱 3 3 2 43 3 2 4 确认主屏 第二屏 上 SV1 键已打开 O 3 3 2 53 3 2 5 将实验室用抹布放在层析柱导管的过滤膜侧 右边 3 3 2 63 3 2 6 按 PUMP 键启动泵 3 3 2 73 3 2 7 去掉层析柱上防护塞 保存好以备后用 如长时间储存 3 3 2 83 3 2 8 先将新层析柱与泵侧 入口 相连 留意标签上的箭图表示的液流方向 指示缓 冲液从右到左流入层析柱 当缓冲液从层析柱出口流出 按 PUMP 键使液流停止 3 3 3 2 93 3 2 9 将层析柱出口与检测器一侧 左边 相连 按 PUMP 键启动泵 3 3 2 103 3 2 10 确认泵压力在 6MPa 或以上 并且柱连接部无渗漏 3 3 2 113 3 2 11 将层析柱放置于铝盒区 关闭层析柱炉盖 锁上插销 3 3 2 123 3 2 12 按 PUMP 键停止泵运行 3 43 4 过滤器的准备和更换 3 4 13 4 1 在下述情况下需要置换过滤器 3 4 1 13 4 1 1 当过滤器计数达到 400 个注入 3 4 1 23 4 1 2 当使用该过滤器是 泵压力超过初始压力 2MPa 时 3 4 23 4 2 步骤 3 4 2 13 4 2 1 等待检测结束 STAND BY 显现 或按 STOP 键使检测仪恢复到 STAND BY 状态 3 4 2 23 4 2 2 打开显示屏下的门 3 4 2 33 4 2 3 确认主屏 第二屏 上 SV1 键已打开 O 3 4 2 43 4 2 4 取走过滤器出口 上部 导管 3 4 2 53 4 2 5 逆时针方向旋转使过滤器固定装置松开 直接拔出方式来移动过滤器固定物 3 4 2 63 4 2 6 轻压固定器顶端取出旧过滤元件 小心的将新元件安放在过滤器表面 灰色面朝 出口 朝上 3 4 2 73 4 2 7 用手拧紧过滤器固定装置上部 直到拧不动为止 3 4 2 83 4 2 8 将实验室用抹布放在过滤器固定装置的出口并按 PUMP 键以驱除元件内大气泡 核实无气泡从出口侧出来 按 PUMP 键停止泵运行 3 4 2 93 4 2 9 连接出口侧导管 3 4 2 103 4 2 10 再次按 PUMP 键启动洗脱液运送 确认泵压力在 6MPa 或以上 并且过滤室或导管 连接部无渗漏 如发现渗漏 用力拧紧过滤器固定装置 3 53 5 试剂的准备和更换 3 5 13 5 1 当试剂剩余不多时 请尽早更换缓冲液 溶血素 清洗液 剩余缓冲液的体积在主 屏 第二屏幕 通过图例显示 在主屏 第一屏幕 上触压下行键即可进入第二主屏 3 5 23 5 2 步骤 3 5 2 13 5 2 1 等待检测结束 STAND BY 显现 或按 STOP 键使检测仪恢复到 STAND BY 状态 3 5 2 23 5 2 2 用新试剂替换缓冲液或溶血 清洗液 3 5 2 33 5 2 3 使试剂进样管插入包装箱的底部 3 5 2 43 5 2 4 当使用铝盒包装的缓冲液时 采用密封膜以保证瓶盖紧闭 3 5 2 53 5 2 5 当使用瓶装试剂时 须拧紧瓶盖 但不可用 paraffin 膜或其它密封物来完全密 封试剂瓶 完全密封试剂瓶将导致试剂吸取不畅 3 5 2 63 5 2 6 在维护屏幕按 REAGENT CHANGE 键 3 5 2 73 5 2 7 相对应的试剂更换键 D W 变亮 如 当缓冲液 No 1 和 No 2 已更换 键 1 2 变亮 3 5 2 83 5 2 8 按 CHANGE 键 确认信息将出现 如果全好 按 OK 键 3 5 2 93 5 2 9 分析仪流路中的试剂将自动被新试剂替换 3 5 2 103 5 2 10 当 CHANGE 出现 操作既完成 确认试剂更换后图例回复到 100 3 5 2 113 5 2 11 再次开机时仪器自动进行缓冲液 No 1 No 2 灌注 并使流路中的缓冲液得以更 新 然后泵运行与检测开始 4 3 5 33 5 3 如果长时间停机 需要进行手动试剂灌注 步骤如下 3 5 3 13 5 3 1 等待检测结束 STAND BY 显现 或按 STOP 键使检测仪恢复到 STAND BY 状态 3 5 3 23 5 3 2 按维护 MAINTE 屏上的试剂更换键 REAGENT CHANGE 3 5 3 33 5 3 3 将进行试剂灌注的键变亮 3 5 3 43 5 3 4 按灌注 PRIME 键 确认信息将出现 如果全好 按 OK 键 3 5 3 53 5 3 5 分析仪流路中的试剂将自动被更新 3 5 3 63 5 3 6 当 PRIMING 出现 操作既完成 3 63 6 打印纸的准备 3 6 13 6 1 拉开打印机盖 上盖 使其靠后 3 6 23 6 2 往下推动纸支持杆至最前面 使剩余纸卷拢 3 6 33 6 3 拉起纸卷 取出卷轴 3 6 43 6 4 将卷轴插入到新纸卷中 注意方向 3 6 53 6 5 将纸支持杆回复至最后面并将纸插入到打印机中 纸将自动传送 因为支持杆安装 有 2 档 确认回复至最后面档 3 6 63 6 6 核实纸是否有扭曲 如存在 推动纸支持杆至最前面 调整好纸张 使支持杆复原 4 4 校准校准 4 14 1 分析仪是用带有不同 HbA1c 值的 LEVEL 1 和 LEVEL 2 校准液来校准的 使用 TOSOH HbA1c Calibrator Set TOSOH HbA1c 全套校准品 来校准 这套校准品是遵循日本糖尿 病协会糖化血红蛋白标准程序基础上建立的二级标准品 不能使用其他的校准品 4 24 2 确定在下列情况下进行校准 当需要改变化验条件和相关条件时 可以按照需要不 断地进行校准 4 2 14 2 1 每星期一次 如果每天检测 100 个以内的样品 4 2 24 2 2 每天一次 如果在一台仪器上每天要检测 100 个以上的样品 4 2 34 2 3 如果质控结果超出了范围 4 2 44 2 4 在替换层析柱后 4 2 54 2 5 在分析仪维护后 4 34 3 每瓶校准品加 4ml 去离子水后静置 5 10 分钟 轻晃使之溶解 充份混匀并贴上稀释日 期的标签 4 冰箱密封贮藏 7 天之内有效 使用前不必再稀释 使用时 倒出 800ul 的 校准液 放入样本架 4 44 4 校准操作 4 4 14 4 1 按主屏幕中的 MENU 键进入第二屏 再按下 PARAMER 键进入参数设置界面 点击 CALIB 1 按右边数字界面输入 Calibrator 1 的校准值 左边 CALIB 1 值被修改 同样方法输入 CALIB 2 的值 按 EXIT 键退出 进入主屏幕 4 4 24 4 2 把 Level1 与 Level2 校准液放置在第一个样品架的 1 号和 2 号位置的样品杯中 4 4 34 4 3 按主屏幕上的 CALIB 校准 键 使之高亮 按下 START 键 校准即开始 4 54 5 校准完成后 仪器自动进入样品分析程序 校准出现错误时 仪器将停止进入样品分 析程序 并返回 需重新设置校准 5 5 操作步骤操作步骤 5 15 1 开机 5 5 1 15 1 1 将电源开关按向 接通电源后 打开了主电源 5 1 25 1 2 检查软盘驱动器中是否没有插其他软盘 除了数据储存盘外 不要插入其他软盘 5 1 35 1 3 按下显示屏右上方的POWER键 键上绿色的LED指示灯就会亮起 5 1 45 1 4 仪器会自动依次启动检查采样单元 泵清洗 灌注缓冲洗脱液 并进行取样管路和 稀释管路的首次冲洗 开始WARMING UP 预温 5 1 55 1 5 仪器预热完成 将进入STAND BY状态 可以进行样本分析了 5 25 2 常规检测 5 2 15 2 1 在打开电源键后 第一个出现的屏幕是主屏幕 第一屏幕 在显示屏最上方会 显示出 HbA1c STD ANALYSIS HbA1c 标准 分析 5 2 25 2 2 在分析进行时 主屏幕会一直保持显示信息 当前的操作状态会显示在显示屏的左 上方 且出现下列状态指示 WARMING UP 预温 STAND BY 待机 ANALYSIS 分析 WASH 冲洗 BUFF PRIME 缓冲液灌注 PUMP CLEAN 清洗泵 5 2 35 2 3 在预温状态下的标本检测 5 2 3 15 2 3 1 在进行 WARNING UP 升温 操作时 把样品放置在标本架上 金属终止标志放在 最后一个样本架的末端 然后放入进样轨道 并按下 START 开始 键 5 2 3 25 2 3 2 等待 WARNING UP 预温 结束 5 2 3 35 2 3 3 系统会自动进入 ANALYSIS 分析 状态 开始分析标本 5 2 45 2 4 在待机状态下的标本检测 5 2 4 15 2 4 1 在完成预温 分析或冲洗操作后 分析仪会进入待机状态 在这种状态下 泵会 停止运行 不再消耗试剂 5 2 4 25 2 4 2 在此状态下可以把样品放置在标本架上 金属终止标志放在最后一个样本架的末 端 然后放入进样轨道 按下 START 开始 键 系统会自动进入 ANALYSIS 分析 状态 开始分析标本 5 2 55 2 5 在分析状态下的标本检测 5 2 5 15 2 5 1 确定前批样本还没检测完毕 并将前批最后一个样本架末端的金属终止标志拔下 5 2 5 25 2 5 2 把增测的样品放置在标本架上 金属终止标志放在最后一个样本架的末端 然后 放入进样轨道 5 2 5 35 2 5 3 仪器会将增加的样本分析完毕 5 2 65 2 6 在冲洗状态下的标本检测 等待仪器冲洗完毕 进入待机状态 后开始检测样本 5 2 75 2 7 在缓冲液灌注状态下的标本检测 5 2 7 15 2 7 1 当首次打开电源时 分析器会自动吸取并输送 2 号和 1 号洗脱液各 5ml 以便用 新的洗脱液来替换管道中原有的 这个操作就叫 PRIME 不需替换 3 号洗脱液 这是因 为 3 号洗脱液的含盐浓度很高 对检测结果没有影响 5 2 7 25 2 7 2 另外 在 MAINTE REAGENT CHANGE 维护 试剂替换 屏幕中 当在进行灌注或 替换缓冲液时 显示屏上会显示 BUFF PRIME 灌注缓冲液 状态 6 5 2 7 35 2 7 3 等待仪器进入 WARMING UP 预温 或 STAND BY 待机 状态时 可以把样品放 置在标本架上 金属终止标志放在最后一个样本架的末端 然后放入进样轨道 按下 START 开始 键 系统会自动进入 ANALYSIS 分析 状态 开始分析标本 5 2 85 2 8 在清洗泵状态下的标本检测 5 2 8 15 2 8 1 为了除去泵活塞上的杂质或盐沉淀 在打开电源后 活塞密封装置的背面就会被 溶血 清洗液 5ml 自动冲洗 且冲洗完全 5 2 8 25 2 8 2 等待仪器进入 WARMING UP 预温 或 STAND BY 待机 状态时 可以把样品放 置在标本架上 金属终止标志放在最后一个样本架的末端 然后放入进样轨道 按下 START 开始 键 系统会自动进入 ANALYSIS 分析 状态 开始分析标本 5 35 3 急诊样品检测 STAT 5 3 15 3 1 如果在 ANALYSIS 分析 时需要一些急诊检测的样品 把样品放在试管槽中间的 STAT 放样处 但记住 STAT 样品在待机 冲洗 升温状态时是不能进行分析的 确定已经没有 STAT 样品处于分析状态后 才能打开 STAT 盖子 5 3 25 3 2 先拿走放样处原有的样品容器 然后放入需要检测的样品 5 3 35 3 3 在主屏幕上按下 STAT 键 5 3 45 3 4 出现 STAT 急诊样品检测 屏幕 5 3 55 3 5 按照需要记录一个样品 ID 号 5 3 65 3 6 选择容器的类型 如果分析的是全血 不需要按任何键 如果分析的是稀释后的样 品 则按下 CUP 键 此键在按下后会亮起 和稀释度 然后安全地关闭 STAT 预先样品检 测 放样处的盖子 5 3 75 3 7 按下 START 开始 键 5 3 85 3 8 当 STAT 急诊样品检测 屏幕的底部显示 SCHEDULED 时 表示登记完成 按下 EXIT 退出 键 当显示回到主屏幕时 STAT 键会亮起 5 3 95 3 9 在当前的检测结束后 就会马上进行 STAT 预先样品检测 的分析 5 3 105 3 10 在取样结束后 STAT 键会恢复到通常状态 即指示灯变暗 打开前盖 取走样 品 5 45 4 关机 5 4 15 4 1 分析结束 仪器自动进入WASH 冲洗 状态 完成冲洗后 仪器进入STAND BY 待 机 状态如果1小时内键区或触摸屏上没有任何指令输入 电源会自动关闭 5 4 25 4 2 待机时间可以通过PARAMETER 参数 界面中的OFF TIME 关机时间 来设定 5 4 35 4 3 一般情况不进行紧急关机操作 如果必须 在待机状态将主电源开关按向 O 一侧 6 6 质控质控 6 16 1 配合校准品使用质控品 TOSOH HbA1c Control His 来控制每天的测试结果 6 26 2 每瓶质控品加 0 5ml 去离子水后静置 30 分钟 轻晃使之溶解 充份混匀并贴上稀释日 期的标签 2 8 冰箱密封贮藏 7 天之内有效 6 36 3 分析时以 1 50 进行稀释 10ul 稀释液 500ul 去离子水 以样本模式进行检测 检 测结果在靶值范围内 表示仪器状态良好 可以进行检测 7 7 参考范围及临床意义参考范围及临床意义 7 7 17 1 HbA1C 是血糖监测的重要标准 测定 HbA1c 可以了解糖尿病人在 2 3 个月的血糖控制 情况 结果临床意义 4 6 正常值 6 控制偏低 患者容易出现低血糖 6 7 控制理想 7 8 可以接受 8 9 控制不好 9 控制很差 慢性并发症发生发展的危险因素 7 27 2 HbA1C 增高还出现在用含葡萄糖的透析液作血透的慢性肾衰病人 地中海贫血和白血 病病人 降低可能是溶血性及失血性贫血 慢性肾衰 慢性持续性低血糖症等 7 37 3 作为轻症 型 隐性 糖尿病的早期诊断指标 7 47 4 可以列为糖尿病的普查和健康检查的项目 7 57 5 对预防糖尿病孕妇的巨大胎儿 畸形胎 死胎 以及急 慢性并发症发生发展的监督 具有重要意义 7 67 6 对于病因尚未明确的昏迷或正在输注葡萄糖的抢救者 急查糖化血红蛋白具有鉴别诊 断的价值 8 8 干扰与潜在的变异干扰与潜在的变异 8 18 1 抗干扰能力 葡萄糖 1000mg dl 氰酸 50mg dl 乙醛 50mg dl 游离胆红素 180mg dl 结 合胆红素 200mg dl 乳糜 2860 浊度单位 阿司匹林 50mg dl 抗坏血酸 50mg dl 尿酸 50mg dl 时 检测无干扰 8 28 2 血液病患者尤其是溶血性贫血的患者 其红细胞寿命缩短 导致 GHb 形成的时间也相 对应缩短 由此测定的结果就会受到影响 所以当某些基础疾病存在继发性溶血现象 往 往使 GHb 测得值偏低 如肝硬化 脾肿大 糖尿病性肾病患者的 EPO 治疗以及极度贫血患 者的输血治疗后等 肾病患者体内过多的尿素生成 其代谢产物结合于 Hb 的 链及 链 N 端的氨基 形成氨基甲酰 Hb carbamyl Hb 主要分离出 HbA1a b HbA1c 及 HbAo 此时 测得的 GHb 偏高 HP