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文档简介
微量元素检测微量元素检测 1 检验目的检验目的 定量分析全血或血清中微量元素 铜 锌 钙 镁 铁 的浓度 2 测定方法测定方法 火焰原子吸收法 3 实验原理 实验原理 复合元素空心阴极灯发射出的一束特定波长的特征谱线 穿过火焰原子化器上方火焰中 样本原子化过程中产生的待测元素的自由基态原子 对特征谱线产生部分吸收 未被吸收 的部分透射过去 应用光学检测系统测量特征谱线光强大小 根据朗伯 比耳定律 通过 标准曲线方法检测样本中铜 锌 钙 镁 铁元素的含量 4 标本要求标本要求 4 标本类型 标本类型 新鲜采集的末梢血或静脉血 静脉血用肝素抗凝剂 不能用 EDTA 枸橼酸钠等抗 凝剂 4 2 标本采集与处理标本采集与处理 4 2 1 严格按照医疗卫生操作规程要求 用酒精棉球彻底清洁 消毒被检测者无名指 肚 静候待干 轻轻捏紧被检测者手指使指肚部皮肤绷紧 以一次性采血针快速刺穿指肚 外侧皮肤 使血液自然流出 尽量不要挤压或者从手指近端轻轻挤压 第一滴血用滤纸擦 拭弃掉 4 2 2 用微量吸管准确吸取 40 l 血样 管尖外壁附着血液用滤纸拭去 将吸管伸入装有 1 2ml 稀释液的离心管内液面下 3 4 毫米 轻轻缓慢排出血液 吸取清澈稀释液至 40 l 刻度左右再挤出 重复一两次此清洗操作 注意事项 操作时微量吸管头部不要接触其它物体表面 操作者手指不要接触稀释剂离 心管帽内面 以免造成血液样本污染 4 2 3 盖紧稀释剂离心管的翻盖 轻轻摇晃混均 警告 a 采血时挤压操作可能导致血液标本被组织液稀释 标本中红细胞浓度降低 而铁 锌元 素主要存在于红细胞内 从而引起铁 锌元素测量结果假性偏低误差 b 样本采集过程中的加样量误差可以导致测量结果的误差 4 3 标本存储与稳定性标本存储与稳定性 待测样本暂时不能检测时 可置于冰箱内冷藏保存 可以保存 7 天 左右 检测前取出放置达到室温平衡 4 4 标本量 标本量 40 l 末梢血或静脉血 4 5 不可接受样本不可接受样本 有污染的样本 5 仪器和试剂仪器和试剂 5 1 仪器仪器 BH5100 原子吸收光谱仪 5 2 试剂准备 试剂准备 随机配置专用试剂 密封存储于室温时 0 30 使用有效期同试剂盒 上标注时间一致 6 溯源性溯源性 溯源品名称级别标准物质编号 铜 锌 钙 镁 铁 钾 钠溶液成 分分析标准物质 国家二级标 准物质 GBW E 080915 080917 7 质控品与质量控制质控品与质量控制 质控品是博晖公司提供的国家二级标准物质 GBW E 080915 080917 存储与使用详 见标物说明书 8 检测流程 检测流程 仪器预热 打开计算机并启动专用软件 打开 BH5100 仪器电源开关 点击绿色 start 图标联机 屏幕上出现闪烁的数字表示联机成功 静态预热 调节调控参数 使其能量达到 100 110 之间 预热 20 分钟以上 如 果元素灯出现老化现象则要适当延长预热时间 打开空气压缩机 调节输出压力至 0 3MPa 打开乙炔气瓶开关 将副表压力调至 0 1MPa 点火预热 将点火枪枪头置于燃烧头上方 按下打火钮 然后打开仪器的乙炔安 全开关至有火焰燃烧 继续预热 10 分钟 仪器工作状态调整 调控参数调节 点击自动调整 重新调整调控参数使能量达到 100 110 之间 调节火焰高度 旋转空气流量调节阀将空气流量调节至 8 L min 旋转乙炔流量 调节阀将乙炔流量调节至 2L min 左右 再微调乙炔流量至火焰上沿与仪器上平 面平齐 且无黄色焰心 标准曲线制作 设置测量参数 选择重新标样 调入标样浓度 注意标样浓度要与标准溶液的实 际浓度一致 在一不同版本的软件中会出现读数延时为 3 0s 应将其改为 0s 点 击确定完成测量参数设置 自动切换至标准样本测量界面 进样 将毛细吸样管插入厂家提供的应用标准溶液瓶中的液面以下 观察屏幕上 的吸光度曲线平稳后 按空格键读数 建立曲线 按标准溶液进样顺序依次读数 自动出现曲线图形 五种元素的相关 系数均达到 0 9990 以上 且灵敏度达标 如下表 方为合格 如曲线相关系数不能达标 重做曲线 仍不能达标则需要更换标准溶液后重做曲 线 如灵敏度不能达标 则疏通或更换雾化器后 重做标准曲线 曲线完成后点击确定 自动进入样本测量界面 标本检测 被测样本要与室温相同才能测量 如从冰箱取出 需要在室温下放置半小时以上 再进行测量 打开样品离心管时应注意 手或手套的任何部位都不能接触离心管盖的内沿 进样 将毛细吸样管插入样品离心管液面以下 观察屏幕上的吸光度曲线平稳后 按空格键读数 五种元素吸光度结果一次性出现在屏幕上 结果报告 输入病人资料 病人资料可以在测量前输入也可以在测量后输入 病人资料的项 目可以选择 合并文件 样品测量完毕后 点击报告文件图标 合并文件 可选择方式打印 将结果输出 测量结果参考值是公司参考文献资料和本公司在北京地区所做大样本统计得出的 元素CuZnCaMgFe 一号标液吸光度 AA 0 025 0 0400 0 060 0 060 0 023 有一定代表性 但不能涵盖全部 其值仅供临床医生参考 9 参考范围 参考范围 元素名称元素名称样本类型样本类型参考范围 标准国际单位 参考范围 标准国际单位 铜铜全血全血11 8 39 3 微摩尔微摩尔 锌锌全血全血76 5 170 微摩尔微摩尔 钙钙全血全血1 55 2 10 毫摩尔毫摩尔 镁镁全血全血1 12 2 06 毫摩尔毫摩尔 铁铁全血全血7 52 11 8 毫摩尔毫摩尔 10 注意事项 注意事项 实验室附近不应有剧烈震动的装置或设备 实验室附近无强电磁场干扰 实验室应与化学实验室分开 以防止酸 碱及其它腐蚀性气体或烟雾侵蚀仪器的光学及 精密机械零件 实验室应保持清洁 干燥 无尘 仪器主机 微机 打印机用电源为单相 220V 22 V 500VA 频率 50 Hz 1 Hz 如果供 给原子吸收光谱仪及微机系统的电源电压变化大于要求 则必须外配抗干扰交流稳压电源 对实验室供电时 其进线应与大功率设备或形成强电磁场干扰设备的进线分开 且不要 和光谱仪的电弧 火花等光源在同一场所使用 使用本仪器进行测定时 会排出有害气体 因此 原子化器上方必须装有排风设备 排 风量大小以一张厚纸板贴在抽风口处 能被轻轻吸住未宜 安放仪器用的工作台 应结实 牢固 平整 能承重 150Kg 能保持承重后不变形 工 作台台面要平整 上铺防震耐腐蚀的塑料板或橡胶板 台面的水平状态不应随时间而改变 工作台四周应留出空间 以便从仪器背后连接电路 气路和检修仪器 为保证仪器稳定工作和安全操作 实验室应具有良好的接地条件 仪器的地线最好接到 一块直接埋入地下 1 米的金属板上 接地电阻小于 0 1 定期检查气路是否漏气 开机前一定要检查是否打开氩气阀门 在没有保护气下空烧会严重损坏钨舟的寿命 及时清理金属炉 钨舟原子化器 内的灰尘 以免影响测量结果的精度 经常检查金属炉 钨舟原子化器 两侧的石英窗的透光度和上方炉盖及拔烟罩的清洁度 如有污物 用干净的脱脂棉蘸无水乙醇小心擦拭 注意轻拿轻放 拆卸和安装元素灯时 不要直接将灯拆下或插入
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