动物细胞工程-第四章第二节细胞培养液_第1页
动物细胞工程-第四章第二节细胞培养液_第2页
动物细胞工程-第四章第二节细胞培养液_第3页
动物细胞工程-第四章第二节细胞培养液_第4页
动物细胞工程-第四章第二节细胞培养液_第5页
已阅读5页,还剩30页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

第四章细胞培养液 培养液是模拟细胞在体内生存的生理环境 是维护组织细胞生存 生长及进行细胞培养各项操作中所需的基本液体 4 2 1细胞培养的常用液体 高纯化水 蒸馏水 密封 短储 离子交换水 含有有机物 胶原酶溶液 C6H14N2O2 7 谷氨酰氨培养液 谷氨酰胺在细胞代谢过程中起重要作用 合成培养基中都要添加 一般配制为100倍浓缩液 配制时应加温至30 完全溶解后过滤除菌 分装至小瓶 储存于 20 使用时 在每100ml培养液中加入0 5 2ml谷氨酰胺母液 终浓度为1 4mmol L 谷氨酰胺在溶液中不稳定 4 放置7天可分解50 两周以上要重新加入原来量的谷氨酰胺 1 培养基的基本要求 4 2 2培养基 L 精氨酸 胱氨酸 组氨酸 络氨酸 浓度 5 20 常用10 血清来源 牛血清 胎牛血清 新生牛血清 小牛血清 马血清 鸡血清 兔血清 羊血清 人血清等 血清的不同批号含有不同的成分 所以许多人发现 应该在使用前对血清进行测试 大多数试剂商提供样品 所满意的批号即可选用 这样可以一次得到足够一年用量的血清 血清在使用前通常在56 加热30分钟 这一过程称为灭活 常用的合成培养基 液 1 199培养基 1950年为培养鸡胚细胞研制的 199培养基含有多达69种成分 其组成成分虽然很多 但单独使用时只能维持细胞存活数天 在加入血清后可以维持很多种细胞的生长 DMEM A 细胞培养基 粉末型 成份 3 RPMl1640培养基 最初为培养小鼠白血病细胞的需要而制备 RPMl1640其组成较为简单 但可以适应很多种类细胞的生长 不仅肿瘤细胞 而且很多正常组织细胞可用RPMI1640进行体外培养 HamF12 DMEM 1 1 补加HEPES NaHCO3 A 添加成分a 促贴壁物质 纤连蛋白 层黏连蛋白 分裂素及分化因子 b 促生长因子及激素 EGF BFGF FGF ECGF IGF 1 PDGF等 c 酶抑制剂 无血清培养基中必须含有 大豆胰酶抑制剂 d 结合蛋白 转运蛋白 转铁蛋白 牛血清蛋白 e 微量元素 硒B 使用方法

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论