精选总结-糖化血红蛋白

HbA1c检测及标准化 1 HbA1c与糖尿病糖尿病诊疗指南HbA1c检测HbA1c检测标准化进程我国HbA1c检测现状及标准化结 内容 2 糖尿病的流行病学 据国际糖尿病联盟 IDF 统计 2000年全球DM为1 51亿 2011年达2 85亿 预计2030年达5亿 中华医学会糖尿病学分会 CDS 调查显示 20岁以上人群中糖尿病患病率为9 7 糖尿病前期更高达15 5 1 4高血糖状态 我国60 7 糖尿病患者未被诊断而无法及早治疗 中国2型糖尿病防治指南 2010年版 3 糖尿病的危害 糖尿病 第3位致死原因 60 70 的患者存在神经损害 4 糖化血红蛋白 葡萄糖 G 6 P 果糖 血红蛋白 血红蛋白 糖 糖化血红蛋白和HbA1c 糖化血红蛋白 GHb 血红蛋白氨基酸残基与糖的氨基化合而成的产物 HbA1c 血红蛋白两条 链N端的缬氨酸残基与葡萄糖的氨基化合而成的产物 HbA1c 糖 糖 5 血红蛋白及糖化血红蛋白的种类 糖 6 糖化HbA HbA 两条 链 两条 链 1 6 二磷酸果糖 6 磷酸果糖 丙酮酸 葡萄糖 HbA1a1 HbA1a2 HbA1b HbA1c HbA0 在HbA1中主要的成分是HbA1c 约占60 糖化血红蛋白的术语应为HbA1c 可缩写为A1C HbA1 7 HbA1c的形成过程 Amadori 缓慢的非酶促的不可逆的 8 2 糖化血红蛋白 比例高低的决定因素 血糖浓度 血糖与血红蛋白的接触时间 红细胞的存活时间 HbA1c形成的影响因素 9 HbA1c与糖尿病 10 DiabetesControlandComplicationsTrial 试验简介 在美国和加拿大以1441名1型糖尿病患者为对象 29家医疗机构 分为2组治疗 一组是传统治疗法 一组为强化胰岛素疗法 进行了9年的跟踪调查 结论 进行严格的血糖管理 可以有效地控制糖尿病并发症的发生和发展 11 DCCT研究 1984 1993 当HbA1c测定值降低1 使糖尿病相关并发症发生的风险降低21 相关死亡降低25 患者总死亡率降低17 患者心肌梗死的风险降低18 脑卒中风险降低15 眼和肾继发性疾病的风险降低35 12 血糖 糖化血红蛋白 采血时的血糖值 血红蛋白的寿命120天 2 3个月的平均血糖值 反映血糖期间 现在 过去 HbA1c在糖尿病中的作用监测2 3个月血糖控制的总体水平 平均血糖估计值 30 9 HbA1c值 60 6 DCCT 13 临床意义 ADA建议HbA1c控制目标是 7 因人而异HbA1c可作为糖尿病患者长期血糖控制的监测指标 血糖控制达标的糖尿病患者每半年检查一次HbA1c 血糖控制未达标或治疗方案调整后 糖尿病患者应每3个月检查一次HbA1c HbA1c在糖尿病中的作用评价血糖控制的 金标准 2002年ADA 14 微血管并发症 心肌梗死 HbA1c 37 14 HbA1c在糖尿病中的作用降低HbA1c浓度减少糖尿病并发症 糖尿病死亡率 21 1 Source StrattonIM etal BMJ2000 321 405 412 15 HbA1c在糖尿病中的作用影响患者长期预后 DCCT和UKPDS的研究均显示 HbA1c浓度越低 1型和2型糖尿病患者微血管和大血管并发症发生或进展的几率越低 source TheDiabetesControlandComplicationsTrialResearchGroup NEnglJMed1993 329 977 86UKProspectiveDiabetesStudyGroup Lancet1998 352 837 53 16 HbA1c在糖尿病中的作用指导临床用药 更换药物或者调整治疗剂量ADA EASD指南推荐HbA1c变化 0 5 临床有意义的变化指导临床医生药物的选择 不同的HbA1c水平 空腹和餐后血糖对HbA1c影响不同 餐后血糖 空腹血糖 HbA1c 17 糖尿病与HbA1c糖尿病诊疗指南HbA1c检测HbA1c检测标准化进程我国HbA1c检测现状及标准化小结 内容 18 ADA EASD IDF专家委员会2008共识 19 糖尿病的诊断标准2008 20 2010年ADA糖尿病诊治指南增加糖化血红蛋白 HbA1c 6 5 作为糖尿病的诊断标准 source www care diabetesjournals org 21 2011年 WHO同意将HbA1c作为糖尿病辅助诊断指标HbA1c从治疗监控转型为诊断指标 22 中国糖尿病诊治指南采用WHO 1999 诊断标准 23 因HbA1c 6 5 的切点是否适合我国人群尚未在我国人群中验证 且我国HbA1c检测方法的标准化程度不够 测定的仪器和质量控制尚不能符合目前糖尿病诊断标准的要求 因此目前暂不推荐应用HbA1c诊断糖尿病 中国血糖监测临床应用指南 年版 中国血糖监测临床应用指南 2011 24 中国成人2型糖尿病HbA1c控制目标的专家共识 2010年 虽然目前HbA1c尚未纳入 中国糖尿病诊疗指南 中 但HbA1c在治疗中的重要性日益彰显 25 糖尿病与HbA1c糖尿病诊疗指南HbA1c检测HbA1c检测标准化进程我国HbA1c检测现状及标准化小结 内容 26 HbA1c的检测方法 27 HbA1c的检测方法 28 离子交换HPLC法 ADA推荐参考方法 29 非糖化血红蛋白 HbA0 链N 端带正电荷当被糖基化 HbA1c 正电荷减少 离子交换HPLC洗脱原理 按照电荷差异性 30 离子交换HPLC洗脱原理 按照电荷差异性 His Leu Thr Val HbA1B chain Val His Leu Thr Val His Leu Thr HbA1A1 chain HbA1A2 chain Fru G6 Val His Leu Thr HbA0 chain Val His Leu Thr Gluc HbA1C chain HbF 慢 快 31 亲和层析法 32 Val His Leu Thr Gluc NH B OH OH OH O O 亲和层析法检测的是总糖化血红蛋白 GHb 包括HbA1c和在其他位点被糖基化的血红蛋白 Val His Leu Thr 固相 苯基硼酸柱 亲和层析图谱 亲和层析法检测原理检测总糖化血红蛋白 GHb 33 酶法 34 酶法检测原理 积水医疗 蛋白酶酶切 第一步 Hb浓度测定 第二步 HbA1c浓度测定 果糖基肽氧化酶 FPOX H2O2 过氧化氢酶 POD 显色剂 显色 35 需要采集血球标本再进行溶血处理半自动操作 速度慢 36 全血直接检测比色法检测Hb免疫竞争抑制法检测HbA1c检测的高特异性和精确性 检测IFCC参考系统定义的真正的HbA1c 免疫法反应原理 37 ReactionkineticsofthetwintestmodeonINTEGRAandcobascsystemswithTina quantHbA1creagents 双胞试验 同一比色杯同时检测Hb和HbA1c 计算或转换为NGSP或IFCC数值提高精密度优化通量 免疫法原理检测技术 38 电泳法 原理各种蛋白质都有其等电点 蛋白质在一定条件下带有不同电荷 在电场中泳动不同优点 干扰少不足 1 需成批进行 无法进行实时检测 速度比较慢2 自动化程度低 急诊插入 自动维护等功能比较欠缺 3 商品化产品少 用于科研 HbA0 HbA1c HbA1aHbA1b 39 影响HbA1c测定结果的因素 40 40 HbA1c的测定结果取决于血糖水平 TaharaYetal DiabetesCare 1993 16 9 1313 1314 Fitzgibbons etal JClinInvest 1976 41 820 824 41 糖化血红蛋白水平反映的是在检测前120天内的平均血糖水平 HbA1c的测定结果取决于血糖水平 41 HbA1c与空腹血糖及餐后血糖有很好线性相关 ItoC etal DiabetesResearchandClinicalPractice 2000 50 225 230 42 42 HbA1c随年龄而变化 目前HbA1c未因年龄差异制定不同的控制目标 PaniLN etal DiabetesCare 2008 31 1991 1996 43 所有个体 女性 男性 43 血红蛋白类型及水平异常干扰HbA1c检测方法 RobertsWL etal ClinChem 2005 51 776 778 CoxT etal AmJClinPathol 1993 99 2 137 141 BryL etal ClinChem 2001 47 2 153 163 44 目前许多检测方法可对大部分常见血红蛋白亚型进行校正 但部分方法检测结果仍会受到血红蛋白亚型的干扰 以CLC330的HPLC方法为参照方法 比较了11种检测方法对HbA1c AA AC AS 检测结果的影响P 0 01时 临床上有显著差异 统计学上有显著差异 与HbAA的差具有显著性意义 44 检测方法对HbA1c结果的影响 BryL etal ClinChem 2001 47 2 153 163 45 当糖化血红蛋白遗传学异常或是生化修饰异常时 不同的检测方法所测定的HbA1c结果可能不同 45 不同地域的HbA1c水平存在差异 杨历新 等 中华内分泌代谢杂志 2012 28 5 412 413 46 海拔愈高 居留时间愈久 红细胞 Hb也愈多 HbA1c红细胞水平愈高 高海拔地区人群的血红蛋白水平升高 与平原 低海拔地区人群的血红蛋白水平差异很大分析处于高海拔地区人群的HbA1c检测结果时需要特别谨慎 46 部分饮食和药物影响HbA1c的检测结果 BoeingH etal AmJClinNutr 2000 71 5 1115 1122 BryL etal ClinChem 2001 47 2 153 163 JainSK etal FreeRadicBiolMed 2007 43 8 1124 1131 JainSK etal JAmCollNutr 1996 15 5 458 461 IwamotoY etal JPeriodontol 2001 72 6 774 778 CamargoJL etal ClinChimActa 2006 372 1 2 206 209 47 1773名中年男性和女性的横断面研究 通过饮食和生活方式分组判断对平均HbA1c水平的影响 发现酒精 维生素C和维生素E的摄入量与HbA1c水平显著相关 QuintilesofPAL 1 男性 1 48 女性 1 48 2 男性 1 67 女性 1 63 3 男性 1 87 女性 1 83 4 男性 2 15 女性 2 07 5 男性 2 15 女性 2 07 对照组 Quintile1 低HbA1c 47 社会经济状况和心理状态 自我控制能力低 合作能力差 社会支持少的人HbA1c水平较高 DanielM etal PrevMed 1999 29 5 405 413 FeldmanPJ SteptoeA HealthPsychol 2003 22 4 398 405 48 Daniel等多元分层分析 研究社会变化 较低控制 生存条件等心理压力指标对HbA1c的影响 48 HbA1c水平存在种族差异 HermanWH etal DiabetesCare 2007 30 2756 2758 SaaddineJB etal DiabetesCare 2002 25 8 1326 1330 49 HbA1c的种族差异原因尚不明确 制定管理目标时需要考虑此因素 49 特殊的糖尿病类型 刘志文等 中华临床医师杂志 电子版 2011 5 5 1536 7 中华医学会糖尿病学分会 中国1型糖尿病诊治指南 人民卫生出版社 2012 50 有一些临床少见的情况 如进展迅速的1型糖尿病 这时HbA1c就可能没法 赶上 急性血糖变化的速度 检测结果偏低 因而不能反应真实的平均血糖水平 中国病例报告 暴发性1型糖尿病一例 空腹血糖 餐后血糖 随机血糖 50 其他疾病状态对HbA1c的影响 LahousenT etal WorldJGastroenterol 2004 10 15 2284 2286 SchnedlWJ etal ClinLab 2007 53 3 4 179 181 MohanKumarKM etal ClinChimActa 2004 342 1 2 187 192 InabaM etal JAmSocNephrol 2007 18 3 896 903 AbeM MatsumotoK NatClinPractNephrol 2008 4 9 482 483 DiopME etal AIDSResHumRetroviruses 2006 22 12 1242 1247 51 很多其他疾病及为治疗疾病所使用的药物都会对HbA1c水平造成影响 甲亢 脂质过氧化 影响HbA1c检测结果贫血和注射促红素后 幼稚红细胞比例增加 降低HbA1c检测结果HIV感染 抗逆转录病毒药物所导致的亚临床溶血 降低HbA1c检测结果酗酒和肝炎 干扰红细胞生成及降低红细胞寿命 降低HbA1c检测结果抗病毒药物病毒唑联合干扰素治疗 溶血性贫血 影响HbA1c检测结果 51 常见的肝脏疾病对HbA1c检测结果的影响 LahousenT etal WorldJGastroenterol 2004 10 15 2284 2286 52 52 糖尿病与HbA1c糖尿病诊疗指南HbA1c检测HbA1c检测标准化进程我国HbA1c检测现状及标准化小结 内容 53 HbA1c检测标准化进程 54 国际标准化主要组织 IFCC欧州 NGSP美国 JDS日本 JDS和IFCC NGSP协调 已经搞清楚了和其的互换关系式 IFCC値 1 068 JDS値 1 741 NGSP値 0 999 JDS値 0 290 NGSP值 0 0915 IFCC值 2 15 55 不同国家HPLC方法检测值不同 56 NGSP IFCCNGSP参考方法非特异性 以DCCT中BioRex70HPLC为参考方法优点 精密度好 结果长期稳定 CV 3 缺点 非特异 方法间的差异大 如 DCCT NGSP中Bio Rex70HPLC和瑞典Mono SHPLC两种方法在判断限水平的差异达20 确定参考系统IFCC定义的HbA1c 血红蛋白 链N 端缬氨酸被不可逆地糖化 美国标准化 国际标准化 57 国际HbA1c标准化IFCC 国际临床化学学会 参考系统建立特异性检测方法 HbA1c 缺乏统一公认的标准物质和参考方法 三个标准化组织的HPLC检测方法为非特异性 结果各不相同 制备高度纯化的一级标准物质 明确定义HbA1c 建立国际参考实验室网络 建立特异性检测HbA1c的方法 58 国际标准化 2009年时 HbA1c已被标准化 时机已成熟 99 的美国和欧洲的HbA1c检测已被NGSP以DCCT标准标准化方法学已广泛被接受 且妨碍因素几乎均被考虑或最小化所有HbA1c检测方法均必须溯源到IFCC的参考方法 同时必须得到NGSP的认证 59 NGSP IFCC溯源性证书 60 IFCC的参考方法分为三步 IFCC参考方法流程 特异性检测 61 62 IFCC参考方法专利 IFCC参考方法专利号 EP693599 63 ADA EASD IDF IFCC2010国际共识确认IFCC参考系统为全球标准化唯一系统 溯源到IFCC参考系统 64 糖尿病与HbA1c糖尿病诊疗指南HbA1c检测HbA1c检测标准化进程我国HbA1c检测现状及标准化小结 内容 65 2008HbA1c室间质评 66 2011年HbA1c检测仪器现况调查 67 Upperboundaries Lowbounda