清开灵注射液质量标准草案.doc

清开灵注射液质量标准草案清开灵注射液Qingkailing Zhusheye【处方】 胆酸 珍珠母（粉） 猪去氧胆酸 栀子 水牛角（粉） 板蓝根 黄芩苷 金银花 【制法】以上八味，板蓝根加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至200ml，加乙醇使含醇量达60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。栀子加水煎煮二次，第一次1小时，第二次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至25ml，加乙醇使含醇量达60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。金银花加水煎煮二次，每次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至60ml，加乙醇使含醇量达75%，滤过，滤液调节pH值至8.0，冷藏，回收乙醇，再加乙醇使含醇量达85%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。水牛角粉用氢氧化钡溶液，珍珠母粉用硫酸分别水解79小时，滤过，合并滤液，调节pH值至3.54.0，滤过，滤液加乙醇使含醇量达60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。将栀子液、板蓝根液和水牛角、珍珠母水解混合液合并后，加到胆酸、猪去氧胆酸的75%乙醇溶液中，混匀，加乙醇使含醇量达75%，调节pH值至7.0，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。黄芩苷用注射用水溶解，调节pH值至7.5，加入金银花提取液，混匀，与上述各备用液合并，混匀，并加注射用水至1000ml，再经活性炭处理后，冷藏，灌封，灭菌，即得。【性状】本品为棕黄色或棕红色的澄明液体。 【鉴别】（1）取本品10ml ，置水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醇1ml 使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含4mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录 B）试验，吸取上述两种溶液各 5l ，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以乙酸乙酯丙酮甲酸水（5：5：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10% 硫酸乙醇溶液，在105 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 （2）取本品1ml ，加乙醇2ml ，混匀，作为供试品溶液。另取胆酸对照品、猪去氧胆酸对照品，加乙醇制成每1ml 各含1mg 的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录 B ）试验，吸取上述两种溶液各5l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以异辛烷乙酸乙酯冰醋酸（15：7：5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10% 硫酸乙醇溶液，在105 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 （3）取黄芩苷对照品，加 70% 乙醇制成每 1ml 含1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录 B ）试验，吸取【鉴别】（2）项下的供试品溶液及上述对照品溶液各2l，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 1三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【指纹图谱】照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱Phenomenex Luna C18 250mm4.6mm，5m）； 以乙腈为流动相A，以0.1甲酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为0.5 ml/min；检测波长为254 nm；柱温25。理论板数按栀子苷峰计算应不低于100000。时间（分钟）流动相A(%)流动相B(%)04242656575758501212191910010001008888818100100参照物溶液的制备取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml中含0.2mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，记录65分钟内的色谱峰，即得。本品指纹图谱中应呈现与栀子苷对照品保留时间一致的色谱峰，并应出现10个共有峰，以1、3、5、6、7、8、9、10（S）号峰为标记，经中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件计算，与对照指纹图谱相比较，相似度不得低于0.80。图S 清开灵注射液对照指纹图谱10（S） 栀子苷对照品【检查】山银花：取本品20ml，加盐酸3滴，边加边搅拌，滤过，滤液加氢氧化钠试液调节pH值至7，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤两次，每次30ml，分取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取灰毡毛忍冬皂苷乙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录 B）试验，吸取上述两种溶液各2l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（6:4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。溶液的颜色 精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，与黄色10号标准比色液（中国药典2010年版二部附录IX A第一法）比较，应不得更深。 pH 值 应为 6.87.5 （中国药典2010年版一部附录 G ）。 炽灼残渣 精密量取本品5ml，依法测定（中国药典2010年版一部附录 J），每1ml应为3.0 8.5mg。总固体精密量取本品2ml，置105干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，在105干燥2小时，移至干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，每1ml遗留残渣应为3060mg。有关物质 除蛋白质、树脂、草酸盐外，照注射剂有关物质检查法（中国药典2010年版一部附录 S）检查，应符合规定。蛋白质 取本品1ml，加鞣酸试液13滴，不得出现浑浊。 树脂 取本品5ml，加三氯甲烷10ml，振摇提取，分取三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加冰醋酸 2ml 使溶解，置具塞试管中，加水3ml ，混匀，放置 30分钟，可有轻微浑浊，不得出现絮状物或沉淀。草酸盐 取本品5ml ，置离心管中，滴加6mol/L 盐酸溶液5滴，搅匀，离心，吸取上清液，滤过，取滤液2ml，调节pH 值至56 ，加3%氯化钙溶液23滴，放置10 分钟，不得出现沉淀。 重金属及有害元素 精密量取本品2ml，经微波消解后，照铅、镉、砷、汞、铜测定法(中国药典2010年版一部附录 B原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法)测定，铅不得过百万分之五；镉不得过千万分之三；砷不得过百万分之二；汞不得过千万分之二；铜不得过百万分之二十。热原 取本品，依法检查（中国药典2010年版一部附录XIII A），剂量按家兔体重每1kg注射5ml，应符合规定。异常毒性 取本品，依法检查（中国药典2010年版一部附录XIII E）,按静脉注射给药，应符合规定。过敏反应 取本品，依法检查（中国药典2010年版一部附录XIII G），应符合规定。溶血与凝聚 取本品，依法检查（中国药典2010年版一部附录XIII H），应符合规定。其他应符合注射剂项下有关的各项规定（中国药典2010年版一部附录 U ）。【 含量测定 】胆酸、猪去氧胆酸 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-0.1%甲酸溶液(68:17:15)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按胆酸峰计算应不低于4000。 对照品溶液的制备 取胆酸对照品、猪去氧胆酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含胆酸0.2mg和猪去氧胆酸0.1mg的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备 精密量取本品1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液5l、15l，供试品溶液10l，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。 本品每1ml含胆酸（C 24 H 40 O5）应为1.503.25mg；含猪去氧胆酸（ C 24 H 40 O4）应为1.003.20 mg。栀子 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录 D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水（10：90）为流动相；检测波长为238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于 3000。 对照品溶液的制备 取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml 含 30 g 的溶液，即得。 供试品溶液的制备 精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每 1ml 含栀子以栀子苷（C 17 H 24 O 10）计，不得少于0.10 mg。 黄芩苷 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录 D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇水 磷酸（47：53：0.2）为流动相；检测波长为276nm 。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品适量，精密称定，置100ml量瓶中，加70% 乙醇适量使溶解，加流动相1ml，再加70%乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml，置10ml量瓶中，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀，取稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml 中含黄芩苷50 g ）。 供试品溶液的制备 精密量取本品1ml ，置100ml量瓶中，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每1ml含黄芩苷（C 21 H 18 O 11），应为3.55.5mg 。 总氮量 精密量取本品0.5ml ，照氮测定法（中国药典2010年版一部附录 L 第二法）测定，即得。 本品每1ml含总氮（N）应为2.23.0mg。【功能与主治】 清热解毒，化痰通络，醒神开窍。用于热病，神昏，中风偏瘫，神志不清；急性肝炎、上呼吸道感染、肺炎、脑血栓形成、脑出血见上述证候者。 【用法与用量】 肌内注射，一日24ml。重症患者静脉滴注，一日2040ml，以10% 葡萄糖注射液200ml 或氯化钠注射液100ml稀释后使用。 【注意】 (1) 有表证恶寒发热者、药物过敏史者慎用。(2) 如出现过敏反应应及时停药并做脱敏处理。 (3) 本品如产生沉淀或浑浊时不得使用。如经 10% 葡萄糖或氯化钠注射液稀释后，出现浑浊亦不得使用。(4) 药物配伍：到目前为止，已确认清开灵注射液不能与硫酸庆大霉素、青霉素 G 钾、肾上腺素、阿拉明、乳糖酸红霉素、多巴胺、山梗菜碱、硫酸美芬丁胺等药物配伍使用。(5) 清开灵注射液稀释以后，必须在4小时以内使用。(6) 输液速度：注意滴速勿快，儿童以2040滴/分为宜，成年人以4060滴/分为宜。(7) 除按 用法与用量 中说明使用以外，还可用5% 葡萄糖注射液、氯化钠注射液按每10ml 药液加入100ml 溶液稀释后使用。 【规格】（1）每支装2ml （2）每支装10ml 【贮藏】密闭。注：1. 胆酸 取本品20mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，照清开灵注射液【含量测定】胆酸、猪去氧胆酸项下方法，依法测定。本品含胆酸（C 24 H 40 O5 ）不得少于80.0。2. 猪去氧胆酸 取本品1