维生素C的定量测定

实 验 报 告实验课程： 维生素C的定量测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法） 学生姓名： xxx 学 号： xxx 专业班级： xxx 2017年 4 月 18 日实验背景：维生素是维持生物正常生命过程所必须的一类有机物质，其中维生素C 是人类营养中最主要的维生素之一，对预防和治疗坏血病有特殊的功效，故又称之为抗坏血酸。维生素C 能促进细胞间质的合成，与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。在1928年，从牛的肾上腺皮质中提取出的结晶物质，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效，因此称为抗坏血酸。如果人体缺乏维生素C 时则会出现坏血病。维生素C广泛分布于植物的绿色部分和新鲜的水果、蔬菜中。人体内不能自身合成维生素C，必须由食物提供，所以对新鲜水果、蔬菜中维生素C 的存在进行定性检测和定量测定是很有意义的。一、 实验目的了解并掌握用2，6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。二、 实验原理还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中，2，6-二氯酚靛酚呈红色，被还原后变为无色。因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使滴定液呈淡红色，即为终点。如无其他杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量成正比。三、 实验试剂和仪器1、实验试剂：2%草酸溶液、1%草酸溶液、标准抗坏血酸溶液（0.1 mg/ml）0.1%2，6-二氯酚靛酚溶液 2、实验仪器：吸管1.0ml、10.0ml各一个， 两个25 ml容量瓶，微量滴定管5ml，电子分析天平，研钵，漏斗.四、 实验步骤1、取材与预处理：先在研钵中加入15m 2%草酸，再用分析天平称取2.5g左右青椒和苹果分别放入研钵中，记下数据; 研磨成浆后漏斗过滤，滤液转入25ml容量瓶，用2%草酸定容。2、滴定（1）标准液滴定：准确吸取标准抗坏血酸溶液1.0 ml（含0.1mg抗坏血酸）置100 ml锥形瓶中，加9ml 1%草酸，微量滴定管以0.1%2，6-二氯酚靛酚滴定至淡红色，并保持15s钟即为终点。由所用染料的体积计算出1ml染料相当于多少mg抗坏血酸。（2）样液滴定：准确吸取滤液两份，每份10.0ml分别放入两个100ml锥形瓶内，滴定方法同标准液滴定。五、 数据记录和处理1、数据记录项目苹果质量/g青椒质量/g标准液/ml苹果/ml青椒/ml第一次2.542.520.400.141.95第二次0.420.131.95平均0.410.1351.952、计算式中：V - 滴定样品提取液消耗染料平均值（mL） T - 每mL 染料所能氧化抗坏血酸mg 数 A - 样品提取液定容体积 A1 - 滴定时吸取样品提取液体积 W - 样品重量由标准液滴定知每0.41ml染料能氧化0.1mg抗坏血酸，T=0.244mg/ml中国食物成分表2012修正版中青椒中维生素C含量为72mg/100g；苹果维生素C 含量为7.36 mg/100 g本实验测定数据均偏小，可能是研磨不够充分或滴定之前维生素C暴露于湿润空气中被氧化所致。六、 误差分析和问题讨论1、误差分析：维生素C水溶液不稳定，很快氧化成脱氢抗坏血酸，尤其是在中性或碱性溶液中很快被氧化。暴露在空气中会被氧化变性。样品中某些杂质亦能还原二氯酚靛酚。可能是研磨不够充分，导致含量偏小；滴定时滴定管中有时会有气泡，影响读数。滴定苹果时，苹果液本身淡红色有颜色，对滴定终点有干扰。2、问题讨论（1）为什么滴定过程宜迅速？答：防止维生素C暴露在空气中被氧化变性（2）为什么滴定终点以淡红色存在15s内为准？答：因为样品中某些杂质亦能还原二氯酚靛酚，但速度较抗坏血酸慢。七、 参考文献陈钧辉、李俊，生物化学实验第五版，科学出版社2014.5孙鹏、王宁、孙先锋，两种方法对苹果中维生素