机能设计性实验.doc

决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究- 5 -设计性实验决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究温州医学院第一临床医学院医学机能学课程设计性实验题 目： 决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究设 计 人： 张倩莺 1001010018班 级： 10级临（1）班指导老师： 陈醒言提交日期： 2012年12月研究题目: 决明子提取物对小鼠降血脂作用的研究理论依据与现状研究： 决明子为豆科一年生草本植物决明或小决明的干燥成熟种子。生于山坡、路边和旷野等处。分布于长江以南各省区。全世界热带地方均有。决明子也叫草决明、羊明等。 其味苦、甘而性凉，具有清肝火、祛风湿、清热明目，润肠通便。用于目赤涩痛，羞明多泪，头痛眩晕，目暗不明，大便秘结。归肝、肾、大肠经。有减肥之功效。治风热赤眼，青盲，雀目，高血压，肝炎，肝硬化腹水，习惯性便秘。 经调查，决明子提取物中含有的蒽醌类化合物具有降压降血脂的作用。近年来，决明子及其复方制剂在临床上已广泛运用于高脂血症的治疗。 本实验采用小鼠高脂血症模型，对决明子正丁醇溶剂提取物进行降血脂药效学研究。研究内容： 本实验针对决明子正丁醇提取物中的成分，研究其降血脂作用。研究方法： 高脂饮食喂养小鼠10 d,造成高脂血症动物模型,以决明子正丁醇提取物喂养高脂血症小鼠10 d,检测小鼠血中胆固醇、甘油三酯的含量。实验对象：小鼠 规格：小鼠16只。雄性、体重 20-30g 实验组与对照组的处理:1.将小鼠随机分为 4 组：高脂模型组（A）和低（B）、中（C）、高剂量（D）三个实验组。 2.自正式实验开始，各组动物换用高脂饲料，同时实验组分别给予0.5、1.0、3.0g/ kg*bw不同浓度的决明子正丁醇提取物，配制时分别取5g、10g、30g加蒸馏水定容至100ml，实验组体积均为1.0ml/100g.bw ，高脂模型组给予同体积的蒸馏水，连续喂养10天。观察指标： 小鼠的血清总胆固醇（TC）甘油三酯（TG）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量 。实验步骤：1.实验前准备：以基础饲料喂饲小鼠观察3d。禁食16h，取尾血，用生化分析仪测定受试动物实验前血清总胆固醇（TC ）甘油三酯（TG ）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL- C ）。2.建立高脂模型：将动物以高脂饲料喂养10 d。禁食16h，取尾血，用生化分析仪测定受试动物经高脂饲养后血清总胆固醇（TC ）甘油三酯（TG ）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL- C ）。 3.开始实验：将动物随机分为 4 组：高脂模型组（A）和低（B）、中（C）、高剂量（D）三个实验组。自正式实验开始，各组动物换用高脂饲料，同时实验组分别给予0.5、1.0、3.0g /kg.bw不同浓度的决明子正丁醇提取物，配制时分别取5g、10g、30g加蒸馏水定容至 100ml，实验组体积均为1.0ml/100g.bw ，高脂模型组给予同体积的蒸馏水，连续喂养10天。4.测定结果：于10天实验后禁食16h，采尾血测定实验后血清血清总胆固醇（TC ）甘油三酯（TG ）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL- C ）的含量。5.实验数据统计：用Excel 、SPSS13.0软件进行统计分析（本实验所用记录表格见附录）。仪器与药品：清洁级小鼠；决明子正丁醇提取物（将决明子药材研成粗粉，按系统溶剂提取法，制得决明子正丁醇提取物）；基础饲料；高脂饲料（78.8%基础饲料， 1%胆固醇、10%蛋黄粉、10%猪油、0.2%胆盐）；生化分析仪；胆固醇（TC ）甘油三酯（TG ）；高密度脂蛋白胆固醇（HDL- C ）试剂盒。实验期间实验环境温度21 24 ，湿度52%58%。预期实验结果：3 个实验组在喂饲高脂饲料的同时给予不同剂量决明子正丁醇提取物，其中C组小鼠（3.0g/kg.bw）血清 TC 、TG水平明显低于高脂模型组，证实决明子提取物对高血脂小鼠具有辅助降血脂的作用。附：实验结果统计记录表表1.小鼠实验前后TC、TG、HDL-C的变化（个体）*实验前-基础饲料喂养实验前-高脂饲料喂养实验后TC(mmol/l)TG(mmol/l)HDL(mg/dl)TC(mmol/l)TG(mmol/l)HDL(mg/dl)TC(mmol/l)TG(mmol/l)HDL(mg/dl)A1A2A3A4B1B2B3B4C1C2C3C4D1D2D3D4*备注：A、B、C三组为实验组，分别给予0.5、1.0、3.0g /kg.bw不同浓度的决明子正丁醇提取物。D组为对照组（高脂模型组），给予相同体积的蒸馏水。每组1-4号分别为四只小鼠的编号，将每只小组的情况记录表内。表2.小鼠实验前后TC、TG、HDL-C的变化（成组）*实验前-基础饲料喂养实验前-高脂饲料喂养实验后TC(mmol/l)TG(mmol/l)HDL(mg/dl)TC(mmol/l)TG(mmol/l)HDL(mg/dl)TC(mmol/l)TG(mmol/l)HDL(mg/dl)ABCD*备注：