卫生学与微生物学培训

卫生学微生物学培训,什么是微生物？,微生物是广泛存在于自然界的一群体形微小（直径小于1mm）、结构简单、肉眼看不见，必须藉助光学或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的生物。,微生物具有以下特点：,1.体积小，面积大2.吸收多，转化快（2000倍体重/h）3.生长旺，繁殖快（20min分裂一次）4.易变异，适应强5.分布广，种类多（10万种以上）,微生物的种类,微生物按其结构、化学组成及生活习性等差异可分成三大类,真核细胞型,原核细胞型,非细胞型,如 酵母菌、霉菌等,如：细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌,如病毒,真核细胞型,细胞较大 细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体 ，胞质内有完整的细胞器 可自身进行新陈代谢、繁殖相关活动,真核微生物特点,真菌，单细胞-酵母，多细胞-霉菌,原生动物、藻类 属于此类型微生物。,真核单细胞,酵母菌,真核多细胞,青霉,黑曲霉,第二类：原核细胞型,细胞核分化程度低，仅有原始核质，没有核膜与核仁；细胞器不很完善。,细菌结构,真菌结构,这类微生物种类众多，有细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌等,细菌,细菌的特殊结构,1.鞭毛:鞭毛是某些细菌表面着生的一至数根由细胞内伸出的细 长、 波曲的丝状体，具有运动的功能。 2.菌毛:(又名纤毛）是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬，且数量较多（250-300根）的丝状体，与细菌吸附或性结合有关。 3.荚膜:是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质，它犹如穿在菌体表面的一件外套 4.芽孢:是某些细菌于生长后期，在细胞内形成的一个圆形、椭圆形或圆柱形的休眠体，能产生芽孢的多为杆菌,细菌的特殊结构,荚膜,荚膜的厚度因细菌的种类而不同。除掉荚膜对细菌的生活没有什么影响，但荚膜具有抗吞噬作用和抗干燥作用。这也就解释了为什么我们在消毒时需要用75%的酒精，就是因为这个浓度的酒精可以更好的透过荚膜实现杀菌作用。而高浓度乙醇等，能使菌体表面蛋白质迅速凝固，反而影响其继续渗透入，杀菌效力反低。,细菌的特殊结构,芽孢,芽孢,芽孢具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性，堪称生命世界之最，所以有些细菌在环境条件不利于生长繁殖时便会形成芽孢,例如在温度逐渐降低或营养缺乏时。杀灭芽胞最可靠的方法是高压蒸汽灭菌。,芽孢,细菌的分类,细菌按形状可分为：球菌（0.52m）杆菌（长15m，宽0.31m）螺形菌（大小与杆菌相似）,细菌的分类,革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌,外毒素,内毒素,内毒素,内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，叫做脂多糖。脂多糖对宿主是有毒性的。内毒素只有当细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来，所以叫做内毒素。又称之为“热原”。,内毒素大量进入血液就会引起发热反应“热原反应”。内毒素大量进入、集聚于血液中，超过机体各自卫系统的清除能力，则可导致不同程度的内毒素血症。对于易于引入内毒素的药品医疗器械等必须通过内毒素检测。内毒素的检测常用家兔热原法和鲎试验法。中国药典收录的细菌内毒素检查法包括2种方法：凝胶法和光度法，使用鲎试剂来定性或定量检测内毒素。,注意：,革兰氏阴性菌因有内毒素镶嵌在细胞表面，当菌体破裂时会将毒素释放出来，这一部分是可以通过0.22m的过滤器的，除去此类毒素的可靠方法为活性炭吸附,第三类：非细胞型,没有典型的细胞结构，亦无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长繁殖。体积微小，能通过除菌滤器。病毒属于此类型微生物,病毒,蛋白质外壳,DNA,病毒是最常见的致病微生物，人类传染病中大约75%是由病毒引起的,病毒,T4噬菌体 蝌蚪形病毒,病毒,流感冒病毒 丝状有被膜的病毒,病毒细胞内寄生生活,乙肝丙肝艾滋病梅毒,肝炎病毒,病毒性肝炎是危害人类健康的最严重的疾病之一。主要分为甲型、乙型、丙型、丁型。其中甲型肝炎病毒由消化道传播，引起急性肝炎，不转为慢性肝炎或慢性携带者。乙型与丙型肝炎病毒均由输血、血制品或注射器污染而传播，除急性肝炎外，可致慢性肝炎，并与肝硬化以及肝癌有关，故危害性极为严重。丁型肝炎病毒必须在乙型肝炎病毒等辅助下方能复制，故其传播途径与乙型肝炎病毒相同。,（甲型肝炎病毒图片）,1.甲型肝炎病毒（HAV）在体外抵抗力较强，在-20条件下保存数年，其传染性不变，能耐受5630分钟的温度及PH3的酸度。 甲型肝炎病毒引起甲型肝炎，这种肝炎的传染源主要是病人。其病毒通常由病人粪便排出体外，通过被污染的手、水、食物、食具等传染，严重时会引起甲型肝炎流行。如1988年1月，上海市出现了较大规模的流行性甲型肝炎，主要原因是人们食用了被甲肝病毒污染的毛蚶。,2.乙型肝炎病毒（HBV）HBV在体外抵抗力很强，紫外线照射，加热604小时及一般浓度的化学消毒剂(如苯酚，硫柳汞等)均不能使之灭活，在干燥或冰冻环境下能生存数月到数年，加热60持续10小时，煮沸(100)20分钟，高压蒸汽12210分钟或过氧乙酸(05%)7.5分钟以上则可以灭活。传播途径主要为：血液、血制品传播，母婴传播。，,3.丙型肝炎病毒（HCV）4.丁型肝炎病毒（HDV）,6.肝炎病毒常用的家庭消毒方法 肝炎病毒常用的家庭消毒方法有物理消毒法与药物消毒法两种。物理消毒法：1）高压蒸汽消毒法：通常采用98.066千帕压力与121-126C温度10-15分钟，可杀灭各型肝炎病毒；采用蒸笼蒸煮或家用高压锅，待冒气盖阀后20分钟，即可达到消毒效果2）煮沸消毒法：在100C的温度下煮1分钟，就能使乙、丙、丁、戊型及甲型肝炎病毒失去活力和传染性；煮沸15-20分钟以上，可将各型肝炎病毒杀灭。 本法适合于食具、护理用具及棉织品的消毒。至于塑料制品、合成纤维及皮毛制品则不适合。新洁尔灭、氯已定（洗必泰）不能肯定，度米芬、来苏、石炭酸、米醋、熏醋对乙型肝炎病毒无作用。此外，肝炎患者的剩饭剩莫须有最好也要煮沸消毒后再弃去。 3）阳光曝洒法：凡不能蒸煮的物品，则宜采用本法，一般曝晒6小时以上。4）焚烧法：患者污染并丢弃的杂物、一次性医护用品、垃圾（包括月经纸、手纸）等均应焚烧掉，以达彻底消毒之目的。,药物消毒法：1）厕所、马桶、垃圾可用3%的漂白粉或2%氯酸钠上清液喷酒消毒，便具应浸泡1小时；患者的呕吐物及排泄物应用1%-20%双量的漂白粉充分拌匀后入置2小时。2）房屋地面、门、窗、家具、玩具、运送工具等，可用0.2%-0.5%的过氧乙酸(过醋酸)喷雾或淋洗消毒；并按0.75-1克/立方米喷雾后密闭30分钟熏蒸。可作为居室和暴露物品表面及空气的消毒。3）患者家属及接触者的双手可用0.2%过氧乙酸液浸泡2分钟，或用肥皂、流水冲洗数遍。4）衣服、被褥、书籍、报纸、体验单、病历、人民币等均可用100毫升/立方米的甲醛密闭熏蒸12-24小时。 至于市售优安净（洗消净）、食具333、84肝炎洗消液等，都是含氯消毒剂，可按说明书使用。,(五)爱滋病毒,1981年，人类免疫缺陷病毒在美国首次发现。该病毒破坏人体的免疫能力，导致免疫系统的失去抵抗力，而导致各种疾病及癌症得以在人体内生存，发展到最后，导致艾滋病(获得性免疫缺陷综合征)。在世界范围内导致了近1200万人的死亡，超过3000万人受到感染。,1.传染源和传播途径 HIV感染者是传染源，曾从血液、精液、阴道分泌液、眼泪、乳汁等分离得HIV。 传播途径有：性传播：通过男性同性恋之间及异性间的性接触感染。血液传播：通过输血、血液制品或没有消毒好的注射器传播，静脉嗜毒者共用不经消毒的注射器和针头造成严重感染，据我国云南边境静脉嗜毒者感染率达60%。母婴传播：包括经胎盘、产道和哺乳方式传播。,2.潜伏期 HIV感染人体后，往往经历很长潜伏期才发病，表明HIV在感染机体中，以潜伏或低水平的慢性感染方式持续存在。当HIV潜伏细胞受到某些因素刺激，使潜伏的HIV激活大量增殖而致病，多数患者于1-3年内为死亡。 艾滋病病毒侵入人体后一部分人出些流感样或传染性单核细胞增多症样症状，一些人一直无症状，直接进入无症状期。艾滋病潜伏期的长短个体差异极大，这可能与入侵艾滋病病毒的类型强度、数量、感染途径以及感染者自身的免疫功能、健康状态、营养情况、年龄、生活和医疗条件、心理因素等有关。一般为6-10年，但是有大约5-15%的人在2-3年内就进展为艾滋病，另外还有5%的患者其免疫功能可以维持正常达12年以上,3.艾滋病病毒的消毒方法 艾滋病病毒在外界抵抗力较弱，比乙型肝炎病毒的抵抗力低得多。所以，使用对乙肝病毒的消毒和灭活方法完全可以对付艾滋病病毒。艾滋病病毒有不耐酸、较耐碱、对紫外线不敏感等特点，酒精对其具有较好的灭活作用。国际卫生组织推荐对艾滋病病毒灭活加热100持续20分钟，效果较理想。艾滋病病毒的消毒主要是针对被艾滋病病毒感染者和艾滋病病人的血液、体液污染的医疗用品、生活场所等。例如，辅料、纱布、衣物等。对艾滋病病毒的消毒可以根据消毒物品选择适当的物理方法或化学方法。需要重复使用的物品可用煮沸或高压蒸汽消毒。不宜煮沸的物品可用2%戊二醛、75%酒精等进行消毒。,微生物的大小比较,微生物的分布,微生物在自然界里分布非常广泛土壤：土壤具有保温性，土壤环境适合微生物的生长水环境：水中溶解和悬浮有机、无机物，流动水有氧渗入可供微生物生长环境空气：空气不是微生物生长繁殖的主要场所，但是空气中飘浮着许多微生物。,自然界中的主要微生物,真菌：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌（湿疹）细菌：肺炎球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌支原体：肺炎支原体衣原体：沙眼立克次体：斑疹伤寒螺旋体：梅毒病毒：甲、乙肝病毒，麻疹病毒，狂犬病毒，流感病毒。,自然界中的主要微生物细菌球菌杆菌弧菌压氧性细菌棒状杆菌分枝杆菌,葡萄球菌,大肠杆菌,螺旋菌,弧菌,自然界中的主要微生物支原体衣原体立克次体螺旋体真菌,放线菌,脚气真菌,酵母,衣原体,自然界中的主要微生物病毒呼吸道病毒、肠道病毒、肝炎病毒虫媒病毒、疱疹病毒、逆转录病毒,腺病毒,HIV病毒,常见污染微生物,1.葡萄球菌：可引起局部感染2.大肠杆菌：胆道及尿道感染3.绿脓杆菌：化脓性感染、中耳炎、肺炎4.枯草杆菌：结膜炎5.酵母菌：使糖分解，药液产生有机酸6.霉菌：使制剂霉坏、酸败变质,人体内外微生物的分布,1、皮肤：表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、八叠球菌属细菌、类白喉棒杆菌、金黄色葡萄球菌等2、口腔：唾液链球菌、溶血链球菌、乳酸杆菌、流感杆菌、类白喉棒杆菌等3、上呼吸道：包括喉、鼻道和鼻咽。甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等。4、下呼吸道：包括气管、支气管和肺 。健康人的下呼吸道是无菌的。 5、胃肠道：大肠埃希氏菌、产气杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌、粪链球菌、梭杆菌属、螺旋体属、乳杆菌属、梭菌属、拟杆菌属中的一些种6、泌尿生殖道：常见的有嗜酸乳杆菌、类白喉棒杆菌、葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌,人体内外微生物,人的头皮上有140万个/cm2，两手上约有440万个，1g指甲污垢有38亿个，1g粪便可达101000亿个。可以说微生物是无处不在，无处不有。,人是最大的污染源？,人是洁净室最大的污染源，占90%左右。一般男性每人每分钟向周围排放1000个以上的含菌粒子，女性为750个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量为10300个/min，一般活动时发菌量为1501000个/min，行走时发菌量为9002500个/min。咳嗽一次发菌量为70700个/min，喷嚏一次为400060000个/min。所以在洁净室中，人的数量和活动应有特别严格的限制。,如何阻断人体污染源,进入洁净室（区）的人员不得化妆和佩带饰物，不得裸手直接接触产品。无菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物。,更衣流程,一次更鞋：阻断外界粘在鞋底的垃圾、颗粒及微生物。相对而言，脚底是最脏的部分。脱去外套：阻断外界沉降在外套上的颗粒和微生物。一更洗手：规范的洗手能消除手部皮肤的污垢和大部分的微生物。洗手一定要用洗手液和充足的流水。二更带口罩：阻断鼻腔、呼吸道的微生物发散，洁净区内不能脱下口罩带发套：阻断头发、头皮表面的微生物发散。保证发套完整的包裹头发。穿连体服：阻断体表皮肤的微生物发散。洁净区内不能解开连体服手消毒：再次消除手部的细菌和微生物。75%的酒精能杀灭99%的微生物。二次更鞋：阻断一更、二更内沉降在地板上的颗粒和微生物。洁净区工作鞋不能穿出二更的鞋箱外。,平时的卫生习惯,勤洗澡、洗头，勤换内衣去除皮屑、头屑等人体脱落物，保持体表洁净。勤剪头发工作时，头皮不容易出汗，易被纸发套全部包裹。勤剪手指甲指甲内能够藏污纳垢，有很多的致病微生物。勤换鞋准备两双鞋每天交替穿着，保证鞋内干燥无异味。,Disinfection,杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物,杀灭物体上所有微生物的方法。,不存在活菌的意思。,防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。,消毒：,灭菌：,无菌：,防腐：,Asepsis,Sterilization,Antisepsis,消毒与灭菌的基本概念,热力灭菌法,常用灭菌方法,高温杀灭細菌,焚烧-最彻底的灭菌方法,烧灼-直接用火焰灭菌方法,干烤-加热160-180 2小时,干热灭菌法,湿热灭菌法,加压蒸汽灭菌法,最有效的灭菌方法121，20-30分钟,煮沸消毒法,水煮100 5分钟(繁殖体)-2小时(芽胞),流通蒸汽消毒法,巴氏消毒法,间歇蒸汽灭菌法,水蒸汽100，15-30分钟(繁殖体),反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌,较低的温度（61 30分钟）杀灭致病菌,湿热灭菌与干热灭菌的比较,同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好,1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固,2、湿热的穿透力比干热大,3、湿热的蒸汽有潜热,化学消毒灭菌法 利用化学试剂杀灭微生物的方法,常用消毒剂种类,常用消毒剂用量及用途,消毒剂使用注意,长期使用同一种消毒剂，往往会使细菌产生耐药性，达不到应有的效果所以，在实际生产使用中， 应定期更换不同的消毒剂。,辐射灭菌法,辐射有两种类型：一种是电磁波辐射，如紫外线、红外线、微波；一种是电离辐射，如可引起被照射物电离的X射线、射线。,辐射杀菌法,紫外线,杀菌机理：,波长200300m的紫外线具有杀菌作用,干扰DNA的复制与转录,紫外线穿透力较弱,不耐热物品的表面消毒,特 点：,应用范围：,空气消毒 手术室、传染病房、细菌实验室,杀菌机理：,应用范围：,电离辐射,包括高速电子、X射线和 射线,产生游离基,破坏DNA。,一次性医用塑料制品的消毒,食品的消毒不破坏其营养成分,经60Co辐射灭菌的物品温度升高很少，一般仅约5，故又称“冷灭菌”。羊膜灭菌,滤过除菌法,用物理阻留的方法 将液体或空气中的细菌除去,以达到除菌目的,滤菌器,含有微细小孔0.22微米,只允许液体或气体通过, 而大于孔径的细菌等颗粒不能通过,适用范围,血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌,60Co灭菌 放射性同位素60Co（或137Cs）衰变时可放射出射线，射线的能量高、穿透力强，可使细胞内各种活性物质发生化学变化，从而使细菌损伤或死亡。经60Co辐射灭菌的物品温度升高很少，一般仅约5，故又称“冷灭菌”。,谢 谢！,JUST DO IT！,1、体积小，面积大,微生物的个体极其微小，必须借助显微镜放大几倍、几百倍、上千倍，乃至数万倍才能看清。杆菌的宽度是0.5微米，因此80个杆菌“肩并肩”地排列成横队，也只有一根头发丝的宽度。杆菌的长度约2微米，故1500个杆菌头尾衔接起来仅有一颗芝麻长。 物体的表面积和体积之比称为比表面积。大肠杆菌的比表面积是人的30万倍。,2、吸收多，转化快,微生物的食谱非常广泛，凡是动植物能利用的营养，微生物都能利用，大量的动植物不能利用的物质，甚至剧毒的物质，微生物照样可以视为美味佳肴。如大肠杆菌在合适条件下，每小时可以消耗相当于自身重量2000倍的糖，而人体则需要40年之久。,