机能实验学基础

机能实验学基础知识 机能实验中心 1 机能实验学概述 机能实验学是融会了生理学 病理生理学和药理学三门学科实验教学的内容和手段的一门新的综合性实验学科 以研究生物体正常机能和代谢 疾病发生发展过程的机能和代谢及其发病机制和药物作用的规律 一 什么是机能实验学 二 教学目的 通过该课程的教学 使同学们初步掌握基本操作技能 通过观察实验动物的生理指标 复制某些疾病模型和防治手段的应用等基本方法 巩固生理 病理生理和药理学的基本理论 培养同学们理论联系实际的能力和独立思考 分析问题的能力 三 机能学实验课的要求 熟悉相关生理学 病理生理学 药理学理论知识 以严谨的科学态度进行实验 实验中严格按操作程序进行 实验小组各成员合理分工并密切合作 仔细 耐心地观察实验过程中出现的现象并做好记录 主动联系理论思考 分析实验结果和各种实验现象 认真整理分析结果 按要求书写实验报告 四 实验室守则 提前10分钟进入实验室 进入实验室必须穿戴工作服 养成良好的学习和工作作风 保持实验室安静 实验中严格按实验步骤和方法进行 实验前认真清点实验器材 并做好借领手续 养成节约的良好习惯 不得随意损坏公共财物 实验完成后 按程序及时关闭计算机 要安排值日小组做好实验室卫生环境 2 基本操作 基本设备及器械实验仪器动物手术基本过程 动物捉拿 固定 麻醉 处死 三通管正确使用 一 基本设备与器械 一 实验板 台 家兔实验台 蛙板 二 药品与试剂 主要包括麻醉药物 抗凝药 各种平衡盐溶液 及各种实验所需的特殊试剂 三 手术器械 止血钳 组织剪 组织镊 持针器 缝合针 缝线等 手术器械 1 组织镊 正确使用组织镊的手法是 以食指 中指放于器械的外侧缘 拇指放于内侧缘 集3指的力量实施操作动作 而且适用于左右手的同时操作 2 止血钳 主要用于止血和分离组织 基本结构包括止血钳的头部 关节活动部 柄部和套扣4部分 有大 中 小3种不同规格 每一规格的止血钳中又分为直 弯2种类型 正确的使用方法是 以拇指 无名指分别套入止血钳的套扣内 控制止血钳展开的力度 以食指放在止血钳的关节部位 控制止血钳的方向和钳夹组织部位的准确性 切不可以左右手分别抓住止血钳的套扣部位 用两手的合力进行止血或分离组织 3 组织剪 4 探针和玻璃分针 金属探针主要用于破坏和捣毁动物的中枢神经玻璃分针主要应用于对精细部位和组织的分离和游离等操作 如分离血管 游离神经等均需借助于玻璃分针的帮助 四 仪器设备 机能学实验中常用的仪器设备包括 动物天平医用计算机恒温水浴箱或平滑肌槽6240生理信号记录系统或BL 420E系统动物呼吸机图像分析系统 二 机能学动物手术的基本过程 1 动物选择与捉拿2 麻醉动物3 固定动物手术区备皮 剪毛暴露需要的组织器官进行相应的手术术后处死动物 1 动物选择与捉拿 常用的实验动物 犬 家兔 猫 鸡 大鼠 豚鼠 小鼠 蛙 蟾蜍等 实验动物的选择实验动物的选择直接关系到实验的成败和其可行性 科学性等 1 小鼠 捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起 放在较粗糙的台面或鼠笼上 在其向前爬行时 右手向后拉尾 用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤 将其固定于左手大鱼际处 用左手无名指和小指压紧鼠尾 右手即可作注射或其他实验操作 2 蛙和蟾蜍 用左手将动物贴紧在手掌中 并以左手中指 无名指夹住前肢 无名指和小指压住腹部 拇指压背 食指压头 右手进行其他实验操作 抓取蟾蜍时 禁忌挤压两侧耳部毒腺 以免毒液射入眼中 3 家兔 一手抓住兔颈部的被毛与皮肤 另一手托其臀部 使其躯干的重量大部分集中在手上 然后称重 2 麻醉动物 针对不同的动物 可以选择不同的麻醉药物 实施不同的麻醉方法 麻醉药物应用原则 依据动物体重计算麻醉药物的剂量 掌握宁少勿多 分阶段给药的方式 1 麻醉剂 乙醚 是最常用的吸入性麻醉剂巴比妥类药物 氯胺酮 氨基甲酸乙酯 乌拉坦 水合氯醛等 动物麻醉 局部麻醉1 普鲁卡因 颈部2 3ml 股部1 2ml全身麻醉1 吸入麻醉 乙醚2 注射麻醉 戊巴比妥钠 3 1ml kg乌拉坦 25 4ml kg 2 给药途径 吸入麻醉 一般适用于实验动物的全身麻醉 具有麻醉安全系数较大 麻醉深度易于掌握等优点 腹腔注射 是啮齿类动物常用的给药方法 注射部位是左 右下腹部 灌胃给药 是啮齿类动物常用的给药方法 用灌胃针直接将药物灌入胃中 静脉注射 应根据动物的种类选择注射部位 家兔多选用耳缘静脉 因为静脉注射是通过血管给药 所以只限于液体药物 兔耳缘静脉注射 将动物放入兔盒内 拔去耳缘部位的被毛 耳缘静脉即清晰可见 用左手食指和中指夹住静脉近心端 拇指和小指夹住耳缘部分 以左手无名指和小指放在耳下作垫 待静脉充盈后 有手持注射器使针头尽量由静脉远心端刺入 顺血管方向平行 向心端刺入 注射完毕抽出针头 用棉球压迫注射部位数分钟 以免出血 4 动物麻醉技巧与效果的判断 静脉注射麻醉药物时 开始给药的速度可略为快些 即先给予总量的1 3 以求动物能顺利 快速地渡过兴奋期 给后2 3剂量的速度宜慢 边注射 边注意观察动物的生命体征变化 心跳 呼吸 肌肉松弛情况等 当确定已达到麻醉效果时 即可停止给药 不必急于将剩余的麻醉药物全部推入 若麻醉剂量已给足 动物仍有挣扎 兴奋等表现时 应观察一段时间 确认动物是否已渡过兴奋期 切不可盲目追加麻醉药物 避免因麻醉过深 抑制心跳呼吸中枢而导致动物死亡 动物达到麻醉的基本状态是 1 全身肌肉松弛 2 呼吸平稳 3 角膜反射迟钝 4 痛觉消失 3 固定动物 当麻醉效应趋于平稳时 即可固定动物 固定动物的体位主要有仰卧位 俯卧位 侧卧位等 也可用特制的盒及相应的工具进行特殊的固定 但要注意的问题是 随着麻醉药物的失效 动物可能因挣扎 躁动等而发生失去控制的情况 4 动物急性处死方法 脊椎脱臼法 小鼠空气栓塞法 兔20 40ml急性放血法 兔颈总动脉放血 三通管的正确用法 五 机能实验学教学资源网站 机能学实验室网站 六 虚拟实验室 进入虚拟实验室的方法1 输入网址192 168 10 2 sys jnsys 进入长沙医学