南医大药物分析第09章二氢吡啶类药物分析-2015

第九章二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析TheAnalysisofdihydropyridinesdrugs 学习要求 1 掌握 二氢吡啶类 DHP 药物的基本结构 典型药物结构特征 鉴别方法 理化性质与分析方法间关系 铈量法测定DHP类药物的原理2 熟悉 DHP类药物有关杂质的检查方法3 DHP类药物体内分析样品的处理方法 二氢吡啶类 dihydropyridines DHP 药物是钙拮抗剂 Calciumantagonists 又称钙通道阻滞剂 Calciumchannelblockers 临床上钙拮抗剂主要用于治疗高血压 心绞痛 心律失常 充血性心肌病及缺血性心脏病等 是一类应用广泛的心血管药物 Ch P2010年收载17种本类药物 钙拮抗剂 CalciumAntagonists 也叫钙通道阻滞剂 CalciumChannelBlockers 主要通过阻断心肌和血管平滑肌细胞膜上的钙离子通道 抑制细胞外钙离子内流 使细胞内钙离子水平降低而引起心血管等组织器官功能改变的药物 第一节二氢吡啶类的结构与性质 一 常见药物的结构与物理性质 含有苯环 1 4 二氢吡啶环和NH基 3 5位酯基为必要基团 酯基中烷氧基不同活性不同 当一侧烷氧基体积增大时 则活性增大 4位为苯环取代 苯环邻位和间位有吸电子基团时活性增强 NO2 Cl等 2 6位多为低级烷基 至少一侧为低级烷基时有利于增加活性 R1 R2 R3 R4 R5的不同 形成不同的药物 硝苯地平 Nifedipin 尼群地平 Nitrendipin 2 6 二甲基 4 2 硝基苯基 1 4 二氢 2 6 二甲基 4 3 硝基苯基 1 4 二氢 3 5吡啶二甲酸甲乙酯 3 5 吡啶二甲酸二甲酯 心痛定 拜新同 尼莫地平 Nimodipine 尼索地平 Nisodipine 4 3 硝基苯基 2 6 二甲基 1 4 二氢吡啶 3 5 二甲酸甲氧基乙基酯异丙酯 非洛地平 与尼群地平相似 苯磺酸氨氯地平 络活喜 安内真 AmlodipineBesylate2 2 氨基乙氧甲基 4 2 氯苯基 1 4 二氢 6 甲基 3 5 吡啶二甲酸甲乙酯苯磺酸盐 盐酸尼卡地平尼伐地平 Nilvaldipine NicardipineHydrochloride 2 6 二甲基 4 3 硝基苯基 1 4 二氢吡啶 3 N 苄基 N 甲基氨基 乙酯 5 甲酯盐酸盐2 氰基一1 4一二氢一6一甲基 4 3一硝基苯基 一3 5 二羧酸3一甲酯6 异丙酯 尼伐地平与尼索地平结构相似 二 主要理化性质 1 二氢吡啶环的还原性 可用氧化还原反应鉴别或含量的测定 铈量法 2 硝基的氧化性 苯环上的 NO2具有氧化性 可与还原剂 如锌粉 还原为芳伯氨基 重氮化 偶合反应3 二氢吡啶环氨基质子解离性质 DHP与碱作用可发生解离 与苯环形成共轭而发生颜色变化 橙红色 OH H 4 光的不稳定性 DHP药物遇光发生光化学歧化作用 杂质来源 5 旋光性 C4 手性碳6 生物碱的特性7 UV吸收光谱特性 表 二氢吡啶类药物的紫外吸收特征 药物溶剂浓度 g ml max min 硝苯地平无水乙醇15237 320 355宽吸收 尼莫地平乙醇10237 尼群地平无水乙醇20236 353 303 尼索地平无水乙醇10237 非洛地平乙醇20238 261 第二节鉴别试验 一 化学鉴别法 一 与亚铁盐反应 DHP药物 Fe OH 2 Fe OH 3 红棕色 尼群地平的鉴别 乙醇2ml 溶解 1 5mol LH2SO41滴 0 5mol LKOH1ml 振摇 本品约20mg 5 NH4 2Fe SO4 22ml 灰绿色沉淀变为红棕色 二 与氢氧化钠试液反应DPH药物 NaOH DHP药物 橙红色 硝苯地平 尼群地平 尼索地平 硝苯地平鉴别 ChP2010 取本品约25mg 加丙酮1ml 加20 氢氧化钠试液3 5滴 溶液显橙红色 三 沉淀反应 DHP类药物具有生物碱特性 酸性水溶液中 常可与重金属盐类 碘化铋钾 碘化汞钾 碘 碘化钾 二氯化汞等 和大分子的酸类 磷钼酸 硅钨酸等 沉淀剂反应生成难溶盐或不溶性盐 复盐或配位化合物沉淀 而作鉴别 例如 尼莫地平 氯化汞醇试液 白色 尼群地平 碘化铋钾试液 橙红色复盐 尼莫地平注射液鉴别 ChP2010 取本品适量约20mg 置分液漏斗中 加乙醚30ml振摇提取 静置 分取乙醚层 置水浴上蒸干 放冷 残渣加乙醇2ml 搅拌使溶解 移至试管中 加1 氯化汞溶液3ml 即发生白色沉淀 尼群地平软胶囊鉴别 取本品的内容物4g 加乙醇稀释至10ml 加碘化铋钾试液1ml 即发生橙红色浑浊 四 重氮化 偶合反应 原理 硝基地平经还原后 生成有芳伯胺结构的物质 在弱酸条件下亚硝酸盐重氮化后 再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料 硝基地平 BP 取供试品约25mg 加10ml盐酸 水 乙醇 1 5 3 5 5 温热 加锌粒0 5g 5min后滤过 0 1mo1 L亚硝酸钠溶液5ml 加氨基磺酸胺 滴加碱性盐酸萘乙二胺试液2ml 生成红色 二 分光光度法 一 UV法 本类药物有UV吸收 尼群地平软胶囊鉴别 ChP2010 取本品的内容物1g 置100ml量瓶中 加无水乙醇稀释至刻度 摇匀 取10ml 置100ml量瓶中 加无水乙醇稀释至刻度 照分光光度法 二部附录 在353nm与303nm的波长处测定吸收度 比值应为2 1 2 3 二 红外光谱法 尼群地平软胶囊鉴别 ChP2010 本品约100mg丙酮10ml暗处挥干 溶解 过滤 滤液 残渣减压干燥 依法测定IR谱 尼群地平红外鉴别 ChP2010 三 色谱法 一 HPLC法 尼莫地平片鉴别 ChP2010 依法测定 供试品的主峰和对照品主峰的tR一致 二 TLC法 硝苯地平 尼莫地平片 注射液等鉴别 BP 硝苯地平鉴别 USP33 依法测定供试品的Rf值一致 第三节有关物质的检查 2 6 二甲基 4 2 硝基苯基 1 4 二氢 3 5 吡啶二甲酸二甲酯 2 6 二甲基 4 2 硝基苯基 3 5 吡啶二甲酸二甲酯 2 6 二甲基 4 2 亚硝基苯基 3 5 吡啶二甲酸二甲酯 硝苯地平降解氧化产物 杂质I 2 6 二甲基 4 2 硝基苯基 3 5 吡啶二甲酸二甲酯杂质II 2 6 二甲基 4 2 亚硝基苯基 3 5 吡啶二甲酸二甲酯 采用HPLC进行有关物质检查 杂质检查方法 供试液I 1mg ml供试液II 0 2mg ml对照品I 杂质I 10 g ml 杂质II 20 g ml 对照品II 硝基地平 2 g ml 杂质I 1 g ml 杂质II 1 g ml HPLC法测定 流动相 甲醇 水 60 40 检测波长 为235nm 硝苯地平的有关物质检查方法为 精密量取供试品溶液 I 与对照品溶液 II 各20 l 分别注入液相色谱仪 记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍 供试品溶液 I 色谱图中如有与对照品溶液 II 色谱图中杂质A与B相应的峰 其峰面积不得大于对照品溶液 II 色谱图中杂质A和B的面积 0 1 如有其他杂质峰 单个杂质峰面积不得大于对照品溶液 II 中硝苯地平的峰面积 0 2 杂质峰面积总和不得大于对照品溶液 II 中硝苯地平的峰面积2 5倍 0 5 同理得 杂质II 0 1 第四节含量测定 一 铈量法硫酸铈作滴定剂具有高的氧化电位 且为一价还原 不存在对环取代基的副反应 专属性高 本法既可用于原料 亦可用于片剂的测定Ce4 eCe3 Red 硝苯地平的含量测定 铈量法 ChP 2010 原料药 橙红色无色 硝苯地平含量测定 2010 取本品约0 4g 精密称定 加无水乙醇50ml 微热使溶解 加高氯酸溶液 取70 高氯酸8 5ml 加水至100ml 50ml 邻二氮菲亚铁指示液3滴 立即用硫酸铈滴定液 0 1mol L 滴定 至近终点时 在水浴中加热至50 左右 继续缓缓滴定至橙红色消失 并将滴定的结果用空白试验校正 每1ml硫酸铈滴定液 0 1mol L 相当于17 32mg的C17H18N2O6 本法 ChP 2010 硝苯地平 尼莫地平 尼群地平 非洛地平等BP 2010 硝苯地平 尼莫地平 尼群地平等USP 33 尼莫地平 二 紫外可见分光光度法 尼群地平测定 对照品溶液的制备 加无水乙醇制成含20 g ml的溶液 供试品溶液的制备 取内容物适量 用无水乙醇稀释成约20 g ml的溶液 取对照品的溶液与供试品溶液 在353nm波长处分别测定吸收度 计算 即得 三 HPLC法 原料和制剂 尼莫地平分散片 HPLC外标法色谱条件 C18柱流动相 甲醇