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2020 4 6 6高效液相色谱法 湖北三峡职业技术学院讲课人 穆阳班级 应用化工 1 班 生物化工学院 2020 4 6 高效液相色谱仪 2020 4 6 高效液相色谱法 HPLC 是60年代末以经典液相色谱法为基础 引入了气相色谱的理论与实验方法 流动相用高压泵输送 采用高效固定相和在线检测等手段发展而成的分离分析方法 与气相色谱法相比具有 适用范围广 样品预处理简单 分离效率高 流动相选择范围广 检测方法多为非破坏性的 流出组分可回收等优点 6 1概述 2020 4 6 气相色谱与高效液相色谱的比较 2020 4 6 6 1 1高效液相色谱的主要类型 概念 以液体作流动相的色谱统称为液相色谱6 1 1 1液 固吸附色谱1 分离原理流动相中的溶质分子 X 与溶剂分子 S 在固体吸附剂上竞争吸附的结果 2 固定相固体吸附剂 如硅胶 氧化铝等 3 流动相各种不同极性的一元或多元溶剂 4 应用常用于分离极性不通的化合物 颗粒度较小 5 10 m 2020 4 6 6 1 1 2液 液吸附色谱 分离原理 组分在固定相和流动相上的分配 正相分配色谱 正相柱 反相分配色谱 反相柱 组分极性越大 保留时间越长 使用极性化合物的分离 组分极性越小 保留时间越长 适用非极性化合物的分离 2020 4 6 6 1 1 3键合相色谱法 1 分离原理 利用硅胶表面存在的硅羟基 通过化学反应将有机分子键合到硅胶表面 2020 4 6 附 液相色谱的固定相与流动相 一 固定相 固定相 分配色谱固定相 液 固吸附色谱固定相 离子交换色谱固定相 空间排阻色谱固定相 手性固定相 2020 4 6 二 流动相 液相色谱的流动相又称为淋洗液 洗脱剂 流动相组成 极性改变 可显著改变组分分离状况 改变流动相的组成和极性 组成比例 是提高分离度的有效手段 常用溶剂 环己烷 己烷 四氯化碳 甲苯 乙酸乙酯 甲醇 乙腈 水等 2020 4 6 HPLC 液 固吸附 液 液分配 正相色谱反相色谱 一般反相色谱离子对色谱离子抑制色谱 离子交换色谱 一般离子交换色谱离子色谱氨基酸分析 空间排斥色谱 凝胶
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