儿童EB病毒感染研究进展

EB病毒感染性疾病研究进展 概述 1964年Epstein和Barr首次在Burkitt BL 淋巴瘤体外培养细胞株分离出疱疹样病毒 故命名为EB病毒 Epstein Barrvirus EBV 属于疱疹病毒科 亚科中唯一能引起人类感染的淋巴滤泡病毒 EB病毒具有嗜B淋巴细胞特性 能够在B淋巴细胞中建立起隐性感染 刺激细胞增生和转化 1968年 发现是传染性单核细胞增多症病因 1970年发现鼻咽癌组织中存在有EB病毒DNA EB病毒分子生物学特征 EB病毒属于一种双链DNA病毒 两种形式 线状DNA 可整合于宿主DNA 与环状DNA 游离体 形态 呈球形 直径 150 180nm 最外层为脂蛋白包膜 包膜内是对称的20面体核衣壳 由162个管状粒组成 核衣壳内有直径为45nm的致密体 内含病毒基因组基因结构 由DNA顺序长区段 UL 构成 可分为5段 其中掺杂一短区段 US 的重复 两端有末端重复序列 TR EB病毒抗原 基因组为172000bp 编码五种病毒蛋白 壳抗原 Viralcapsidantigen VCA 膜抗原 Membraneantigen MA 早期抗原 earlyantigen EA 补体结合抗原 即可溶抗原S 病毒相关核抗原 EBVassociatednuclearantigen EBNA 流行病学史 EBV感染世界各地均有发生传染源 隐性感染者和患者传播途径 通过口咽分泌物经密切接触传染易感染人群 普遍易感 90 的成人在儿童时期曾有无症状感染根据血清学调查 我国3 5岁儿童的EBVVCA IgG抗体阳性率达90 以上 EB病毒感染 易感细胞 B细胞部位 呼吸道粘膜感染途径 病毒外膜糖蛋白gp350 220与CD21结合 补体分子C3d受体 通过受体介导的细胞内吞作用进入被感染细胞 EB病毒感染形式 EB病毒感染 A B 隐性感染 溶细胞性感染 转化细胞 缺陷性感染 隐性感染 I型隐性感染 出现在BL的恶变细胞中 病毒产物有EBNA1和EBER II型隐性感染 涉及鼻咽癌和何杰金氏病 HD 病毒产物有EBNA1 LMP1 LMP2 EBER和BamHIA片段的转录产物等 III型隐性感染 见于免疫抑制患者的浆细胞淋巴瘤细胞 病毒隐性感染期的6种EBNA 3种LMP和两种EBER均可以被检测到 IV型隐性感染 仅发生在健康的病毒携带者B淋巴细胞中 这些细胞中含有EBNA1 LMP2以及EBER1RNA 溶细胞性感染 环状DNA解链成线状DNA表达病毒复制蛋白如早期蛋白 晚期蛋白细胞溶解 释放子代病毒 缺损性感染 不完整的病毒基因组缺损性感染能够利用细胞间的传递方式进行扩散多见于免疫部分缺陷者 细胞转化 B细胞转化 静止B淋巴细胞 当感染EB病毒后 10 左右可转化为淋巴母细胞样细胞系 LCL NK细胞转化T细胞转化 EB病毒感染 A B 淋巴细胞增生性疾病 非淋巴细胞的恶性肿瘤 自身免疫性疾病 EB病毒感染所致疾病 原发感染 传染性单核细胞增多症 Infectiousmononucleosis IM 由EBV感染引起的淋巴细胞良性增生性疾病典型表现 发热 咽峡炎 淋巴结肿大 肝脾肿大 皮肤黏膜皮疹 外周血淋巴细胞增多并出现异型淋巴细胞 为EBNA阳性的B细胞 婴幼儿期不典型 不能对EB病毒产生充分的免疫反应 本病可侵犯全身多个脏器 临床呈多样化 易误诊 临床类型 咽炎型 腺热型 淋巴结肿大型 肺炎型 肝炎型 胃肠型 肾炎型 皮疹型 脑炎型 心脏型及生殖腺型等 并发症 咽部继发性感染 脾破裂 胃肠道出血 自身免疫溶血性贫血 再障 粒细胞缺乏症及血小板减少症等 腭扁桃体淋巴组织增生 慢性扁桃体炎部分病原是由EBV感染所致30多例腭扁桃体淋巴组织增生组织的EB病毒检测 几乎100 的切片中可见个别或少数EBERs阳性B淋巴细胞的存在呈EA D原位杂交阳性 即呈EB病毒溶解性感染巢式PCR显示 所检测到的EB病毒可以是30bp缺失型LMP1株 连锁淋巴细胞增生综合征 X linkedlymphoproliferativesyndrome XLP XLP是一种与EB病毒感染相关的以性连锁免疫缺陷为特征的家族性遗传病XLP为SH2PIa基因突变所致 SH2PIa基因编码T细胞及NK细胞信号传导的蛋白质 突变可致T细胞失控性增生主要临床特征为EBV感染后出现骨髓危象 低丙种球蛋白血症及淋巴细胞增生综合征大约有75 在发病后几周内死于致死性IM 包括失控的恶性淋巴瘤或B淋巴细胞恶性增生浸润器官的衰竭 病毒相关的噬血细胞综合征 Virus associatedHemophagocyticsyndrome VAHS 噬血细胞综合征是以组织中组织细胞显著增生及血细胞显著的吞噬作用为共同特点 在组织学基础上命名感染性噬血细胞综合征目前认识到可有细菌 病毒 或霉菌感染所致 其中EBV最常见病理机制 感染导致NK细胞功能低下或缺如 导致抗原驱动T细胞持久激活和巨噬活化因子产生 分泌超量的细胞因子 细胞因子风暴 使T淋巴细胞及巨噬细胞本身处于失去控制的活化状态 VAHS诊断标准 1 发热超过1周 热峰 3815 2 脾脏肿大 肋下 3cm 3 全血细胞减少 非骨髓增生减低引起的2或3系细胞减少 血红蛋白 90g L 血小板 100 109 L 中性粒细胞 1 109 L 4 高甘油三酯 TG 血征和 或 低纤维蛋白原血征 空腹TG 210mmol L或大于同年龄正常值的3个标准差 纤维蛋白原 115g L或小于同年龄正常值的3个标准差 5 组织病理学改变为脾 淋巴结 骨髓组织细胞增生并见噬血细胞现象 无恶性肿瘤证据 6 自然杀伤细胞 NK 活性降低或缺乏 7 高铁蛋白血征 500 g L 8 可溶性CD25升高 2400IU ml 慢性活动性EB病毒感染 chronicactiveEBvirusinfection 定义 是一种EB病毒感染后异常抗EBV抗体增高和EBV DNA升高 可出现慢性或复发性传染性单核细胞增多症样症状 同时易发展为淋巴瘤 病毒相关噬血细胞综合征 间质性肺炎 中枢神经系统病变进而发展为多脏器衰竭的的淋巴组织增生性疾病 CAEBV的发病机制 宿主免疫调节紊乱B淋巴细胞T淋巴细胞NK细胞穿孔素基因突变病毒基因的调节紊乱染色体畸变 CAEBV的临床特征 三大突出表现 持续或间断发热 肝脾肿大和淋巴结病其他常见的临床症状和体征 定期或持续疲劳 咽喉痛疼 淋巴结触痛 贫血 肌肉酸痛 关节痛 牛痘样水疱及蚊虫过敏 CAEBV的合并症 血液系统 感染相关性噬血细胞综合征 血小板减少性紫癜 弥散性血管内凝血病 白血病 T细胞和NK细胞淋巴瘤等 呼吸系统 间质性肺炎和胸腔积液 中枢神经系统 急性和慢性损害 急性损害包括脑炎 脑膜炎 脑膜脑炎和末梢神经炎等 慢性损害表现为感染后炎症反应造成脑组织脱髓鞘样改变 临床出现慢性 反复性中枢神经系统症状消化系统 消化道溃疡 腹泻 肝炎 肝硬化和肝功能衰竭眼睛 可致突眼症 视网膜炎皮肤 除了牛痘样水疱及蚊虫过敏外 还可表现为各种皮损如干燥综合征 不典型皮疹及口腔溃疡等心血管 冠状动脉瘤 心瓣膜病 心肌炎 心内膜炎 脉管炎 其中以冠状动脉瘤 心瓣膜病最为常见其他 肾损伤 脓毒症等 CAEB分型 根据CAEBV病变细胞膜免疫分为二类型 T细胞亚型 最常见 较重 进展较快 临床特征 高热及高滴度EBV相关抗体 易发生肝肿大和淋巴结病 此型可能与EBV裂解期感染有关 病理机制 主要是T细胞的激活及细胞因子如IFN TNF 的释放导致了严重的炎症反应及发热NK细胞亚型 较轻 进展慢 临床特征 以蚊虫过敏及相应的皮肤损害 骨髓或外周血中大颗粒样异常淋巴细胞增多及IgE增高为其特征 病理机制 外周血中IL 13明显增高 IL 13为TH2细胞分泌因子 能促进B淋巴细胞分化 从而分泌抗体并转化为IgE抑制巨噬细胞和单核细胞的细胞毒性功能 CAEBV实验室检查 外周血像 各类血细胞减少 外周血一系或多系减少 其中以是血红蛋白和血小板减少多见 少部分患者白细胞和血小板会升高 肝功能 血清转氨酶升高 可占90 以上 其他较常见的有高胆红素血症 主要是间胆升高为主 白蛋白降低 高甘油三酯血症 凝血功能 有凝血功能障碍时表现为凝血酶原时间 PT 延长 部分凝血活酶时间 APTT 延长 纤维蛋白原 FIB 下降 D 二聚体升高骨髓检查 骨髓像提示多数病例为正常骨髓像 一些病例表现为血细胞减少 如并发噬血细胞综合征 活动期可发现骨髓中有明显组织细胞增多伴噬血现象 但无恶变证据影像学检查 针对受累器官进行影像学检查 CAEBV诊断标准 I EBV感染开始症状一直持续6个月以上 EBV抗体滴度异常 包括抗VCA IgG 1 5120 抗EA抗体 1 640或EBNA抗体 1 2II 主要脏器受损的组织学标志包括如间质性肺炎 骨髓某成分的增生不良 视网膜炎 淋巴结炎 脑膜脑炎 迁延性肝炎 脾肿大 III 证实受损组织中EBV数量增加 受损组织中EB病毒DNA EB病毒RNA或蛋白增多或外周血中EB病毒DNA水平增高诊断CAEBV需满足上述每一项中的至少一条 并排除任何已知的免疫功能低下包括HIV感染 SCAEBV诊断标准 注 诊断SCAEBV需满足上述每项中的至少1条 SCAEBV患者随后有可能发展为B或T细胞淋巴异常增殖性疾病 EBV感染的实验室诊断 抗体检查 抗原检查 基因诊断技术 抗体的临床意义 VCA IgM抗体在感染早期出现 可持续数周到3个月VCA IgG在病程进入恢复期后滴度下降 以低水平维持终身VCA IgA在急性期以及有病毒点力时出现 阳性率低于IgMEA是病毒增殖的标志 EA抗体在原发感染恢复期和潜伏感染再活化期出现 其出现略迟于VCA IgM 持续数月至1年EBNA 1 IgG 病毒基因组处于潜伏状态 此时细胞只合成EBV核抗原EBV感染四种组合抗体检查 VCA IgM VCA IgG EA IgG EBNA 1 IgG EBVviralloadinwholebloodreflectsclinicalstatusinpatientswithinfectiousmononucleosis allogeneictransplant andnasopharyngealcarcinoma EBV感染的治疗 无特效治疗方法抗病毒治疗 阿昔洛韦 更昔洛韦抑制DNA聚合酶及病毒在裂解感染时的复制 可使病毒载量下降 但作用短暂 停药后病毒载量复又上升 而且通常对临床症状和体征无明显改善抗B淋巴细胞 抗CD21和CD24 抗体被表明对EBV相关性B细胞淋巴组织增生的移植患者和先天性免疫缺陷综合征有一定疗效 免疫调节剂 如 干扰素 干扰素或IL 2被认为能抑制EBV相关的T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖性疾病并有用于治疗CAEBV和合并NK细胞活性下降的病例报道单克隆抗体疗法及细胞疗法 输注自体EBV特异