仿制药研究与评价总体思路

1 仿制药研究与评价的总体思路 2 仿制药制备工艺研究与工艺验证的技术要求 及评价要点 3 仿制药质量研究及质量标准建立的技术要求 与评价要点 4 仿制药杂质的方法学研究与评价 请大家将手机调至 振 动 档 谢谢您的配合 简短自我介绍 毕业后 至今在上海市药品检验所化学室工作经历了 1998年 2002年的强仿期 和 2003 2006仿制药疯狂期 2003年8月 2004年2月 赴日本国立医药品食品卫生研究所药品部 相 当于我国的中检所化药室 进修2008年11月 2009年1月 借调至中检所起草2010年版药典 溶出度试验 指导原则 新增 日常致力于的事业 发表了30多篇方法类 思路类文章 1 如何建立HPLC TLC 法建立有关物质测定方法 2 溶出度研究系列文章 今年伊始 在国内最为知名的药学网站 丁香园 药物分析版 上创立 溶出度研究 子版 由本人主持 每日回复来自全国业内人士的来电来信皆在半 小时以上 本人工作感悟 本人收集国家新药审评中心发补资料予以研读 一定要详尽 反复地阅读国家新药审评中心颁布的 各类指导原则 每日必浏览国家药监局 国家新药审评中心 中检 所 药典会网站 注意文献查询 药典 维普数据库 PDR书 许多原研药专利过期后 均可在日文网站上查询到 相当深入的内容 值得借鉴 可以一试 本人工作感悟 工作中一定要注重思考 带着问题去学习 有的放矢地去攻读 多观察 多领会 日积月累 潜移默化之中就会水到渠成 瓜熟蒂落 思维要开放 活跃 不要固步自封 按部就班 因循守旧 讲述研究生期间 聆听学校大师级老师谆谆教诲的感悟 一定要不断思考 注意查询文献 收集各方面信息 培养自身的专业素养与专业敏感度 不要怕遇到问题 越是遇到问题 将其解决 就越能不断提高与进步 药品作为高科技产品的体现 药品作为高科技产品 的体现主要是在固体制 剂上 其他主流剂型的研制 开发与生产均较固 体制剂简单 且由于液体制剂的局限性 导致目 前国际上的药品发展趋势愈发集中于固体制剂 评价仿制药与原研药质量一致并生物等效是提 高仿制药质量的关键 我国是原料药的 生产大国 原料药生产给自然生态环境带来的影响以及其自身 局限性 体现了我国制药工业的 悲哀 只有制剂才能被称作为 药 原料药是不被列入 药品 的 它甚至可以与化工原料 合并同类 将原料药制成 固体 制剂 并工业化大生产的过程则是一个极为复杂 系统 高科技的过程 制剂的优劣是用人体生物利用度 BA 的高低来评价的 却是制剂上的 蕞尔小国 成为原料药出口大国是十分悲哀的事 情 一个 小小的药片 制剂 让众多的 国外企业获利颇丰 白花花的银子 流出国门 爱国情怀 进口药增幅迅猛 目前国内制剂现状 我国国产固体制剂有高达十几万个批准文号 其中 绝大部分产品均是仿制品 同类产品有几十家 上百家生产的已不足为奇 比比皆是 生物药剂学分类系统中的二 四类产品 有相当一 部分药品的临床效果与进口原研品均存在一定的或较大 的差距 即生物利用度较低 所以 该学习班十分具有意义 本人赴东瀛国家药检所求学归来后的感悟 深入学习了该国开展的 薬品品質再評価工 程 和 为新药 仿制药研发设立的高技术门槛 之 理念 颇值得我国借鉴与效仿 充分意识到溶出度检测技术重要性 深谙了溶 出度作为固体制剂的 灵魂 从药品最初研发到 最终临床使用整条脉络中所起到的 龙脉 作用 对质量标准中各项指标的深入剖析 含量 均匀度 没有任何技术含量 深入讲述制剂生产过程 仅是将一物件使成 均匀状后按照一定规格制作而已 阐述含量与生物利用度几近无关的根据所在 一定牢固树立 吃药不是吃含量 而是吃生物利 用度 的科学理念 对质量标准中各项指标的深入剖析 有关物质与毒副作用的关系 能够建立起准确测定杂质的检验方法固然重要 但与主药在体内吸收的重要性相比就显得无足轻重 了 因为如果主药尚无有效吸收 主体吸收 即便有1 2 杂质存在也无关痛痒了 除非一些明确 的 毒性较强的杂质 毒副作用的引起往往由低劣辅料所致 溶出度技术才是 随着人们对溶出度的不断研究与深入 对其认 识与理解亦在不断发展与变化着 现今 该试验不 仅具有为建立体内外相关性而设立的理念 且还已 成为证明药物体内释放特性的一种简单 廉价而不 失严谨的实验室检测方法 固体制剂内在品质的灵魂与核心所在 在多种pH值溶出介质中溶出曲线的测定 该手段更是成为 剖析 和 肢解 原研固体制剂内在品质的一种擘肌分理 抽丝剥茧的重要手段 成为固体制剂内在品质呈现于外在表象的一种 映射 与 载体 同时 对于关系到有可能影响到药物生物特性的各类变更评价也至关重要 亦可在评估不同来源的同一制剂内在品质差异性方面发挥重要作用 该项技术愈来愈受到各方面的瞩目与期待 绝非一个介质 一个时间点 一个限度的测定 体内生物利用度的差异体外溶出曲线的不同 疗效的优劣制剂 的优劣关键 核心 通过讲述厨房 碗筷和馒头的关系来阐述 1 GMP 很大程度上讲 是对硬件的要求 与 溶出度试 验关系不大 2 溶出 是专业知识 专业技术的比拼 是属于纯 软件 范畴的 GMP 是属于纯 硬件 范畴的 3 后GMP时代 我们做些什么 4 认证 就是发达国家套在非发达国家身上的枷 锁 仿制药研发思路与理念 1 查询文献 原研产品所有的相关信息 选择品种要慎重 列举盐酸米诺环素和硫普罗宁注射液 2 获取不同时间段市场上流通的多批号原研制剂 3 测定多批号原研制剂的多条溶出曲线 有关物质及含量 确定波动范围 同时 取原研制剂 自行进行 影响因素试验 加速试验和长期稳定性试验 以观测原研制剂内在品质的变化 达到进一步剖析与肢解原研制剂的目的 即换一角度对原研制剂进行深刻理解 仿制药研发思路与理念 4 设计多处方 优化处方 尽可能地使体外多条溶出曲线与原研制剂产品一致 并注意生产规模 5 随即抽取工艺放大后的样品与原研制剂产品一并进行生物等效性试验 6 如失败 寻找体外溶出度差异 是肯定可以找到 如找不到 讲述美国药典之所以罗列七个方法的原因所在与河南天方药业的实例 7 在该具有差异的体外溶出度条件下 再次予以深入研发 直至该差异消除 同时验证其他条件下溶出曲线的一致性 皆为良好时 再次进行BE试验 由于制剂技术为药品的核心技术 在原研药厂高度保密情况下 仿制药厂在仿制时在技术上的深入与突破便显得尤为重要 要想了解原研制剂内在品质的具体情况以及其中所蕴涵的高科技 就需要采用一种可测定的 客观 科学 易于重现的评价手段来予以表达与诠释 从而指导研发人员朝着一个正确的方向去研制 去攻关 溶出度试验便是目前达到该目标的一种最为有效 最为重要的 武器 溶出度检测技术在仿制药研发中的重要意义 溶出度检测技术在仿制药研发中的重要意义 如何提高BE试验成功率 1 体外 多条溶出曲线 一致 体内多数情况一致 2 体外不一致 体内多数情况下不一致 3 BE试验成功 体内一致 并不意味着仿制制剂临 床疗效就一定与原研制剂相当 4 BE试验失败 体内不一致 肯定会在体外某个溶 出度试验条件下找到两者间显著性差异的情况 使用该药品的患者是特定人群吗 溶出度试验 是普通受试者 是 体内研究 是 在低转度和所有介质中 溶出曲线均一致吗 否针对性受试者 否 在中性介质条件下溶出曲线一致吗 否胃酸缺乏受试者 如何科学有效地建立起两者相关性 如何确定溶出度试验条件 参数 如何提高生物等效性试验的成功率 对溶出度的研究 又再一次体现了日本人 师夷长技以 制夷 特点 关键是 介绍发达国家先进作法 日本 日本橙皮书 参比制剂生产厂家 溶出度试验参 数 四条标准溶出曲线 该制剂质量标准中溶出度 试验与测定方法 该原料药的物理化学性质 主要 有解离常数 在四种溶出介质中的溶解度以及在水 中 不同pH值的液体中和光照条件下的溶液稳定性 等 卡马西平片四条溶出曲线 桨板法 75转 在四种介质中 5分钟和30分钟时分别取样测定 限度分别为不得过60 和不得少于70 我国药典 桨板法 150转 0 1mol L 盐酸1000ml 60min 65 尼群地平片四条溶出曲线 桨板法 100转 在四种介质中 其中均含0 15 的吐温 80 45分钟 限度均为70 中国药典 桨板法 100转 0 1mol L盐酸溶液 乙醇 70 30 900ml 60分钟 60 奥美拉唑肠溶片四条溶出曲线 pH 4 0 6 0间的研究国内几乎无人去做 国产肠溶衣缺陷所在 茶碱缓释片 桨板法 50转 在四种介质中 硝苯地平缓释片 由于多pH值溶出曲线的绘制已成为剖析和表达固体制剂内在品质的重要手段 故对溶出曲线比较的科学评价愈发重要 目前 由于美国和日本等国的官方机构均已认定 采用模型非依赖方法之一的 相似因子比较法 2 比较溶出行为的相似性 亦可根据实际情况增加其他方法 如研发时 溶出曲线描绘的具体实施步骤 1 酸性药物制剂 pH值分别为1 0或1 2 5 5 6 5 6 8 7 5和水 2 中性或碱性药物 包衣制剂pH值分别为1 0或1 2 3 0 5 0 6 8和水 3 难溶性药物制剂pH值分别为1 0或1 2 4 0 4 5 6 8和水 4 肠溶制剂pH值分别为1 0或1 2 6 0 6 8和水 缓控释制剂 pH值分别为1 0或1 2 3 0 5 0 6 8 7 5和水 溶出曲线描绘具体实施步骤 溶出介质的选择 普通制剂 装置的选择 桨板法 50转或转篮法100转起板 酌情增加转速 表面活性剂加入浓度 浓度研究应从0 01 w v 起点 按照1 2 5级别 逐步增加 不建议采用3 0 以上的浓度 溶出曲线描绘具体实施步骤 溶出曲线的测定 用于剖析原研制剂时 测定时间点的设定 普通制剂为5 10 15 20 30 45 60 90 120分钟 此后每隔1小时直至6小时止 缓释制剂为15 30 45 60 90 120分钟 3 4 5 6 8 10 12 24小时 结束时间点的设定 在酸性介质中最长测定时间为2小时 在其他各pH值介质中普通制剂为6小时 缓控释制剂为24小时 连续两点的溶出率达90 缓释制剂或85 以上 且相差在5 以内则可提前结束 1 i 1 Rt Tt 2 计算公式 Rt和Tt分别表示两制剂在第n个取样点的平均累积溶出率 n对于计算结果的贡献尤甚 50log 100 n n f 2 溶出曲线的比较 计算时间点的确定 计算时所选取的时间点间隔无需相等 但两制剂所取时间点必须一致 且计算时间点应不少于3个 由于该计算结果有依赖于比较时间点个数的特性 故在溶出率85 调释制剂80 以上 以上的时间点应不多于一个 建议研究者可依据参比制剂溶出率的具体情况 选取溶出率间隔相近的4 5个 如为缓控释制剂可为4 6个 时间点进行计算 溶出曲线的比较 对于所选时间点溶出结果变异系数的规定 第一选取时间点溶出结果的变异系数应不得过 20 自第二时间点至最后时间点溶出结果的变异 系数应不得过10 如超出 应从仪器适用性 样 品均一性 方法可行性的角度考虑予以解决 分别列举实例 判断结果的依据 通常 当 2数值介于50 100时被认为两条曲线相 似 该数值限定是基于两条比较曲线上任一比较时 间点溶出量平均差异限度不大于10 的考虑 溶出量平均差异与相应 2因子临界值表 对于规定时间内未达到溶出量在85 以上的溶出度试验 条件如何放宽 转速增加至75转 不建议采用100转 讲述原因 或添加表面活性剂 直至规定时间内最终溶出量达85 以上 即可结束 目前倾向采用增加表面活性剂的作法 以上手段仍未果 才增加转速至100转 绝不容许添加有机溶剂 通过以上手段 对原研制剂予以了抽丝剥茧般的逐层剖 析 溶出曲线描绘具体实施步骤 应以尽可能地在多pH值溶出介质中具有较高的溶出量或尽 可能地在多pH值溶出介质中具有缓释释放特性为出发点 来 筛选制剂处方 工艺或辅料等影响生物特性的制剂因素 并 寻找到能够区分出这些因素优劣的溶出度试验条件 然后再 逐步通过动物试验来予以佐证这种体外区分在动物体内生物 利用度的差异 从而建立起体内外相关性 并最终依据以上 原则科学 合理 系统化地拟定质量标准 溶出度技术应用于 创新药 和 更改剂型 时的贡献 工艺放大 才是核心 才是关键 对原料药 液体制剂和固体制剂分别阐述 尤对于固体制剂而言 放大才最能体现工业药剂 学的水平 这一点是我国最为薄弱关键 列举浙江 华海 海正 北京赛科实例 上海爱的发制药的缓 释微丸技术亦如此 制备工艺研究与工艺验证的技术要求及评价要点 1 反应设备的改变对反应条件的影响 2 反应溶剂的选择 改变和革除 3 搅拌与传质 4 热量传导 5 所用原材料 试剂 溶剂级别的改变对反应影响 原料药工艺研究与放大应注意的要点 6 新生成杂质的研究与控制 尤其在新化合物研制过程中更需注意 完善过程 7 有机溶剂残留量控制 讲述质量标准中的残留溶剂应如何拟定 切勿自缚手脚 8 晶型控制 讲述西咪替丁原料与制剂的晶型问题 9 三废处理 原料药工艺研究与放大应注意的要点 通过 有关物质 色泽 渗透压 pH值 等参数的检测予以制御 液体制剂工艺研究与放大应注意的要点 用于生物等效性试验 BE试验 或临床试验用样品的生产规模应至少为10万片或今后最大生产规模的1 10 两者可选择小规模的 此处重点讲述日本仿制药申报技术要求细节 关键三点的制御措施 从而 四两拨千斤般 撬动固体制剂内在品质的提高 引申至东瀛的 药品品质再评价工程 简单讲述该工程的意义与技术背景 固体制剂工艺研究与放大应注意的要点 生产规模 溶出曲线一致性与其后BE试验的关联性 如不一致 如何酌情予以评判 橙皮书中如何收 载 如何理解 着重讲述 市场监督采用溶出度曲线来评定 日本仿制药关键三点制御措施 药物在一个长时间生产过程中 出于各种各样的目的可能会发生众多变更 如处方变更 工艺变更 生产规模变更 放大或缩小 原辅料来源变更 生产场地变更等情况 以上这些变更在一定范围内的变化是否会影响到该药物的生物特性 亦可通过比较变更前后产品体外溶出曲线的方法来予以科学评估与预测 从而佐证变更前后是否需要再进行BA或BE研究 有关物质检测亦应不容忽视 比较变更前后是否 有变化 对于各类变更的评价 依然是通过对产品溶出曲线的测定 来予以评评出生产工艺过程是否予以了严格控制 还可通过批间 批内样品溶出曲线的比较 考察和辨明这些样品内在质量是否有所改变 值得一提的是 在质量研究稳定性考核中 对于考核各时间点样品内在品质是否有所变化亦可通过溶出曲线的测定和比较予以知晓和确证 对于生产工艺稳定性 批间 批内以及稳定性考核样品内在质量均一性的评价 一定要摒弃掉 仿制药就是仿标准 的错误理 念 要充分领会国家药监局新药审评中心提倡的 仿产品不是仿标准 的精神与内涵 原质量标准一定要参照 但绝非机械地生搬硬 套 不假思索地拿来 一定要予以科学 辩证的分 析 质量研究及质量标准建立的技术要求与评价要点 剂予以解析 溶出曲线 有关物质 水分 列举尼莫地平片英国药典质量标准溶出度试验条件 辛伐他汀片有一10分钟的溶出延迟滞后期 非那雄胺片原研制剂研制时发生爆炸事例 二甲双胍原料药与辅料的保密性问题 罗氏芬 注射用头孢曲松钠 不存在生物利用度问题 竟然也会出现临床疗效较为明显的差异 为何 质量研究及质量标准建立的技术要求与评价要点剖析途径列举 从多角度 多层次 多途径对原研制 中国药典 盐酸布比卡因含量测定质量标准 取本品适量 约相当于盐酸布比卡因25mg 加色谱用硅藻土约15g与10 氢氧化钠溶液0 5ml 搅拌均匀使呈疏松颗粒状 填装于垂熔玻璃漏斗 或色谱柱 中 用温热氯仿液抽滤提取7次 每次20ml 使抽提完全 提取液置250ml锥形瓶中 将氯仿蒸至近干 加冰醋酸40ml与萘酚苯甲醇指示液5滴 用高氯酸滴定液 0 02mol L 滴定至溶液显绿色 并将滴定的结果用空白试验校正 每1ml高氯酸滴定液 0 02mol L 相当于6 498mg的C18H28N2O HCl 方法费时费力 且易造成提取不完全 同时色谱用硅藻土 的价格液也较为昂贵 仿产品不是仿标准 实例 美国药典和英国药典 盐酸布比卡因含量测定质量标准 采用高效液相色谱法测定 精密量取本品适量 加水稀释制成每1ml中含0 5mg的溶液 精密量取20 l注入液相色谱仪 记录色谱图 另取盐酸布比卡因对照品适量 同法测定 按外标法以峰面积计算 即得 C18柱 乙腈 磷酸盐缓冲液 65 35 为流动相 检测波长为263nm 方法简便易行 测定准确 仿产品不是仿标准 实例 质量标准绝非一成不变 完全可根据该产品在不同时间段所呈现出的特性 予以科学 客观的修改与完善 在 质量源于设计 QbD 理念得到普遍重视的今天 质量标准的作用非但没有受到削弱 反而益显其重要性 质量作为产品的内在品质是抽象的 只有通过质量标准的检验才能将产品的内在质量展示出来 体现出来 映射出来 质量标准的渐进性与完善性 原料药必须拟定 即便没有降解产物 亦需要通过控制合 成中间体限度来控制合成工艺 制剂质量标准拟定依据要根据由原料药制成制剂后和制剂稳定性放置时间段是否有变化来确定 着重讲述 并讲述14号资料稳定性考核必须给出测定数据的重要性 以便观测 变化 如无变化 则制剂质量标准中则可不拟定有关物质检查项 注射剂一定要拟定 即便没有变化 为保证使用安全亦要 拟定 质量标准中有关物质拟定原则 引申讲述崩解时限与溶出度的关系 质量标准中应如何拟定 对于生物药剂学分类系统中的第一类药物 高溶解性 高渗透性药物 如磷酸氯喹 盐酸氯喹 硫酸氯喹 如果该药品的普通制剂在进行溶出度研究时 在转篮法 100转或桨板法 50转的条件下 可在多pH值溶出介质中 至少四种以上 具有15分钟溶出量均不低于85 的特性 则可考虑向国家相关部门申请豁免生物等效性试验 且在质量标准中仅考虑进行崩解时限的控制 申请豁免生物等效性试验的条件 除满足以上条件外 还应满足 1 该制剂中的辅料量与主药量相比 不能过 大 2 且辅料中不能加入表面活性剂 3 活性成分应为宽治疗指数药物 4 同一制剂不同规格的速释制剂 洛索洛芬钠片就是一个很好的例证 第一 对比分析法 仿制药中的杂质可以采用相同分析方法 如HPLC研究方法 与参比制剂进行对比研究 如杂质水平相当 那么可以认为该杂质得到合理控制 第二 科学文献和主要代谢物法 如果已定性杂质的水平得到科学文献的充分论证 那么该杂质的限度就无需进一步论证 此外 如果某杂质本身也是原料药在体内的主要代谢物 通常也认为该杂质已得到合理控制 仿制药有关物质研究思路 第三 遗传毒性研究法 考虑到遗传毒性试验既费时间又代价不菲 此法 一般是在前两种方法都无法对杂质合理研究论证才 采取的方法 这项研究可以采用含拟控制杂质的制 剂或原料药 也可以使用分离得到的杂质直接进行 研究 仿制药有关物质研究思路 a 分别检测原研制剂与仿制制剂 将得到的有关物质测定图谱予以比对研究 同时 采用DAD检测器对各检出峰予以紫 外图谱的扫描 确证一致性 如能用导数光谱确证更佳 比 液质联用方便 快捷 廉价 b 如仿制制剂中的每一个杂质均为超出原研制剂 则可结束 研究 c 如仿制制剂中有超过原研制剂含量的杂质 但仍小于原研 制剂质量标准所要求的限度值 则可结束研究 仿制药有关物质研究思路 d 如仿制制剂中有超过原研制剂的已知杂质 并超出原研制剂质量标准所要求的限度值 则需对制剂工艺重新予以研究 这便是 将原研制剂的影响因素试验和加速试验用于仿制制剂处方工艺研究的一个重要体现 但如该杂质本身就是原料药的主要代谢物 则可 根据实际情况予以酌情放宽限度 列举英国药典技术壁垒的实例 仿制药有关物质研究思路 e 如仿制制剂中出现原研制剂中从未有的杂质 此 处强调为0 1 以上的未知杂质 首先应确证来 源 是降解产物 还是原料药带过来的合成中间 体 如为后者 权衡该原料药质量标准未知杂质限 度值和原研制剂质量标准未知杂质限度值后酌情拟 定 即可 仿制药有关物质研究思路 f 如为新降解产物 则需进行深入研究 首先予以 定性 知晓结构式 并应推测出主成分在何条件下 较易降解出该杂质 然后通过查阅相关文献 对该 杂质的限度值予以充分论证 如查询不到 则只好 进行体内遗传毒性的研究了 根据实验数据 科学 合理地确定限度值 仿制药有关物质研究思路 从检测方法来讲 主要有HPLC法与TLC法 还有少部分 GC法 讲述两法优缺点 绝不要有 HPLC法一定优于TLC 的 错误理念 一味地将TLC法改为HPLC法 英国药典中就 有数个品种采用两法检测有关物质的做法 讲述TLC法检测时 应建立 梯度对照 理念 通过 半定 量 概念对稳定性考核样品予以科学评估 绝不要有 小于自 身稀释对照溶液主成分斑点即可 的简单懒散理念 有关物质检测方法 此处着重讲述归一化法与自身对照法的优缺点 如 何灵活运用该两方法 获得事半功倍的工作效果 穿插线性试验原理 线性试验意义 并列举实例 对于未知杂质 不降解杂质 采用主成分自身稀释法 P P HO 1 怪异结构式唑来膦酸的结构式 2 梯度洗脱时 柱效亦不是正常体现 高达2万 故无需拟定 3 该组分几乎位于死体积出峰 在色谱柱上几乎无保留出峰时 亦不成线性 O O OHOHOH OH N N 1 杂质对照品 定量法 简便易行 不受耐受性因素的影响 纯度无需特别高 只要能够得到准确纯度值即可 资料中一定要提供该杂质对照品的精制方法与质量标准 容量分析法消耗样品量较大 高效液相法存在 同一波长下 各物质校正因子的不同 之缺陷 此处着重讲述两法优缺点 最佳境界为 殊途同归 对于降解杂质 应予以着重关注 1 杂质对照品 定量法 推荐采用HPLC 归一化法 波长的确定可通过 分别对所检测出的各物质通过二极管阵列检测器进行波长扫描 确定各物质吸收基本相同的波长予以测定 通过最好能找到找到亦专属性强的容量分析法 然后采用电位滴定予以佐证HPLC法结果 引申至主成分对照品纯度验证 同样可以如此 着重阐述 对于降解杂质 应予以着重关注 2 杂质对照品定位 主成分自身稀释法 该法是在无法长期提供纯度较高 满足定量检测的杂质对照品情况下采用 但仍能提供纯度不高 可供于定位的杂质对照品 此时 一定要知晓该杂质对于主成分的 校正因子 在进行质量研究时 得到少部分已知准确纯度的该杂质对照品 配制与主成分相同浓度的混合溶液 连续进样数次得到平均峰面积 然后计算出各杂质对于主成分的校正因子 校正因子在0 9 1 1间时便可忽略 范围外均应予以详注 对于降解杂质