Waters操作系统

Waters 600E 2487600E 2487 高效液相色谱系统操作规程 1 目的 规范 Waters 高效液相色谱系统的使用和维护 2 范围 本规程适用于 Waters 高效液相色谱系统的使用和维护 3 职责 质检室仪器分析员负责 Waters 高效液相色谱系统的日常使用和维护 4 系统组成 本系统由 Waters 600E 多溶剂输送系统 有梯度控制器的高压输液泵 Waters 在线脱气机 Rheodyne 7725i 手动进样阀 Waters 2487 双通道紫外检测器 Millennium32 色谱工作站 电脑等组成 另外还包 括打印机 UPS 和通风柜等辅助设备 5 程序 5 1 准备 5 1 1 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相 应足够 流动相必须用 0 45 m 滤膜过滤 样品和标准溶液 也可在平衡系统时配制 更换合适的色谱柱 柱进出口位置应与流动相流向一致 和 定量环 5 1 2 通电前应检查仪器设备之间的电源线 数据线和输液管道是否连接正常 5 2 开机和泵操作 5 2 1 开机 5 2 1 1 接通 UPS 的电源 依次打开断电保护器 脱气机 600E 泵 2487 检测器 待检测器自检结束显 示测量状态时 打开打印机 电脑显示器 主机 5 2 1 2 打开 Millennium32 软件 按 Login 输入用户名和密码 按 OK 注册进入系统主界面 在 Project 档内选择所需的项目 右击 Run Samples 图标 选择色谱系统 600 2487 后打开 QuickSet 窗口 5 2 2 更换溶剂 5 2 2 1 打开 600E 泵后 转动进口集合管阀手柄 以下简称手柄 至 RUN 位置 5 2 2 2 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂 向右打开参照阀 断开柱和进样器 5 2 2 3 按 Direct 键使其显示直接控制屏幕 设流速为 1ml min 梯度配比阀在 0ml min 时不工作 5 2 2 4 选择欲使用的某一溶剂通道 设其比例为 100 其它为 0 5 2 2 5 将输液管从原有溶剂瓶中取出 放入一干净的空瓶中 5 2 2 6 逆时钟转动手柄至 DRAW 位置 用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约 2ml 溶剂 5 2 2 7 再将输液管放入新溶剂瓶内 继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止 5 2 2 8 转动手柄至 RUN 位置 将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂 5 2 2 9 重复 5 2 2 4 5 2 2 8 直至所有即将使用的溶剂更换完毕 5 2 3 排气泡 5 2 3 1 打开参照阀 换流动相为 100 超纯水 设流速为 10ml min 注意 确认参照阀是打开的 否则 可能损坏安装好的柱 5 2 3 2 转动进口集合管阀手柄至 DRAW 位置 用启动注射器抽出约 10ml 水 5 2 3 3 顺时钟转动手柄至 INJ 位置 缓慢用力使水通过泵头从参照阀出口管排出 注意不要将气泡注 入泵中 5 2 3 4 按 Stop flow 屏幕键停泵 关上参照阀 5 2 3 5 如按以上方法不能排尽气泡 从柱入口处拆下泵出口管 用塑料管连接至塑料烧杯中 设流速 为 10ml min 冲洗 2 5min 或更长时间 后停泵 重新接上柱 5 3 平衡系统 分两种情况进行 5 3 1 等度模式 5 3 1 1 每次以 0 1ml min 的增量加大流速至 1ml min 以超纯水冲洗系统 10min 5 3 1 2 检查管路连接 柱接口及泵头处是否漏液 如漏液应予以排除 5 3 1 3 观察泵控制屏幕上的压力值 压力波动应在平均值的 5 10 以内 如超出此范围 可初步判断 为柱前管路仍有气泡 重复 5 2 3 下的步骤 5 3 1 4 压力波动平稳后 换检验方法规定的流动相比例冲洗系统 在检查基线稳定性前 让最少 5 6 倍柱体积的流动相通过系统 5 3 1 5 在 QuickSet 窗口下的 Instrument Method 档内选择所需的仪器方法 按 Monitor 此后泵由 软件控制 观察基线和压力变化 如果冲洗至基线漂移 5 5 2 2 划入一段包含噪声的基线 按 Next 5 5 2 3 划入一段要积分的区间 按 Next 5 5 2 4 根据情况选择最小峰面积和最小峰高 按 Next Next 5 5 2 5 在 Name 档内输入各组分峰的名称 按 Next Next 5 5 2 6 在 Method Name 档内填写方法名称 按 Finish 退出 Review 窗口 5 5 3 修改标准 选中所有标准 右击后选 Alter Sample 进入 Alter Sample 窗口 5 5 3 1 在 Sample Type 档内将 Unknown 改成 Standard 5 5 3 2 按 Amount 图标 左上第六个 进入 Component Editor 窗口 5 5 3 3 按 Copy from Process Method 图标 左上第五个 选择刚建立的处理方法 按 Open 在 Value 和 Units 档内分别输入标准所含各组分的数值和单位 完成后按 OK 回到 Alter Sample 窗口 5 5 3 4 按 Save 图标存盘 退出 Alter Sample 窗口 5 5 4 积分 先选中所有标准 再选中所有未知样品 右击后选 Process 进入 Background Processing Reporting 窗口 选 Use specified processing methods 在右边档内选择刚建立的处理 方法 按 OK 5 5 5 打印 在 Project 窗口下选 Results 标签 5 5 5 1 选中要打印的标准 样品 右击后选 Preview 进入 Open Report Method 窗口 选合适的打印 方法 按 OK 进入 Report Publisher Preview 窗口 预览打印的结果 按打印 Print 图标 左上第 二个 即可打印结果 5 5 5 2 按 Close 可进入 Report Publisher 窗口对报告方法进行修改 完成后按 Print 图标 右 数第二个 即可打印结果 5 5 6 数据处理完成后 关闭所有窗口 在主界面下按 Logout 退出系统 关闭 Millennium32 软件 再依次关闭电脑主机 显示器 打印机 5 6 清洗系统和关机 5 6 1 数据采集完毕后 关闭检测器 继续以工作流动相冲洗 10min 后 换水冲洗 5 6 2 清洗进样阀 5 6 2 1 用启动注射器吸 10ml 超纯水 5 6 2 2 将注射针导入口冲洗头 Rheodyne 部件号 7125 054 连接到注射器出口上 不要针 并将它 们一起接到进样口上 5 6 2 3 使进样阀保持在 Inject 位置 慢慢将水推入 水将通过注射针导入口 引导管 注射针导入管 和注射针密封圈 由样品溢出管排出 5 6 3 清洗柱 5 6 3 1 C18 柱先用超纯水以 1ml min 冲洗 40min 以上 再用甲醇或乙腈冲洗 20min 5 6 3 2 Protein PAK60 柱先用超纯水冲洗 90min 以上 再用甲醇或乙腈冲洗 40min 5 6 4 用水冲洗柱后 分别用 20ml 超纯水冲洗柱塞杆外部和法兰盘上小孔 5 6 5 清洗完成后 先将流速降到 0 再依次关闭泵 脱气机 UPS 断开电源 5 6 6 填写使用记录 Waters 高效液相色谱系统操作规程高效液相色谱系统操作规程 制定人 1 目的 规范 Waters 高效液相色谱系统的使用和维护 2 范围 本规程适用于 Waters 高效液相色谱系统的使用和维护 3 职责 室仪器 负责 Waters 高效液相色谱系统的日常使用和维护 4 系统组成 本系统由 Waters 输送系统 输液泵 Waters 在线脱气机 进样阀 检测 器 色谱工作站 电脑等组成 另外还包括打印机 断电保护器和通风柜等辅助设备 5 程序 5 1 准备 5 1 1 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相 应足够 流动相必须用 0 45 m 滤膜过滤 样品和标准溶液 也可在平衡系统时配制 更换合适的色谱柱 柱进 出口位置应与流动相流向一致 和定量环 5 1 2 通电前应检查仪器设备之间的电源线 数据线和输液管道是否连接正常 5 2 开机和泵操作 5 2 1 开机及测试样品 5 2 1 1 先打开色谱仪 检测器 后打开电脑及软件 5 2 1 2 选 project use name 5 2 1 3manage breeze 看 system 连接情况 5 2 1 4view method 设参数 如波长 流速 1 0 溶剂 甲醇 水 等 保存 5 2 1 5 检查 流动相放好 使用 A 泵或 B 泵 5 2 1 6 灌注 冲洗 用流动相充分浸润泵 排除气泡 5 2 1 7 平衡系统 equilibrate 选择方法 平衡 20min 左右 5 2 1 8 进样 make single injection next 取样 出现对话框后 在 load 注入 马上移 到 inject 拔出进样器 2min 后将 inject 拨回 load 停止按 stop 5 3 数据处理 5 3 1 设定 process parameter find data 在 channel 中选一个数据 点 review 点 guide 选 start 选峰的范围 用鼠标拉 next next 在 peak1 命名 next next 选 ex ternal 给 process parameter 起名 可以是仪器参数的方法名或重新起名 finish 保 存 5 3 2 设标准曲线横坐标 find data 中选所有要做标准曲线的点 右键 alter sample 把 u nknown 改为 standard 点 edit 中 component 点 edit 中 copy 选过程方法 填写每 个点的浓度 OK 保存 5 3 3 做标准曲线 find data 中选所有要做标准曲线的点 右键 process 选过程方法 选 clear OK 右键 view as 中 result 选所有要做标准曲线的点 看时间 是刚刚生 成的 右键 review 点校正曲线