农杆菌转化法基本操作与理论PPT课件_第1页
农杆菌转化法基本操作与理论PPT课件_第2页
农杆菌转化法基本操作与理论PPT课件_第3页
农杆菌转化法基本操作与理论PPT课件_第4页
农杆菌转化法基本操作与理论PPT课件_第5页
免费预览已结束，剩余1页可下载查看

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

农杆菌介导转化法 生物技术08 1梁荣洪 一 简介 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌 它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位 并诱导产生冠痪瘤或发状根 根想农杆菌和发根农杆菌细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒 其上有一段T DNA 农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后 可将T DNA插入到植物基因组中 因此 农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系 人们将目的基因插入到经过改造的T DNA区 借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合 然后通过细胞和组织培养技术 再生出转基因植株 农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中 近年来 农杆菌介导转化在一些单子叶植物 尤其是水稻 中也得到了广泛应用 二 原理 农杆菌主要有两种 根癌农杆菌和发根农杆菌 根癌农杆菌能在自然条件下趋化性地感染140多种双子叶植物或裸子植物的受伤部位 并诱导产生冠瘿瘤 引发冠瘿瘤的原因是 Ti质粒上的T DNA上有8个左右的基因在植物细胞内表达 指导合成一种非常寻常的化合物冠瘿碱 进而引起转化细胞癌变 而发根农杆菌则诱导产生发状根 其特征是大量增生高度分支的根系 根癌农杆菌的Ti质粒和发根农杆菌的Ri质粒上有一段T DNA 农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后 可将T DNA插入到植物基因组中 因此 农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系 被誉为 自然界最小的遗传工程师 可以通过将目的基因插入到经过改造的T DNA区 借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移和整合 然后通过细胞和组织培养技术 得到转基因植物 三 操作方法 1 获取目的基因 用限制酶切割下目的基因 2 基因表达载体的构建 将目的基因与载体 大多数选用质粒 用DNA连接酶连接起来 3 将目的基因导入受体细胞 将含目的基因的重组质粒导入农杆菌 农杆菌为受体细胞 4 目的基因的检测与鉴定 用DNA分子杂交技术 分子杂交技术 抗原 抗体杂交 个体生物学几种方法进行检验 根据要求选取不同方法 5 最后将成功表达的细胞导入植物体内 对植物体进行个体生物学水平鉴定 谢
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论