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文档简介

一 果酒果醋实验流程示意图 挑选葡萄 冲洗 榨汁 酒精发酵 醋酸发酵 果醋 发酵装置 A装置 B装置 请回答制作果酒和果醋的有关问题 1 果酒和果醋的制作依次利用了和两种微生物 两者在结构上最主要区别是 从代谢类型上看 两者的相同之处是 2 在设计发酵装置时 排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连 其目的是 3 果酒发酵时间一般为10 12d 但也可能因为等外界条件而发生改变 工作人员可通过定期取发酵液与试剂反应来检测发酵情况 如发酵液中含有酒精则溶液呈现现象 4 果酒进一步发酵能获得果醋 酒变醋的原理是 氧气充足 醋酸菌将乙醇变为乙醛 再将乙醛变为醋酸 酵母菌醋酸菌 有无核膜 都是异养型生物 防止空气中的杂菌进入 温度 灰绿色 人类利用微生物发酵制作果酒 果醋 请回答下列问题 1 果酒的制作离不开酵母菌 酵母菌是一类 呼吸类型 微生物 在有氧条件下 酵母菌进行有氧呼吸 其反应式为 在无氧条件下 酵母菌进行无氧呼吸 其反应式为 2 温度是酵母菌生长和发酵的重要条件 20 左右最适合酵母菌繁殖 酒精发酵时一般将温度控制在 在葡萄酒的自然发酵过程中 起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌 在发酵过程中 随着酒精度数的提高 红葡萄皮的色素也进入发酵液 使葡萄酒呈现深红色 在的发酵液中 酵母菌可以生长繁殖 而绝大多数其他微生物却因无法适应这一环境而受到抑制 兼性厌氧 18 25 缺氧 呈酸性 3 醋酸菌是一种好氧细菌 只有当氧气充足时 才能进行旺盛的生理活动 在变酸的酒的表面观察到的 就是 实验表明 醋酸菌对氧气的含量 菌膜 醋酸菌在液面大量繁殖形成的 特别敏感 微生物的实验室培养 练习1 不同的微生物对营养物质的需要各不相同 下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中 不正确的是 A 氮源物质为该微生物提供必要的氮素B 碳源物质也是该微生物的能源物质C 无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D 水是该微生物的营养要素之一 B 1 微生物的实验室培养 1 培养基 概念 人们按照微生物对营养物质的不同需求 配制出供其生长繁殖的营养基质 微生物的培养与应用 培养基的种类 不加凝固剂 加凝固剂 如琼脂 工业生产 观察微生物的运动 分类鉴定 微生物分离 鉴定 活菌计数 保藏菌种 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 培养基成分明确 分类 鉴定 在培养基中加入某种化学物质 以抑制不需要的微生物的生长 促进所需要的微生物的生长 培养 分离出特定微生物 在培养基中加入某种指示剂或化学药品 用以鉴别不同种类的微生物 鉴别不同种类微生物 选择培养基 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 培养基配方及营养要素基本营养要素 各种培养基一般都含有水 碳源 氮源 无机盐 此外还要满足不同微生物生长对pH 特殊营养物质以及氧气的需求 例1 通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物 在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长 在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌 在培养基中加入10 的酚可以抑制细菌和霉菌 利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出 大肠杆菌 霉菌 放线菌 固氮细菌A B C D A 例3 1 在大肠杆菌培养过程中 除考虑营养条件外 还要考虑 和渗透压等条件 由于该细菌具有体积小 结构简单 变异类型容易选择 等优点 因此常作为遗传学研究的实验材料 2 在微生物培养操作过程中 为防止杂菌污染 需对培养基和培养器皿进行 消毒 灭菌 操作者的双手需进行清洗和 静止空气中的细菌可用紫外线杀灭 其原因是紫外线能使蛋白质变性 还能 3 若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数 要想使所得估计值更接近实际值 除应严格操作 多次重复外 还应保证待测样品稀释的 温度酸碱度 易培养生活周期短 灭菌 消毒 损伤DNA的结构 比例合适 4 通常 对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状 大小等菌落特征对细菌进行初步的 5 培养大肠杆菌时 在接种前需要检测培养基是否被污染 对于固体培养基应采用的检测方法是 6 若用大肠杆菌进行实验 使用过的培养基及培养物必须经过 处理后才能丢弃 以防止培养物的扩散 鉴定 或分类 将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间 观察培养基上是否有菌落产生 灭菌 2 微生物培养的无菌技术进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵 重点是消毒和灭菌 消毒和灭菌的区别 2 微生物的纯化培养及菌种的保藏 1 原理 在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞 使其长成单个的菌落 这个菌落就是一个纯化的细菌菌落 2 方法 平板划线法 稀释涂布平板法 3 菌种保藏方法 临时保藏法 甘油管藏法 例2 2011 山东卷 研究发现柚皮精油和乳酸菌素 小分子蛋白质 均有抑菌作用 两者的提取及应用如图所示 1 筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或 接种 对新配制的培养基灭菌时所用的设备是 实验前需对超净工作台进行 处理 2 培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供 电泳法纯化乳酸菌素时 若分离带电荷相同的蛋白质 则其分子量越大 电泳速度 3 抑菌实验时 在长满致病菌的平板上 会出现以抑菌物质为中心的透明圈 可通过测定透明圈的 来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果 稀释涂布平板法 高压蒸汽灭菌锅 紫外线消毒 碳源和氮源 越慢 大小 直径 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1 将转基因植物的叶片接种到无菌培养基上 应该进行严格的无菌操作 2 将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离分解尿素的细菌 是否无菌操作影响较小 3 培养基中一般都含有水 碳源 氮源和无机盐四种成分 4 筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的惟一氮源 5 统计样品中的活菌一般使用平板划线法 例1 从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是 采集菌样 富集培养 纯种分离 性能测定 1 不同微生物的生存环境不同 获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样 然后再按一定的方法分离 纯化 培养嗜盐菌的菌种应从环境中采集 2 富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件 使其菌落中的数量大大增加 从而分离出所需微生物的培养方法 对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基 并在条件下培养 海滩等高盐 以淀粉为惟一碳源 高温 3 接种前要对培养基进行处理 在整个微生物的分离和培养中 一定要注意在条件下进行 4 如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图 请分析接种的具体方法 获得图A效果的接种方法是 获得图B效果的接种方法是 一同学用稀释平板法纯化土壤中的细菌时 发现培养基上的菌落连成一片 最可能的原因是 应当怎样操作才可避免此现象 高压蒸汽灭菌 无菌 稀释涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高 增大稀释倍数 微生物的筛选与计数1 筛选菌株 1 原则 人为提供有利于目的菌株生长的条件 包括营养 温度 pH等 同时抑制或阻止其他微生物的生长 2 统计菌落数目的方法 1 显微镜直接计数法 2 间接计数法 活菌计数法 例2 下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数的实验 完成下列问题 材料用具 农田的表层土壤 无氮培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 盛有9mL无菌水的试管 无菌吸管 无菌涂布器 无菌培养皿 盛有90mL无菌水的锥形瓶 恒温箱 1 方法步骤 倒平板 分别将无氮培养基 牛肉膏蛋白胨培养基倒平板 应在操作 制备土壤稀释液 取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中 充分摇匀 用无菌吸管吸取上清液1mL 转至盛有9mL的无菌水的试管中 依次稀释到 稀释度 酒精灯火焰旁 107 涂布 按照由107 103稀释度的顺序分别吸取0 1mL进行平板涂布 每个稀释度下 无氮培养基应至少涂布个平板 牛肉膏蛋白胨培养基涂布个 培养 放入恒温箱内 在28 30 下培养3d 4d 细菌的计数 当菌落数目稳定 选取菌落数在的平板进行计数 如果测定的平均值为50 则每克样品中的菌落数是 稀释度是105 2 预期结果 相同稀释度下 牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数 选填 多于 或 少于 无氮培养基上的数目 原因是 3 1 30 300 5 107 多于 无氮培养基上只有土壤中的自生固氮菌能生存繁殖 而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存 3 设置对照 1 目的 排除实验组中非测试因素对实验结果的影响 提高实验结果的可信度 2 方法 证明培养基未被污染 用空白培养基作对照 证明选择培养基的选择作用 用牛肉膏蛋白胨培养基接种等量同种菌液作对照 例3 下表是一种培养基的配方 请回答 1 该培养基从物理性质来说 属于培养基 2 无菌操作是微生物培养最基本的要求 对于培养基 培养皿 接种环 实验操作者的双手 空气 牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是 化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线灭菌 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法 固体 3 在平板划线法中 每次灼烧接种环后 为什么要等其冷却后再进行划线 5 以尿素为惟一氮源的培养基中加入指示剂 培养某种细菌后 如果pH升高 指示剂将 利用这一特点 可准确地鉴定该种细菌能够分解尿素 以免接种环温度太高 杀死菌种 酚红 变红 1 为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌 常在培养基中加入 A 较多的氮源物质B 较多的碳源物质C 青霉素类药物D 高浓度食盐2 下列操作不属于微生物的分离步骤的是A 稀释B 划线或涂布C 接斜面D 培养3 影响微生物生长的主要环境因素是A 阳光 温度 水分B 温度 水分 PHC 水分 PH 氧D 温度 PH 氧4 使用选择培养基的目的是 A 培养细菌B 培养真菌C 使需要的微生物大量繁殖D 表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别5 能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是 A CO2和N2B 葡萄糖和NH3C CO2和尿素D 葡萄糖和尿素 6 下列说法不正确的是 A 科学家从70 80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶 B 统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1 M2 M3 M4 M5 以M3作为该样品菌落数的估计值 C 设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响 提高实验结果的可信度D 同其他生物环境相比 土壤中的微生物数量最大 种类最多 某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌 设计实验步骤如下 请给予合理的补充 1 采样与培养 将采集的土样混匀后称取1g 置于经过 法灭菌处理的 填 固体 或 液体 培

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