环境工程学部学年论文要求.doc

环境工程学部学年论文要求（4月16日之前交）根据人才培养方案要求，本学期安排有学年论文撰写任务。为做好学年论文工作,现提出如下要求，请遵照执行。一、撰写学年论文目的：作为全面提高学生培养质量的一个重要环节，学生必须结合自己专业基础课和专业课程的学习，练习撰写学术论文，其目的有：（1）培养学生综合运用所学的理论和方法，分析解决实践中某一理论问题和实际问题的能力；（2）通过学习撰写学年论文，巩固、充实、深化和提高所学的专业理论知识；（3）通过学习撰写学年论文，掌握调查研究和搜集资料的方法和手段，熟悉学术论文的基本规范和写作方法，为毕业论文撰写打下扎实基础。二、论文基本要求：1、论文题目：根据所学专业基础课及专业课，针对某一个知识点自拟题目。2、论文写作应注意主题明确、结构合理、语言流畅；3、论文内容较为新颖，不得抄袭他人已发表的学术论文，更不能在网上东拼西凑，需要引用时，应注明引文出处；4、论文排版整齐，插图清晰准确，全文篇幅恰当，字数在5 0008 000之间。5、论文上交时间：2010年4月16日前三、论文格式要求：1、论文封面：采用统一的江汉大学文理学院学年论文格式，封面电子版见附件1；若论文题目较长，封面上的论文题目一栏也可作为两行书写。2、论文开本大小：采用标准A4纸（210*297）单面打印，页边距采用默认格式，即上边距2.54cm，下边距2.54cm，左边距3.17cm，右边距3.17cm。3、论文正文题目（小2号黑体，居中打字），题目下空一行，开始写正文。4、论文摘要和关键词：论文摘要应阐述学年论文的主要观点。说明本论文的目的、研究方法、成果和结论。尽可能保留原论文的基本信息，突出论文的创造性成果和新见解。而不应是各章节标题的简单罗列。摘要以150字左右为宜。关键词 是能反映论文主旨最关键的词句，一般3-5个。5、层次和标题：层次应清楚，标题应简明扼要，重点突出，论文分三级标题，具体格式如下：一级标题： 1 （一级标题，左对齐，单列一行，宋体，4号加黑。段前间距为1行，段后无间距）；二级标题：1.1 （二级标题，左对齐，单列一行，宋体，小4号，段前、段后无间距）；三级标题：1.1.1 （三级标题，左对齐，单列一行，宋体，小4号，段前、段后无间距）；6、正文字体：采用宋体小4号，字间距为默认，行间距为固定值20磅；论文中所有英文、罗马字符都采用Time News Roman体，按规定应采用斜体的采用斜体。7、图、表字体：图、表标题可用中英文任一种文字，采用5号宋体加黑；表格中文字、图例说明采用小5号宋体。图、表中术语、符号、单位等应与正文中表述一致。表头居中置于表的上方，表注置于表的下方，图序、图名、图例说明居中置于图的下方。8、页码：按阿拉伯数字连续编排，页码打印在页面下方居中。9、图、表、公式等文中表格均采用标准表格形式（三线表，上下线加黑，可参照正式出版物中的表格形式）。表中参数应标明量和单位。图、表应与说明文字相配合，图形不能跨页显示，表格一般放在同一页内显示。文中的图、表、公式、附注等一律用阿拉伯数字按章节（或连续）编号，如图1，表2，公式（3）等。文中图、表名可以加注英文。10、量和单位的使用：必须符合国家标准规定，执行GB31003102：93有关量和单位的规定（参阅常用量和单位.计量出版社，1996）。单位名称的书写，可采用国际通用符号，也可用中文名称，但全文应统一，不要两种混用。11、参考文献：在正文后空一行(参考文献：四个字采用宋体5号加黑，左对齐，文献具体内容采用宋体小5号)参考文献按顺序编码，作者姓名写至第三位，余者写“，等”或“，et al.”。几种主要参考文献著录的格式：期刊文献格式为：序号 作者. 文题. 刊名（J），年，卷号（期号）：起止页码专著：序号 作者. 书名（M）. 出版单位：年份，版次.起止页码论文集：序号 作者. 文题.编者, 文集名. 出版地：出版者，出版年，起止页码学位论文：序号 作者. 文题：XX学位论文.地点：授予单位，授予年专利：序号 申请者. 专利名. 国名，专利文献种类，专利号，出版日期技术标准：序号 发布单位. 技术标准代号. 技术标准名称. 出版地：出版者，出版日期例如：参考文献：1吴军，刘俊芳，杨利等. 硒在植物生命活动中的作用J .植物生理学通讯，1999，35（5）：57.2郑光华.实用种子生理学 .北京：农业出版社,1990,167171.生物与环境工程学部2010年4月1日 附件1：江汉大学文理学院学年论文封面为了让大家直接引用封面，附件1单独列页，见下页。江汉大学文理学院学年论文论文题目 部 （系） 生物与环境工程学部 专 业 生物技术 姓 名 学 号 指导教师 2010 年 4 月 范文！ 江汉大学文理学院学年论文论文题目 食品中微生物的检测方法研究进展部 （系） 生物与环境工程学部 专 业 生物技术 姓 名 邹羽澄 学 号 200604010165 指导教师 吴春红 2009 年 6 月 食品中微生物的检测方法研究进展摘要：在食品卫生检验方面快速检测食品中微生物的方法起着越来越重要的作用，最终将达到预防肠道传染病和食物中毒的发生的目的。快速方法包括即用型纸片法、生物化学技术、选择鉴定用培养基法、免疫学技术、细菌直接计数法、全自动微生物分析系统等。本文浅谈上述各种快速检测食品中微生物的方法的研究进展。 关键词： 快速检测；食品；微生物随着人们生活水平不断提高，食品安全问题最令世人关注，是热点问题、敏感问题，它直接关系到人民群众生命、健康和社会稳定的重大公共安全问题，而微生物对食品的污染更是备受关注。食品法典委员会（cac）将微生物性健康危害列为食源性危害的三大原因之一。在食品生产、加工、储存、运输、销售等各个环节中都有污染微生物的可能。一旦污染，微生物将大量繁殖而引起食品腐败变质，或导致食源性感染和食物中毒。特别是近年来随着环境污染的加剧和生态平衡的不断破坏，可导致人类感染的致病菌的种类越来越多，病原微生物对人类的威胁越来越大。我国今年微生物性食物中毒比例高达67%。我们餐桌上的食品，须经过一条“从田间到餐桌”漫长产业链，从产品的种植养殖，生产加工，市场流通到存储，运输，其中任何环节出现差错都容易出现大问题。因此，如何有效监控流通领域中食物的微生物污染，已成为中药课程之一。传统的检验方法，主要包括形态检查和生化方法，其准确性、灵敏性均较高，但涉及的实验较多、操作烦琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁重，而且要有大量人员参与1，2。所以，准确、省时、省力和省成本的快速检验方法是社会的迫切需要。所以近几年来形势得到根本性的好转。细菌鉴定、检验的方法有三大类：传统方法、传统法基础上数值化方法、化学及分子生物学的方法，派生出许多方法及仪器。我国以往多用传统的培养法，近几年已大量引进国外新方法和仪器，较广的是： （1）根据碳源的代谢利用率进行鉴定，如API、ATB、VITEK等。 （2）利用抗原和抗体间专一性结合、免疫反应，检验致病菌，即用ELISA法，如VIDAS。 （3）运用基因检测技术检测病原菌，如杜邦的BAX系统，RP系统可用于溯源的。 （4）根据特征性的脂肪酸图谱进行细菌鉴定，如Agilent开发的系统。 （5）基于表面等离子谐振（SPR）生物传感器开发的致病菌检验系统，如Biacore系统。 （6）基于生物芯片为平台，使用致病菌检测试剂盒、检测致病菌的系统，如我国博奥生物已开发出、可检测12种食源性致病菌的生物芯片检测系统 国外著名厂家为Biomerieux、Dupont，Agilant、Biologe、GEHeailhcare和Biacore等；国内以往尚无类似的生产厂家，只有生产抑菌圈测定仪的厂家，这是极大缺陷。可喜的是2000年以来博奥生物公司（生物芯片国家工程中心），已推出了生物芯片检测系统，中科院电子所推出了SPR系列产品。从世界范围讲，致病菌引发案例，是食品安全首位，期待有更多的国产仪器推出、占领这巨大市场。本文对食品中微生物的快速检测的几种方法进行综述，以利于对食品进行筛选和检测。1即用型纸片法3M公司的perrifilmTMPlate系列微生物测试片，可分别检测菌落总数、大肠菌群计数、霉菌和酵母计数3。由RCP Scientific Inc 公司开发上市的Regdigel系列，除上述项目外还有检测乳杆菌、沙门菌、葡萄球菌的产品3，这两个系列的产品与传统检测方法之间的相关性非常好。如用大肠菌群快检纸片检测餐具的表面，操作简便、快速、省料，特异性和敏感性与发酵法符合率高，已经被列为国标方法。使用时应正确掌握操作技术和判断标准，从而达到理想的检测效果4。美国3M公司生产的PF(Petrifilm)试纸还加入了染色剂、显色剂，增强了菌落的目视效果，而且避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷。Petrifilm 系列产品目前在世界各地用的是相当广泛的：在全球，有38个国家有客户在使用；单从美国国内来说，在美国排名前100位的食品企业中，就有83家常规使用该产品。简单来说，这个方法的广泛接受可以归因于其在对结果准确性有很好保证的前提下，还使得操作变得更加简单，方便，快速。对于出口的企业来说，普遍面临的一个问题就是，现行的国标及行业标准检测时间太长，操作也比较繁杂；一些改良的方法虽然简化了步骤，可是准确度却无法得到保证或是方法不一定能被出口国认可。相比之下,3M Petrifilm 的方法得到了包括AOAC, FDA, FSIS, USDA, NMKL, AFNOR, CFRA, DIN 在内的众多国际权威机构的认证认可。这使得检测方法和检测结果在国际上可以更好的被接受。目前在中国,3M Petrifilm系列产品也越来越多被很多食品企业作为日常的检测方法，替代传统的平板使用。在大肠菌群检测方面，国标方法报告的是MPN值而不是每克食品中的大肠菌群数，PF法则可以得出精确数据1。霉菌快速检验纸片，应用于食品检验中的霉菌具有操作简便，仅需36培养，不需要低温设备；快速，仅需2 d就可观察结果，比现在的国家标准检验方法缩短3 d5 d，大大提高了工作效率。纸片法与国标法在霉菌检出率上差异无显著性，且菌落典型，易判定。纸片荧光法利用细菌产生某些代谢酶或代谢产物的特点而建立的一种酶底物反应法。只需检测食品中大肠菌群、大肠杆菌的有关酶的活性，将荧光产物在365 nm紫外光下观察即可。同时纸片可高压灭菌处理，4保存，简化了实验准备、操作和判断6。2生物化学技术2.1 PCR技术 PCR技术采用体外酶促反应合成特异性DNA片段，再通过扩增产物来识别细菌。由于PCR灵敏度高，理论上可以检出一个细菌的拷贝基因，因此在细菌的检测中只需短时间增菌甚至不增菌，即可通过PCR进行筛选，节约了大量时间，但PCR技术也存在一些缺点：食物成分、增菌培养基成分和其他微生物DNA对Taq酶具有抑制作用，可能导致检验结果假阴性；操作过程要求严格，微量的外源性DNA进入PCR后可以引起无限放大产生假阳性结果；扩增过程中有一定的装配误差，会对结果产生影响。最近，美国快力康公司推出了全球第一台PCR全自动检测仪BAX系统，克服手工操作PCR的缺点，能用于检测细菌，敏感性和特异性都非常好7。2.2 基因探针技术建立在DNA杂交基础上的基因探针技术利用具有同源性序列的核酸单链在适当条件下互补形成稳定的DNARNA或DNADNA链的原理，采用高度特异性基因片段制备基因探针来识别细菌。基因探针技术是现代分子生物学中的一种常规技术。用基因探针技术近年来，有关非放射性基因探针、DNA生物传感器探针及分子信标探针等技术研究取得的重要进展，必将加速基因探针技术在食品微生物检测中的应用。基因探针的优点是检测食品中的有害微生物具有特异性强、灵敏度高和操作简便、省时等。减少了基因片段长度多态性所需要分析的条带数。如法国生物一梅里埃公司的GENPROBE基因探针检测系统，对于分离到的单个菌落，30 min完成微生物的确证试验7，基因探针的缺点是不能鉴定目标菌以外的其他菌。3选择、鉴定用培养基法在培养基中加入特异性的生化反应底物、抗体、荧光反应底物、酶反应底物等，可使目标培养物的选择、分离、鉴定一次性完成。如生物一梅里埃公司的BP+RPF(兔血浆+纤维蛋白原)培养基，可在24 h内鉴定金黄色葡萄球菌8。Merk公司的chromocult Coliform Agar培养基上，大肠杆菌为墨绿色至紫色菌落，沙门菌为淡绿色至蓝绿色菌落。柠檬酸杆菌和克雷伯杆菌为橙红色至红色菌落，其他肠道菌为无色菌落9。4免疫学技术免疫学技术通过抗原和抗体的特异性结合反应，再辅以免疫放大技术来鉴别细菌。免疫方法的优点是样品在进行选择性增菌后，不需分离，即可采用免疫技术进行筛选。由于免疫法有较高灵敏度，样品经增菌后可在较短的时间内达到检出度，抗原和抗体的结合反应可在很短时间内完成10。如采用免疫磁珠法可有效地收集、浓缩神奈川现象阳性的副溶血性弧菌，可显著提高环境样品及食品中病原性副溶血性弧菌的检出率11。胶体金免疫层析法能快速、灵敏检测金黄色葡萄球菌12，应用胶体金免疫层析法检测食品中的沙门菌，简便快速，无需特殊仪器设备，适合现场检测之用13。ATP生物发光法是近年发展较快的一种用于食品生产加工设备洁净度检测的快速检测方法。利用ATP生物发光分析技术和体细胞清除技术，测量细菌ATP和体细胞ATP， 细菌ATP的量与细菌数成正比，用ATP生物发光分析技术检测肉类食品细菌污染状况或食品器具的现场卫生学检测，都能够达到快速适时的目标14，15。微型自动荧光酶标分析法(mini VIDAS)是利用酶联荧光免疫分析技术，通过抗原抗体特异反应，分离出目标菌，由特殊仪器根据荧光的强弱自动判断样品的阳性或阴性。VIDAS法检测冻肉中沙门菌具有很高的灵敏度和特异性，用于进出口冻肉的检测，可大大缩短检验时间，加快通关速度16，检测冻肉中李斯特氏菌亦如此17。5细菌直接计数法主要包括流式细胞仪(flow cytometry，FCM)和固相细胞计数(solid phase cytometry，SPC)法。FCM通常以激光作为发光源，经过聚焦整形后的光束垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激发荧光。光散射信号基本上反映了细胞体积的大小；荧光信号的强度则代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，由此可通过仪器检测散射光信号和荧光信号来估计微生物的大小、形状和数量。流式细胞计数具有高度的敏感性，可同时对目的菌进行定性和定量。目前已经建立了细菌总数、致病性沙门菌、大肠埃希氏菌等的FCM检验方法。固相细胞计数可以在单个细胞水平对细菌进行快速检测。滤过样品后，存留的微生物在滤膜上进行荧光标记，采用激光扫描设备自动计数。每个荧光点可直观地由通过计算机驱动的流动台连接到ChemScan上的落射荧光显微镜来检测，尤其对于生长缓慢的微生物，检测用时短使该方法明显优于传统平板计数法。6全自动微生物分析系统(AMS)AMS是一种由传统生化反应及微生物检测技术与现代计算机技术相结合，运用概率最大近似值模型法进行自动微生物检测的技术，可鉴定由环境、原料及产品中分离的微生物。AMS仅需4 h18 h即可报告结果，以常规法鉴定细菌，只能得到是或不是某种菌，要想知到是哪种菌还要做大量、烦琐的生化试验，而AMS则可以直接报告是什么菌。法国生物梅里埃集团公司出品的VitekAMS自动微生物检测系统属当今世界上最为先进、自动化程度最高的细菌鉴定仪器之一。Vitek对细菌的鉴定是以每种细菌的微量生化反应为基础，不同种类的Vitek试卡(检测卡)含有多种的生化反应孔，可达30种，可鉴定405种细菌。用AMS明显缩短肠道菌生化鉴定的时间，如鉴定沙门菌属只需4 h，鉴定志贺氏菌属只需6 h，鉴定霍乱弧菌等致病性弧菌亦只需4 h13 h。Biacore技术 BIA技术是基于一种表面等离子共振(SPR)的物理光学现象的新型生物传感分析技术。广泛应用于各类生物体系的测定，从各类小分子化合物、多肽、蛋白质、寡核苷酸和寡聚糖直至类脂、噬菌体、病毒和细胞。它不必使用荧光标记和同位素标记，从而保持了生物分子的天然活性。当入射光以临界角入射到两种不同透明介质的界面时将产生全反射，且反射光强度在各个角度上都应相同，但若在介质表面镀上一层金属薄膜后，由于入射光可引起金属中自由电子的共振，从而导致反射光在一定角度内大大减弱，其中使反射光完全消失的角度称作共振角。共振角会随金属薄膜表面通过的液相的折射率的改变而改变，折射率的变化（RU）又可结合作金属表面的生物大分子质量成正比（1000RU的变化表示传感片表面1ng/mm的质量变化）。因此，BlA技术可以通过对反应全过程中各种分子反射光的吸收获得初始数据，并经相关处理获得结果。用SPR检测器所得的信息可直接来自表面的样品，也可间接来自能与样品特异结合的相关试剂，还可以从粗样品的嘈杂信号中获得微量待测样品的特异性信号。总之，随着现代科技的发展，可以预料在不远的将来，传统的微生物检测技术将逐渐被各种新型简便的微生物快速诊断技术所取代。近年来兴起的基因探针技术及全自动微生物检测系统，将从根本上改变微生物的检测方法，具有非常广阔的应用前景。同时，研究开发具有自主知识产权食品快速检测方法也是我国食品安全检测领域科研工作者义不容辞的责任。参考文献： 1 唐灵，郭奕芳，吴翊，等.Petrifilm纸片法和国际法检测奶制品细菌总数和大肠菌群数的结果比较J.中国卫生检验杂志，2000,10(3):325327.2 吴清平，周艳红，蔡芷荷.卫生微生物特异性显色培养基的研究与应用J.中国卫生检验杂志，2005,15(1):124126. 3王晓英固相细胞计数法一种快速检测单细胞细菌的食品微生物新检测方法J国外医学卫生学分册，2003，30(3)：1831864 阚方琦，董非，李华，等两种大肠菌群快检纸片的质量检测及应用效果比较J预防医学文献信息，2003，9(2)：167168 5 汪琦食品中霉菌检测两种方法的比较J中国误诊学杂志，2004，4(4)：617618 6 刘秀锋，潘珍瑜，刘红，等应用霉菌检测纸片快速检测食品霉菌的研究J广西