基因工程的工具——酶与载体

课时达标检测：基因工程一、 选择题1、下列四条DNA分子，彼此间具有相同粘性末端的一组是A. B. C. D. 2、下列关于基因工程的叙述，正确的是 A. 基因工程的第三步是目的基因与运载体的结合B. 只要目的基因进入了受体细胞就能成功的表达C. 常用的运载体有质粒、噬菌体和动、植物病毒D. DNA连接酶的作用是连接两个黏性末端的碱基3、利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是 A. 从棉花二倍体细胞中检测到细菌的Bt毒蛋白基因B. 从酵母菌细胞中提取到了人干扰素基因及其mRNAC. 从牛乳汁中提取到了人生长激素D. 从大肠杆菌中检测到人胰岛素DNA序列4、某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体 A. B. C. D. 5、生命活动中，酶是不可缺少的生物催化剂。以下五种酶的作用对象分别是 肽酶 解旋酶 纤维素酶 ATP水解酶 DNA连接酶A碱基间氢键、肽键、植物细胞壁、磷酸基团、磷酸基团B肽键、碱基间氢键、植物细胞壁、高能磷酸键、磷酸二酯键C肽键、碱基间氢键、原生质层、氢键、磷酸二酯键DR基、脱氧核苷酸、细胞膜、ATP、磷酸基团6、下表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是 A. 是c；是b；是a B. 是a和b；是a；是bC. 是a和b；是b；是a D. 是c；是a；是b7、下列叙述错误的是 A从基因组文库中获取的某种生物的部分基因，可以实现物种间的基因交流B从cDNA文库中获取的目的基因，既无启动子，又无终止子C用人胰高血糖素基因制成的DNA探针，检测人胰岛B细胞中的mRNA，可形成杂交分子D基因表达载体中的标记基因，不能含有限制酶的切割位点8、下列有关限制酶的叙述正确的是 A用限制酶切割一个DNA分子中部获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个B限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大CCATG和GGATCC序列被限制酶切出的黏性末端碱基数不同D只有用相同的限制酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒9、如图表示构建重组DNA分子的过程，其中a、b、c、d 代表不同的结构或物质。下列有关说法错误的是 Aa的本质是双链环状DNA Bb能够识别和切割特定的核苷酸序列Cc是具有缝合DNA片段作用的DNA聚合酶 D可用聚合酶链式反应(PCR)扩增d10、下列关于蛋白质工程的说法，错误的是 A蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要B蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构C蛋白质工程能产生自然界中不曾存在的新型蛋白质分子D蛋白质工程与基因工程密不可分，又称为第二代基因工程11、(多选)下表为常用的限制性核酸内切酶(限制酶)及其识别序列和切割位点，由此推断下列说法错误的是 限制酶名称识别序列和切割位点限制酶名称识别序列和切割位点BamHGGATCCKpnGGTACCEcoRCAATTCSau3AGATCHindGTYRACSmaCCCGGG(注：YC或T，RA或G)A一种限制酶只能识别一种核苷酸序列 B限制酶切割后一定形成黏性末端C不同的限制酶可以形成相同的黏性末端 D限制酶的切割位点在识别序列内部12、(多选)下图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中Pst、Sma、EcoR、Apa为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法错误的是 A图示过程是基因工程的核心步骤，所需的限制性核酸内切酶均来自原核生物B图示中构建基因表达载体时，需用到一种限制性核酸内切酶C常用的载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒D抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来13、(多选)下列关于基因工程技术的叙述，错误的是()A切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列BPCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变D抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达二、非选择题14镰刀型细胞贫血症是一种单基因遗传病，患者的血红蛋白分子肽链第6位氨基酸谷氨酸被缬氨酸代替，导致功能异常。回答下列问题：(1)异常血红蛋白的氨基酸序列改变的根本原因是编码血红蛋白基因的_序列发生改变。(2)将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以合成正常的血红蛋白达到治疗的目的。此操作_(填“属于”或“不属于”)蛋白质工程，理由是该操作_。(3)用基因工程方法制备血红蛋白时，可先提取早期红细胞中的_，以其作为模板，在_酶的作用下反转录合成cDNA。cDNA与载体需在_酶的作用下，拼接构建基因表达载体，导入受体菌后进行表达。(4)检测受体菌是否已合成血红蛋白，可从受体菌中提取_，用相应的抗体进行_杂交，若出现杂交带，则表明该受体菌已合成血红蛋白。15GDNF蛋白是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的基因表达载体(如图所示)，并导入到大鼠神经干细胞，用于神经系统疾病的治疗。请回答下列相关问题：(1)在培养大鼠神经干细胞时，常先用_把组织分离，获得单个细胞。当培养的神经干细胞相互接触后停止分裂，通过分瓶培养可以使细胞继续增殖，该过程称为_。(2)除目的基因、启动子外，基因表达载体通常还含有_，在构建GDNF基因的表达载体时，需选择图中的_限制酶进行酶切。(3)根据上图，酶切后的载体和GDNF基因经_酶处理，可获得_种含有目的基因的产物。参考答案：一、选择题：题号12345678910111213答案DCCDBACBCBABDABCABC二、 非选择题：14、解析：(1)基因是具有遗传效应的DNA片段，遗传信息储存在基因碱基对的排列顺序中。(2)蛋白质工程是指通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求，题中所述不属于蛋白质工程。(3)利用反转录法获取目的基因时，需先提取mRNA，在逆转录酶的作用下反转录合成cDNA。cDNA与载体需在限制酶和DNA连接酶的作用下拼接构建成基因表达载体，才可导入受体菌。(4)检测目的基因是否翻译成蛋白质，需要从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原抗体杂交。答案：(1)碱基对 (2)不属于没有对现有的蛋白质进行改造(3)mRNA逆转录限制酶和DNA连接 (4)蛋白质抗原抗体15、解析：(1)动物细胞培养时，需要先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，使动物细胞彼此分离成单个。动物细胞培养过程中会出现接触抑制的现象。(2)目的基因的表达载体除了含有目的基因、启动子外，还要含有终止子和标记基因等。从