支、衣检测与临床意义

支原体 衣原体的检测与临床检验科 支原体 衣原体定义 支原体 是一类无细胞壁 呈高度多形态性 能通过滤菌器 0 45um 在人工培养基上能生长的最小原核微生物 衣原体 是一类能通过滤菌器 专性细胞内寄生 有独特生活周期的原核细胞型微生物 具有NDA和与革兰氏阴性菌类似的细胞壁 对多种广谱抗生素敏感 支原体 衣原体分类 支原体分类 种类繁多 分布广泛 其对人类致病的主要有肺炎支原体 生殖道支原体 穿透支原体 解脲脲原体和人型支原体 1981至1996年曾报道发醇支原体 穿透支原体和梨支原体是HIV的协同因子 衣原体分类 沙眼衣原体 鹦鹉热衣原体 肺炎衣原体和家畜衣原体 支原体 衣原体检测方法学 支原体检测方法 1 分离培养法2 血清学试验 抗体测定 3 PCR 只做UU 4 改良肉汤稀释法 解脲脲原体 人型支原体 优点 价格低且可提供药敏结果 是目前实验室最常用方法 沙眼衣原体检测方法 沙眼衣原体的检测方法 分离培养法 组织细胞学是诊断金标准 聚合酶链反应法 PCR 连接酶链反应法 LCR 直接免疫荧光法 DFA 酶联免疫吸附试验 ELISA 血清抗体检测 肺炎衣原体 鹦鹉热衣原体 抗原快速免疫层析法 快速法 目前我实验室沙眼衣原体检测方法 聚合酶链反应法 PCR 抗原快速免疫层析法 快速法 酶联免疫吸附试验 ELISA 常用方法 沙眼衣原体检测方法 细胞培养法优点 特异性接近100 是沙眼衣原体检测的 金标准 缺点 昂贵 费时 要求高 用于研究或确认性试验 PCR LCR法优点 敏感性很高 理论上只要一个原体 可通过扩增而检测出阳性 也适用于无活性标本 缺点 特异性相对较差 尤其是注意避免外界污染和殘留污染 实验条件和质量控制有严格要求 沙眼衣原体检测方法 直接免疫荧光法 DFA 优点 快速 价廉 操作简便 缺点 结果判断受主观因素影响大 要求较高 在低感染率人群中敏感性差 抗原快速检测法 是目前基层医院最常用沙眼衣原体检测方法 优点 操作简便 快速 无需复杂的仪器和设备 缺点 标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原 否则可能出现漏检 敏感性为30 65 在试验结果阴性时 不能完全排除感染 有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集不当的缘故 沙眼衣原体检测方法 酶联免疫吸附试验 ELISA 优点 敏感性在70 98 特异性 97 可同时检测大批量样本 结果判断客观性强 缺点 不适用于单个样本的测定 试验结果阴性时 有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集不当的缘故 支原体 衣原体检测结果与临床关系 1 正确采集标本是保证结果准确性的前提 2 支原体 衣原体流行病学与临床症状 3 支原体 衣原体的结果解释与临床治疗 采集泌尿生殖道标本正确方法 尿道 男性 清洁尿道口 用男性无菌棉拭子插入尿道2 4cm 转动3 5秒轻轻旋转后取出放置在干燥试管中送检 标本收集前被检测者至少一小时不排尿 宫颈管 女性 清除阴道及宫颈口分泌物 无菌拭子插入宫颈管内1 2cm 轻轻旋转后取出 不可碰阴道壁 精液 羊水 前列腺液 由专科医生取样 无菌洁净溶器盛装送检 采集泌尿道生殖道标本注意事项 因支原体对细胞表面有很强亲和力 衣原体又是一种严格细胞内寄生的微生物 易感染柱状上皮细胞 应尽量多采集细胞 所以宫颈标本的采集应在宫颈口或移行处进行 在患处采用拭子或刮片获取 拭子进入宫颈或尿道后须停留数秒并旋转刮取上皮细胞后再取出 阴道及宫颈口分泌物支原体 衣原体含量低 杂菌多 真菌较多 容易污染不可取 脓性分泌物由于缺少感染的上皮细胞不适用于此项检测 应该在对患处进行清洗后采取标本 采集泌尿道生殖道标本注意事项 要与PCR标本区别 月经期 先兆流产妇女禁用 阴道用药或灌洗后禁用 由于抗原快速检测方法需要抗原量较大 请使用第一支拭子采集标本 否则可能导致假阴性结果 尽量使用绦棉或腈纶拭子 棉花中带有抑制衣原体的成分 且棉花吸水性强 使用后标本量往往达不到试验要求 标本采集后应尽快送检 4 放置不宜超过24h 支原体 衣原体检测结果与临床关系 1 正确采集标本是保证结果准确性的前提 2 支原体 衣原体的临床症状 3 支原体 衣原体的结果解释与临床治疗 支原体感染临床症状与传播方式 支原体因种类不同可引起肺炎 支气管炎 咽炎 泌尿生殖道感染 与不孕不育 不良妊娠等有关 传播方式 主要有性接触传播和垂直传播 性接触是支原体感染和传播的重要途径 沙眼衣原体感染临床症状 男性 尿道炎 附睾炎 直肠炎 结膜炎 女性 宫颈炎 尿道炎 子宫内膜异位 衣原体感染女性发生率约为40 盆腔炎 50 由衣原体引起 宫外孕 70 以上与衣原体感染有关 生育能力下降或不孕 腹膜炎和结膜炎 婴儿 新生儿眼炎和肺炎 沙眼衣原体感染流行病学 沙眼衣原体感染是最常见的性传播疾病在国外 沙眼衣原体感染率为10 4 16 4 在我国 非淋菌性尿道炎已是感染率最高的性传播疾病 而沙眼衣原体是非淋的主要病原体 20岁以下的女性是沙眼衣原体感染最高危的人群 这可能与年轻女性宫颈的解剖结构有关 口服避孕药及拥有多个性伴也增加感染的风险 沙眼衣原体检测重要性 CT是我国常见的性传播疾病 其发病率高 流行广泛 已成为较为严重的公共卫生问题 大部分情况下 80 被感染女性和50 被感染男性 感染衣原体后都没有明显的临床症状 引发的问题 潜在的感染源不利于及时防治由其引起的不孕不育等严重并发症 容易反复感染 进而引起严重的宫外孕和宫颈癌 可促进HIV和HPV病毒感染 卫生部于2007年颁布 全国性病监测点监测方案 新增加了生殖道CT感染作为单监测的病种 支原体 衣原体检测结果与临床关系 1 正确采集标本是保证结果准确性的前提 2 支原体 衣原体流行病学与临床症状 3 支原体 衣原体的结果解释与临床治疗 支原体培养结果的解释 Uu和Mh的检测相对较容易 但结果解释应慎重 支原体培养阳性 说明有支原体感染 如患者有临床症状 但其他病原体阴性 则应考虑支原体引起致病的可能 在部份正常人群中可以存在支原体 正常无菌部位 不成问题 血液 输卵管或子宫内膜来的标本需要治疗 可能为共生菌存在的部位 定量指标非常有用 支原体定量指标推存值 尿道标本 104ccu mlUu第1段尿 精液 103ccu mlUu子宫颈 104ccu mlMh 衣原体结果解释 生殖道标本衣原体结果如为阳性即可能感染衣原体 如结果为阴性 不能完全排除沙眼衣原体感染 需结合临床症状全面考虑 支原体 衣原体治疗 支原体生物学特性与用药关系 支原体个体微小 无细胞壁是与细菌区别的主要特点 对作用于细胞壁的抗菌药物不敏感 天然耐受所有 内酰胺类 磺胺嘧啶 甲氧苄啶和利福平 凡能作用于核蛋白体或影响蛋白质合成的物质 如大环内酯类 四环素和氟喹诺酮类可破坏支原体的细胞膜 使其死亡 治疗原则 对作用于细胞壁的抗生素不敏感 对作用膜蛋白 浆蛋白敏感 2012年1 2月支原体药敏试验耐药率 支原体感染治疗 根据药敏结果选择敏感药物进行治疗 首选 四环素类如强力霉素 美满霉素 大环内酯类如交沙霉素 次选 克拉霉素 阿奇