液相色谱仪日常维护和故障排除 PPT课件

液相色谱仪日常维护和故障排除 维护流程图 吸滤头 单向阀 柱塞密封圈 线路过滤器 手动进样器 检测器 日常维护 材料 不锈钢烧结 孔径10um故障 堵塞表现 管路中不断有气泡生成措施 用5 20 的稀硝酸 超声波清洗 再用蒸馏水清洗注意点 吸滤头拆下时不必将塑料管剪断 吸滤头 日常维护 日常维护 单向阀结构 球座 单向阀原理 单向阀 日常维护 故障1 宝石球粘附于垫片表现 泵无法吸液或排液 流路不通措施 1 用针筒抽出口单向阀以产生负压 使宝石球与垫片分开2 拆下单向阀 放入异丙醇或水中 用超声波清洗 单向阀 日常维护 故障2 宝石球或塑料垫片受污导致密封不好表现 系统压力波动大措施 拆下单向阀 放入异丙醇或水中 用超声波清洗 故障 密封圈磨损导致密封不良现象 系统压力波动大或漏夜措施 更换密封圈注意点 1 流动相输送量达120L时 应更换密封圈2 更换前 新密封圈用异丙醇浸泡15min3 拆卸泵头前 柱塞杆复位 P SET 柱塞密封圈 日常维护 故障 堵塞现象 系统压力波动大或压力偏高措施 5 稀硝酸 超声波清洗判断依据 关闭排液阀 断开出口管路 设定流速1mL min 如压力 3kgf cm2 则堵塞 线路过滤器 排液阀 压力传感器 线路过滤器 流动相 日常维护 操作注意点 1 插针应插到底2 不使用时将针头留在进样器内3 进样应使用液相色谱专用平头进样针4 清洗应使用专用针口清洗器 手动进样器 日常维护 色谱柱的维护 1 在使用新柱之前 最好用强溶剂在低流量下 0 2 0 3ml min 冲洗30min 长时间未用的分析柱也要同样处理2 定期使用强溶剂冲洗柱子3 使用缓冲盐时 要先用水冲洗 再用有机溶剂冲洗4 净化样品 过滤 5 不使用时 要盖上盖子 避免固定相干枯6 使用预柱7 避免流动相组成及极性的剧烈变化8 避免压力脉冲的剧烈变化 日常维护 故障 样品池受污表现 样品池和参比池能量相差较大 锯齿峰 检查方法 设定250nm波长 通甲醇或水 查看SMPLEN和REFEN 如两者相差较大 则样品池受污 措施 用针筒注入异丙醇 清洗样品池 如污染严重 拆开样品池 将透镜等放入异丙醇中超声波清洗 紫外检测器 日常维护 发现问题 定位问题 纠正问题 防止问题的再发生 故障排除 滤膜类型 聚四氟乙烯滤膜 适用于所有溶剂 酸和盐 醋酸纤维滤膜 不适用于有机溶剂 特别适用于水基溶剂 尼龙66滤膜 适用于绝大多数有机溶剂和水溶液 可以用于强酸 不适用于二甲基甲酰胺 再生纤维素滤膜 蛋白吸收低 同样适用于水溶性样品和有机溶剂 溶剂的过滤 故障特征 鬼峰 由已被污染的过滤头造成 保留时间不断改变 由于过滤头堵塞或部分堵塞 清洗步骤 1 水2 稀硝酸3 水4 异丙醇5 水 超声波清洗 流动相过滤头产生的问题 溶剂 噪音高或基线漂移 解决问题 可能原因柱子没有平衡好杂质组分从色谱柱中缓慢流出杂质在柱子中的富集检测器或色谱柱的温度差异系统有气泡检测器氘灯需更换电压不稳造成干扰 解决办法继续冲洗色谱柱至平衡利用强极性的溶剂冲洗色谱柱冲洗色谱柱 改进和提高样品的预处理 使用液相色谱纯的溶剂使用色谱柱恒温箱流动相脱气 使用反压调节器更换氘灯 氘灯使用寿命一般为1000小时 使用稳压电源 检查供电系统 出现 鬼峰 解决问题 可能原因上一针样品中没有完全流出的物质样品中未知的组分色谱柱被污染溶剂中有杂质流动相和溶解样品的溶剂不互溶三氟乙酸被氧化 解决办法待样品中的组分尽可能完全流出后才进下一个样品 每运行完一个样品后用强极性的溶剂冲洗色谱柱 改进样品的预处理 组分复杂的样品尽可能使用梯度解吸的方法改进样品的预处理每运行完一个样品后用强极性的溶剂冲洗色谱柱 改进样品的预处理使用色谱纯的溶剂尽可能用流动相溶解样品流动相尽量每天新配 使用三氟乙酸时 应使用抗氧剂 出现肩峰或前延峰 解决问题 可能原因预柱被污染或选用了不合适的预柱柱头 塌陷 造成死体积或是柱子内部有短流出现溶解样品的溶剂选择错误干扰物质的存在 样品中的杂质色谱柱过载 解决办法更换预柱更换色谱柱用流动相溶解样品 如果不可以 应将进样体积降至很低 如1微升 改进样品预处理 用测试的混合物检验色谱柱 使用色谱纯溶剂将样品稀释 峰形展宽 解决问题 解决办法更换色谱柱或预柱减少进样体积 稀释样品用流动相溶解样品使用浓度稍高的缓冲溶液或者换用其它的缓冲溶液检查是否有漏 使用小的检测池提高色谱柱温度使用内径较细的较短的毛细管连接 检查柱外死体积使用较小粒径填料的色谱柱 更换色谱柱 可能原因色谱柱或预柱被污染或不合适色谱柱 过载 或进样体积过大溶解样品的溶剂选用不当缓冲溶液的浓度太稀色谱柱和检测器之间有漏 检测器的检测池过大色谱柱温度太低 流动相的黏度太高连接用的毛细管太长 柱外死体积太大色谱柱柱效下降 出现脱尾峰 解决问题 解决办法减少样品体积 增大色谱柱内径 使用高容量的固定相改进样品预处理 调节流动相的组成 使用测试样品混合物检查色谱柱 使用色谱纯溶剂更换滤网 使用柱前过滤系统 将样品过滤更换色谱柱 使用性质较温和的分离条件 可能原因色谱柱过载干扰峰 杂质色谱柱的滤网堵塞色谱柱有 塌陷 短流或断流 出现双重峰或分叉峰 解决问题 可能原因样品体积过大 色谱柱过载溶解样品的溶剂选用不当色谱柱有 塌陷 短流或断流色谱柱滤网堵塞进样器没有彻底清洗 解决办法减少进样体积 稀释样品 将样品在流动相中溶解 如果不行 尽可能将进样体积降低 如1微升 更换色谱柱 使用较温和的分离条件更换色谱柱的滤网 使用柱前过滤装置 过滤样品彻底清洗进样器 更换进样器转子 保留时间变长 解决问题 可能原因流速降低键合相流失流动相的组成有变化温度降低 解决办法检查系统是否有漏 更换泵的密封圈 排净气泡 保持流动相pH值在2 0 8 0范围内检查泵 检查滤网 防止流动相的挥发或降解使用色谱柱恒温箱 保留时间缩短 解决问题 可能原因流速升高色谱柱过载键合相流失流动相组成发生变化温度升高色谱柱老化 解决办法检查泵 检查流速降低样品的浓度或进样体积流动相的pH值保持在2 0 8 0范围内检查泵 检查滤网 防止流动相的挥发或降解使用色谱柱恒温箱更换色谱柱 使用预柱 保留时间无规则改变 解决问题 可能原因流速发生变化色谱柱尚未平衡 缓冲溶液容量不够流动相组成发生变化 流动相中的溶剂互溶性差色谱柱温度发生变化杂质在色谱柱中 堆积 解决办法检查是否有漏 更换泵的密封 排净气泡至少用10倍柱体积的流动相平衡色谱柱 使用的缓冲溶液浓度应保持在20mM至50mM之间检查泵 检查