MM_FS_CNJ_0075 出口禽肉中癸氧喹酯酚残留量检验方法.DOC

MM_FS_CNJ_0075出口 禽肉 癸氧喹酯酚 残留量 荧光法 MM_FS_CNJ_0075 出口禽肉中癸氧喹酯酚残留量检验方法1.适用范围 本方法标准适用于出口鸡肉中癸氧喹酯残留量的检验。2.原理概要 试样在甲醇-三氯甲烷中匀浆，加入偏磷酸后，癸氧喹酯被提取到三氯甲烷中，在弗罗里硅土层析柱上与干扰物质分离，用氯化钙-甲醇溶液洗脱柱上的癸氧喹酯，荧光法测定。3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂 甲醇：分析纯，重蒸馏，收集6465馏分； 三氯甲烷：重蒸馏； 无水氯化钙； 偏磷酸； 甲醇-三氯甲烷(41)； 洗脱液：将10g无水氯化钙溶解于1L重蒸馏甲醇中，放置24h。取澄清液备用； 偏磷酸溶液：将50g偏磷酸溶解于1L水中。在5下冷藏，使用冷溶液； 弗罗里硅土：100200目，层析用。于130烘箱中活化5h，取出，放置干燥器中冷却备用； 癸氧喹酯标准品：纯度99%； 癸氧喹酯标准溶液：准确称取适量的癸氧喹酯标准品，用三氯甲烷配成浓度为200g/mL的标准储备溶液，根据需要再配成适当浓度的标准工作溶液。3.2.仪器 荧光分光光度计，配有10mm荧光比色皿； 组织捣碎机； 刻度试管：15mL，具塞； 高速匀浆器； 离心管：50mL，具塞； 分液漏斗：250mL； 层析柱：玻璃柱，200mm10mm(内径)。柱底部填少量玻璃棉。柱中加入5mL三氯甲烷，然后加0.40.01g弗罗里硅土。再加入2mL三氯甲烷并用细玻璃棒搅动，用三氯甲烷冲洗柱壁。临使用前制备。4.试样的抽取与制备4.1.检验批 以不超过2500件为一检验批。 同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。4.2.抽样数量批量，件最低抽样数，件1251261005101250102515001550110001710012500204.3.抽样方法 按规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件取500g(或一袋)作为原始样品，原始样品总量不得少于2kg。加封后，标明标记，及时送实验室。4.4.试样制备 将所取原始样品缩分出1kg，取可食部分，经组织捣碎机捣碎，均分成两份，装入洁净容器内，作为试样。密封，并标明标记。4.5.试样保存 将试样于18以下冷冻保存。注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5.过程简述5.1.提取 称取试样20g(精确到0.1g)于高速匀浆器中，加入801g甲醇-三氯甲烷(41)。匀浆1min后转入离心管中，在约2000r/min下离心5min。倾出并称取50g上清液(相当于10g样品)于250mL分液漏斗中。加入100mL偏磷酸溶液，将分液漏斗颠倒50次，静置分层10min，收集三氯甲烷层，保留水相。再加入10mL三氯甲烷于分液漏斗中，如前摇动和分层。合并两次三氯甲烷提取液，加入2mL甲醇，并用三氯甲烷稀释至25mL。5.2.净化 将25mL提取液加于层析柱中，用10mL甲醇洗层析柱，弃去流出液。用15mL洗脱液进行洗脱，收集15mL流出液，供测定。5.3.测定5.3.1.分光荧光条件激发波长：265nm；发射波长：390nm。5.3.2 标准曲线的绘制 在4个250mL的分液漏斗中，分别加入55mL(50g)甲醇-三氯甲烷(41)溶液，再分别加入0.0，0.1，0.3和0.5mL标准工作溶液(10g/mL)，其中分别含0，1，3和5g癸氧喹酯。从“加入100mL偏磷酸溶液”开始按测定步骤操作。用荧光强度与对应的癸氧喹酯(g/mL)绘制标准曲线。5.3.3.荧光分光测定 测定样液中癸氧喹酯的荧光强度。样液中癸氧喹酯含量应在仪器检测的线性范围内。由标准曲线查得样液中癸氧喹酯的浓度(g/mL)。5.4.空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。6.结果计算 按下式计算试样中癸氧喹酯残留含量：XcVm式中：X试样中癸氧喹酯残留量，mg/kg；c样液中癸氧喹酯的浓度，g/mL；V样液最终定容体积，mL；m最终样液所代表的试样量，g。注：计算结果需扣除空白值。7.低限、回收率的测定7.1.测定低限 本方法的