药物分析药物各论总结

药物分析之药物各论第5章巴比妥类药物的分析一、重点药物：名称结构式性质鉴别个性共性巴比妥类CCCONONCOH5C2H5C2HH5,5-取代的巴比妥母核：环状丙二酰脲、1,3-二酰亚胺基团1. 弱酸性2. 与重金属离子的反应（1） 与银盐的反应（2）与铜盐的反应（3）与钴盐的反应（4）与汞盐的反应3. 水解反应 4. 与香草醛（Vanillin）的反应5. 紫外吸收苯巴比妥CCCONONCOH5C2HH1.硝化反应2. 与NaNO2H2SO4的反应3. 与甲醛H2SO4的反应司可巴比妥钠CCCONONCONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H1.可使溴试液或碘试液褪色2. 还原KMnO4异戊巴比妥钠CCCONONCONaC2H5CHCH2CH2CH3CH3H硫喷妥钠5，5取代的硫代巴比妥硫元素的反应物理性质：1. 白色结晶或结晶性粉末，具有固定的熔点。微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于有机溶剂。 二、药物鉴别：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象丙二酰脲类的鉴别反应与银盐反应+硝酸银白色沉淀，振摇，沉淀溶解+过量的硝酸银沉淀不再溶解与铜盐反应+铜吡啶试液显紫色或生成紫色沉淀熔点测定巴比妥类的钠盐酸 游离巴比妥类药物 过滤 洗涤 干燥 测熔点 174178特殊取代基或元素不饱和烃取代基的反应+碘试液棕黄色在5 分钟内消失芳环取代基的反应与亚硝酸钠硫酸的反应显橙黄色，随即转橙红色与甲醛硫酸的反应接界面显玫瑰红色硫元素的反应+氢氧化钠试液与醋酸铅试液白色沉淀；加热后，沉淀变为黑色。 钠盐的鉴别反应1. 焰色反应火焰即显鲜黄色2. 与醋酸氧铀锌反应+醋酸氧铀锌试液黄色三、杂质检查：名称（类）药物操作方法鉴别现象限量计算酸度 苯巴比妥灵敏度法指示剂不显红色溶液的澄清度苯巴比妥；司可巴比妥钠澄清中性或碱性物质苯巴比妥；司可巴比妥钠提取重量法四、含量测定：药物名称测定方法测定原理测定条件操作方法注意事项计算（公式）苯巴比妥银量法反应摩尔比：11甲醇+3%无水碳酸钠自身指示电位法指示+甲醇溶解， +新制的3无水碳酸钠溶液，+硝酸银滴定液（0.1 mol/L）滴定（1）无水碳酸钠应新鲜配制（2）AgNO3滴定液应新鲜配制（3）银电极使用前应进行处理含有双键的巴比妥类（司可巴比妥钠）溴量法加成反应反应摩尔比11剩余滴定法空白校正+水溶解，+溴滴定液（0.05mol/L）和盐酸，暗处静置15分钟， +碘化钾， +硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，+加淀粉指示液（1）操作中要防止溴和碘的逸失（2）平行条件进行空白试验可减少溴和碘逸失带来的误差异戊巴比妥酸碱滴定法水乙醇混合溶剂胶束水溶液非水溶液滴定法二甲基甲酰胺滴定剂：甲醇钠 指示剂：麝香草酚兰第6章芳酸及其酯类药物的分析 1、 芳酸及其酯类药物名称（类）典型药物结构特征理化性质水杨酸类水杨酸、阿司匹林、二氟尼柳、双水杨酯、对氨基水杨酸那、贝诺酯含苯环、游离或潜在羧基和酚羟基溶解性、酸性、水解性、官能团反应苯甲酸类苯甲酸、苯甲酸钠、丙磺舒、甲芬酸钠含苯环、游离或潜在羧基且羧基与苯环直接相连其他类布洛芬、氯贝丁酯含苯环、游离或潜在羧基，羧基不与苯环直接相连二、药物鉴别：名称鉴别原理操作方法鉴别现象水杨酸铁盐反应加三氯化铁试液紫堇色阿司匹林1、铁盐反应2、水解反应1、先水解然后加三氯化铁试液2、先加碳酸钠水解再家稀硫酸1、紫堇色2、白色沉淀苯甲酸铁盐反应先加氢氧化钠使其生成钠盐再加三氯化铁赭色沉淀苯甲酸盐分解产物的反应在试管中加硫酸，加热管壁有白色升华物丙磺舒铁盐反应先加氢氧化钠使其生成钠盐再加三氯化铁米黄色沉淀具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物重氮化-偶合反应酸性溶液中与亚硝酸钠生成重氮盐再与碱性-萘酚偶合橙黄到猩红色沉淀三、特殊杂质检查：名称 杂质原理操作方法鉴别现象限量计算阿司匹林水杨酸三氯化铁反应加三氯化铁试液紫堇色L=对氨基水杨酸钠间氨基酚双相滴定法先用乙醚提取，然后往提取液中加入水和指示剂，再用盐酸滴定贝诺酯对氨基酚与碱性亚硝基铁氰化钠反应加亚硝基铁氰化钠蓝绿色贝诺酯游离水杨酸三氯化铁反应紫堇色甲芬那酸铜原子吸收分光光度法氯贝丁酯对氯酚气相色谱法四、含量测定：药物名称测定方法测定条件操作方法注意事项计算（公式）阿司匹林直接滴定法中性乙醇溶解1、用中性乙醇溶解2、滴定应不断振摇下稍快地进行含量%=反应摩尔比为11阿司匹林片水解后剩余滴定法标示量%=反应物质的量比=1:2阿司匹林片两步滴定法第一步 中和 第二步 水 解后剩余滴定标示量%=反应物质的量比=1:1含量测定：测定方法测定药物 双相滴定法芳酸碱金属盐 非水碱量法芳酸碱金属盐 亚硝酸钠滴定法 具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 直接紫外分光光度法贝诺酯 过滤后的紫外分光光度法丙磺舒片、贝诺酯片离子交换紫外分光光度法氯贝丁酯 离子对反相高效液相色谱法对氨基水杨酸钠离子抑制色谱法阿司匹林栓剂、丙磺舒 第7章芳香胺类药物的分析 第1节：芳胺类药物的分析一、重点药物：分类名称结构式性质个性共性芳胺类药物对氨基苯甲酸酯类苯佐卡因分子结构中多无脂烃胺侧链，无弱碱性。1.芳伯氨基特性，除了盐酸丁卡因以外，均具有芳伯氨基，可发生重氮化-偶合反应；可与芳醛发生缩合反应，生成Schiff碱；易氧化变色。2.水解特性3.弱碱性，分子结构中多具有脂烃胺侧链，具有碱性，在冰醋酸等非水溶剂中与高氯酸定量反应，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。4.光吸收特性，UV、IR。5.溶解性，本类药物的游离碱多难溶于水，可溶于有机溶剂；其盐酸盐为白色结晶性粉末，具有一定的熔点，易溶于水、乙醇。盐酸普鲁卡因盐酸丁卡因盐酸丁卡因结构中无芳伯氨基，无重氮化-偶合反应。但结构中的芳仲胺基在盐酸溶液中可与亚硝酸钠反应，生成N-亚硝基化合物白色沉淀。盐酸普鲁卡因胺与盐酸普鲁卡因的化学结构不同之处在于酯键改为酰胺键。酰胺类对乙酰氨基酚酚羟基特性，对乙酰氨基酚结构具有酚羟基，可与三氯化铁反应蓝紫色。1. 具有芳酰胺基，水解后呈芳伯氨基特性。对乙酰氨基酚和醋氨苯砜的水解速度较快，盐酸利多卡因与盐酸布比卡因在酰胺基邻位存在两个甲基，由于空间位阻影响，水解较难。2. 光吸收特性醋氨苯砜盐酸利多卡因1.弱碱性，利多卡因和布比卡因因具有脂烃胺侧链且为叔胺氮原子，显弱碱性，可与生物碱沉淀试剂反应；在冰醋酸等非水溶剂中可与高氯酸定量反应。2.与重金属离子发生沉淀反应，盐酸利多卡因和盐酸布比卡因结构中的酰胺基可与铜离子或钴离子发生反应，生成有色的配位化合物沉淀。盐酸布比卡因二、药物鉴别：名称（类）鉴别原理鉴别现象PS芳胺类药物具有芳伯氨基的药物在酸性条件下与亚硝酸钠反应生成重氮盐，后者再在碱性条件下，与-萘酚偶合生成颜色鲜艳的偶氮染料。Ar-NH2 重氮盐 橙黄猩红色1.直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠 、盐酸氯普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺。2.间接：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜、贝诺酯。3.盐酸丁卡因中无芳伯氨基，无重氮化偶合反应。盐酸丁卡因结构中具有芳仲氨基，在盐酸溶液中可与亚硝酸钠反应，生成N-亚硝基化合物白色沉淀。对乙酰氨基酚 对乙酰氨基酚结构中具有酚羟基，可直接与三氯化铁反应呈蓝紫色。盐酸普卡因苯佐卡因盐酸利多卡因1. 具有芳酰胺，在碳酸钠溶液中与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物，加入三氯甲烷后，三氯甲烷层显黄色。2. 在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。盐酸普鲁卡因胺制备衍生物测定熔点1 三硝基苯酚衍生物（盐酸利多卡因、盐酸布比卡因）2 硫氰酸盐衍生物（盐酸丁卡因）UV、IR三、杂质检查：名称（类）杂质来源鉴别原理与现象/检查方法限量计算对乙酰氨基酚中的有关物质 对氯苯乙酰胺 中间体、副产物及分解产物 检查方法 TLC 杂质对照品法对乙酰氨基酚咀嚼片、泡腾片、颗粒及滴剂等均需检查对氨基酚。按外标法以峰面积计算，含对氨基酚不得过0.005%，其他杂质峰面积均不得大于对照品溶液中对乙酰氨基酚的峰面积（0.1%），杂志总量不得过0.5%。其他杂质参比杂质对照品法对氨基酚 中间体、水解产物 盐酸普鲁卡因注射液中的对氨基苯甲酸 水解产生 检查方法 TLC 杂质对照品法四、含量测定：测定方法测定原理测定条件指示终点计算（公式）UV对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定对乙酰氨基酚原料、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊剂。片剂，吸收系数法HPLC 对乙酰氨基酚泡腾片、滴剂及凝胶剂采用高效液相色谱法测定含量。 离子抑制色谱法，外标法或内标法定量非水碱量法分子结构中具有脂烃侧链，呈碱性，在冰醋酸等非水溶剂中可与高氯酸定量反应。荧光法使荧光衍生化试剂与本身无荧光或荧光效率低的化合物反应，其产物具有强荧光，从而使检测灵敏度大大提高。亚硝酸钠滴定法 具芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基的药物芳伯氨基在酸性溶液中与亚硝酸钠定量反应，生成重氮盐。1.加入适量KBr加速反应，KBr为催化剂 K1300 K2。加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度。2.加过量盐酸加速反应，在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO3。 盐酸1:2.56； 加入盐酸： 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果3.反应温度，室温条件下滴定（1030）4.滴定速度滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定。 1. 永停滴定法 电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。2. 电位法 采用铂-甘汞电极系统，当重氮化反应完成时，溶液中过量的亚硝酸，使电位产生突跃。3. 外指示剂法 KI淀粉糊剂或试纸，滴定到达终点时，稍过量的亚硝酸钠在酸性溶液中氧化碘化钾，析出的碘遇淀粉即显蓝色。4.内指示剂法中性红（不可逆指示剂）第2节：苯乙胺类药物的分析一、重点药物分类名称结构式性质苯乙胺类药物肾上腺素 1. 脂烃胺基侧链，显弱碱性 2. 酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应 3. 具手性碳原子，具旋光性 4. 溶解性 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水 5. UV 6. IR 重酒石酸去甲肾上腺素盐酸去氧肾上腺素盐酸异丙肾上腺素盐酸苯乙双胍盐酸克伦特罗2、 药物鉴别：名称（类）鉴别原理与现象苯乙胺类药物大多数苯乙胺类药物具有酚羟基结构，在酸性条件下，与Fe3+络合显色，加入碱性溶液，即显紫色或紫红色。 酚羟基、邻二酚羟基易被碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化剂氧化而呈现不同颜色。1. 肾上腺素在中性或酸性溶液中，被碘氧化成肾上腺素红显血红色。2. 盐酸异丙肾上腺素在盐酸溶液中，被碘氧化生成异丙肾上腺素红，加硫代硫酸钠溶液使碘的棕色褪去，溶液显淡红色。3. 重酒石酸去甲肾上腺素在酸性条件下比较稳定，几乎不与碘反应，在酒石酸氢钾饱和溶液中被碘氧化，加硫代硫酸钠溶液，溶液为无色或仅显微红色或淡紫色。4. 硫酸沙丁胺醇在硼砂溶液中被铁氰化钾氧化为醌式结构，再与4-氨基安替比林缩合，生成易溶于三氯甲烷的橙红色产物。重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸间羟胺分子中具有脂肪伯氨基，可与亚硝基铁氰化钠反应，显红紫色。盐酸去氧肾上腺素（双缩脲反应）盐酸去氧肾上腺素的芳香环侧链中具有氨基醇结构，在强碱性条件下可与硫酸铜反应生成紫色配位化合物，该化合物易溶于水不溶于乙醚，加乙醚振荡后醚层不显色。第8章磺胺类药物与喹诺酮类药物的分析 磺胺类药物：母核为对氨基苯磺酰胺重点药物：名称结构式性质鉴别个性共性磺胺甲噁唑铜盐沉淀为草绿色1、酸碱两性； 2、具有芳伯胺基； 3、具有共轭体系；4、可与某些金属离子形成难溶性盐沉淀 ；5、R2为含氮杂环 ，发生生物碱样沉淀 与硫酸铜反应磺胺嘧啶铜盐沉淀为黄绿色，放置后变为紫色与硫酸铜反应磺胺异噁唑铜盐沉淀为淡棕色，放置后析出暗绿色絮状沉淀与硫酸铜反应药物鉴别：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象磺胺甲噁唑本类药物磺酰胺基上的氢原子具有酸性，在碱性溶液中可以生成钠盐，钠盐可以和金属离子生成难溶性沉淀。取本品约0.1g，加水与0.4%氢氧化钠溶液各3ml，振摇使溶解，滤过，取滤液，加硫酸铜试液1滴。草绿色沉淀磺胺异噁唑显淡棕色，放置后析出暗绿色絮状沉淀磺胺嘧啶黄绿色沉淀，放置后变为紫色含量测定药物名称测定方法测定原理测定条件操作方法计算（公式）磺胺嘧啶锌软膏亚硝酸钠滴定法结构中含有游离的芳伯胺基取本品约5g，精密称定，置烧杯中，加三氯甲烷30ml。微温搅拌使基质溶解，放冷，照永停滴定法（附录VII A），用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定磺胺异噁唑非水酸量法结构中的磺酰胺基的酸性二甲基甲酰胺为溶剂；偶氮紫为指示剂；甲醇钠为滴定液滴定取本品约0.5g，精密称定，加二甲基甲酰胺40ml使溶解，加偶氮紫指示剂3滴，用甲醇钠滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液恰显蓝色，将滴定结果用空白试验校正。复方磺胺嘧啶片紫外可见分光光度法-双波长分光光度法本类药物结构中具有共轭体系，在待测组分的最大吸收波长（测定波长）处测定待测组分和干扰组分的吸收度总和；另选一适当波长（参比波长）测定吸收度，并使干扰组分在测定波长和参比波长处的吸收度相等，而待测组分在这两个波长处吸收度的差值足够大酸性条件下（冰醋酸）；干扰组分在两个波长处吸收度相等；待测组分在两个波长处吸收度相差足够大。 精密称取上述研细的细粉适量(约相当于甲氧苄啶40mg),置100ml量瓶中, 加 冰醋酸30ml振摇使甲氧苄啶溶解，加水稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液; 另精密称取甲氧苄啶对照品40mg与磺胺嘧啶对照品约0.3g, 分置100ml量瓶中, 各加冰醋酸30ml溶解, 加水稀释至刻度, 摇匀, 前者作为对照品溶液(1), 后者滤过, 取续滤溶液作为对照品溶液(2)。精 密量取供试品溶液与对照品溶液(1) (2)各5ml，分置100ml量瓶中, 各加盐酸溶液(91000)稀释至刻度, 摇匀, 照分光光度法(附录 A), 取对照品溶液(2)的稀释液, 以308.0nm为参数比波长1, 在277.4nm波长附近(每间隔0.2nm)选择等吸收点波长为测定波长(2), 要求2-10。 再在2和1 波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)的稀释液的吸收度, 求出各自的吸收度差值(), 计算, 即得。喹诺酮类药物： 母核为 4-喹诺酮-3-羧酸重点药物：名称结构式性质鉴别个性共性诺氟沙星6-位为F取代基；7-位为哌嗪基1、酸碱两性；2、不稳定性；3、具有共轭体系； 4、6-位为F取代基。有机氟化物的鉴别氧氟沙星6-位为F取代基；7-位为哌嗪基有机氟化物的鉴别奈啶酸6-位无F取代基；7-位为甲基。丙二酸呈色反应药物鉴别：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象氧氟沙星结构中的叔胺基团与丙二酸和醋酐共热，生成有色产物取本品细粉适量（约10mg）,置干燥具塞试管中，加丙二酸约10mg与醋酐0.5ml，水浴加热510分钟红棕色诺氟沙星甲磺酸培氟沙星甲磺酸盐加碱共热分解生成亚硫酸盐，酸化分解出具有还原性的二氧化硫；二氧化硫在酸性条件下还原碘酸钾析出碘，遇淀粉显蓝色。取本品约30mg,加氢氧化钠0.2g，加水数滴，溶解后置酒精灯上小火蒸干至碳化，加水数滴与2mol/L盐酸溶液34ml，缓缓加热，即产生二氧化硫气体，能使湿润的碘化酸钾淀粉试纸显蓝色。蓝色杂质检查：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象限量计算澄清度检查喹诺酮类药物易溶于碱液中，杂质不溶于碱液中取本品5份，各0.5g，分别用氢氧化钠试液10ml溶解溶液应澄清，如显浑浊，与2号浊度标准液比较，不得更浓吸光度喹诺酮类药物在可见光区（420450nm波长）无吸收取本品，精密称定，加0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含0.4mg的溶液，测定其在440nm波长处地吸光度。吸光度不得超过0.15光学异构体喹诺酮类药物结构中具有手性原子取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含20mg的溶液，依法测定（附录VI E）。比旋度应为-47至-52。含量测定：药物名称测定方法测定原理操作方法计算（公式）吡哌酸原料非水碱量法吡啶环上的N原子显弱碱性取本品约0.2g，精密称定，加冰醋酸20ml溶解后，加结晶紫指示液一滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显纯蓝色，将结果用空白试验校正诺佛沙星紫外分光光度法（对照比较法）结构中具有共轭体系取本品适量（约5mg），置于分液漏斗中，加三氯甲烷15ml，振摇后，用氯化钠饱和的0.1%氢氧化钠溶液25ml、20ml、20ml、10ml分次提取，合并提取液，置100ml量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，用0.4%氢氧化钠溶液定量稀释成每1ml中含5ug的溶液，照紫外-分光光度法（附录IV A），在273nm波长处测定吸光度；另取诺氟沙星对照品适量，精密称定，加0.4%氢氧化钠溶液溶解并定量稀释成每1ml约含5ug的溶液，同法测定。第9章杂环类药物的分析 第1节吡啶类药物的分析 字体：小四一、重点药物：名称结构式性质鉴别杂质检查含量测定个性共性异烟肼吡啶环位上被酰肼基取代（强还原性），可被氧化，羰基缩合吡啶环的性质：如环上氮原子为碱性；均有共轭体系；吡啶环开环反应；水解性二硝基氯苯反应；酰肼基的还原反应与缩合反应游离肼的检查；Hplc溴酸钾滴定法；溴量法；紫外尼可刹米吡啶环位上被酰氨基取代，遇碱水解释放乙二胺（碱性）戊烯二醛反应；分解产物的反应不加校正因子的主成分自身对照法非水碱量法；紫外硝苯地平二氢吡啶的还原性二氢吡啶的解离反应Hplc铈量法；紫外二、药物鉴别：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象戊烯二醛反应(尼可刹米)溴化氰作用于吡啶环，使环上氮原子由3价转变为5价，环水解，形成戊烯二醛，再与苯胺缩合，形成黄色的戊烯二醛衍生物取本品1滴，加水50ml，摇匀，分取2ml，加溴化氰试液2ml与2.5%苯胺溶液3ml，摇匀溶液渐显黄色二硝基氯苯反应（异烟肼）在无水条件下，吡啶及其某些衍生物与2，4-二硝基氯苯混合共热或共热至熔融；冷却后，加醇制氢氧化钾试液使残渣溶解取本品适量（25mg），加乙醇5ml，加硼砂0.1g及5%的2，4-二硝基氯苯乙醇溶液5ml，水浴蒸干，继续加热10分钟，残渣加甲醇10ml搅拌溶解溶液显紫红色酰肼基的还原反应（异烟肼）酰肼基具有还原性，可还原硝酸银为单质银，在试管壁上形成银镜，肼基被氧化生成氮气取本品约10mg，置试管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸银试液1ml即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜酰肼基的缩合反应（异烟肼）酰肼基与芳醛缩合生成腙与香草醛反应生成异烟腙黄色结晶，并具有固定的熔点分解产物的反应（尼可刹米）尼可刹米与氢氧化钠试液共热，分解产生二乙胺，有臭味，并能使湿润的红色石蕊试纸变蓝取本品10滴，加氢氧化钠试液3ml，加热即发生二乙胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色二氢吡啶的解离反应（硝苯地平）二氢吡啶类药物与碱作用，二氢吡啶环1，4-位氢均可发生解离，形成p-共轭而发生颜色变化。取本品约25mg，加丙酮1ml溶解，加20%氢氧化钠溶液35滴，振摇溶液显橙红色三、杂质检查：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象限量计算薄层色谱法检查游离肼异烟肼制备时原料反应不完全、或储存过程中降解均可引入游离肼取本品，加丙酮-水（1：1）溶解并稀释制成每1ml中约含100mg的溶液，作为供试品溶液；另取硫酸肼对照品，加丙酮-水（1：1）溶解并稀释制成每1ml中约含0.08mg（相当于游离肼20ug）的溶液，作为对照品溶液；取异烟肼与硫酸肼各适量，加丙酮-水（1：1）溶解并稀释制成每1ml中分别含异烟肼100mg及硫酸肼0.08mg的混合溶液，作为系统适用性试验溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-丙酮（3：2）为展开剂，展开，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15分钟后检视系统适用性试验溶液所显游离肼与异烟肼的斑点应完全分离游离肼的Rf值约为0.75，异烟肼的Rf值约为0.56.在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液主斑点相应的位置上，不得显黄色斑点Hplc法检查(异烟肼)取本品，加水溶解并稀释制成1ml中约含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照含量测定顶下的色谱条件，取对照溶液10ul注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成份色谱峰的峰高约为满量程的20%；再精密量取供试品溶液与对照溶液各10ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成份峰保留时间的3.5倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.35倍，各杂质锋面积的和不得大于对照溶液主峰面积（1.0%）不加校正因子的主成分自身对照法（尼可刹米）生产储存过程中易引入N-乙基烟酰胺和化学结构不明的有关物质取本品适量，用水稀释制成每1ml中约含4mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水（30：70）为流动相，检测波长为263nm。理论板数按尼可刹米峰计算不低于2000，尼可刹米峰与其相邻杂质峰的分离度应符合要求。取对照溶液10ul注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%。精密量取供试品溶液与对照溶液各10ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成份峰保留时间的2倍。供试品溶液色谱图中有无杂质峰如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍（0.5%）Hplc法检查(硝苯地平)硝苯地平遇光极不稳定，易发生光化学歧化作用，降解为硝苯吡啶衍生物避光操作，取本品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为供试品溶液；另取2，6-二甲基-4-（2-硝基苯基）-3，5-吡啶二甲酸二甲酯（杂质I）对照品与2，6-二甲基-4（2-亚硝基苯基）-3，5-吡啶二甲酸二甲酯（杂质II）对照片，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中各约含10ug的混合溶液，作为对照品储备液；分别精密量取供试品溶液与对照品储备液各适量，用流动相定量稀释制成每1ml中分别含硝苯地平2ug、杂质I1ug与杂质II1ug的混合溶液，作为对照溶液。照高效液相色谱法试验。供试品溶液的色谱图中如有与杂质I峰、杂质II峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，均不得过0.1%，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中硝苯地平峰面积（0.2%）；杂质总量不得过0.5%四、含量测定：药物名称测定方法测定原理测定条件操作方法注意事项计算（公式）异烟肼溴酸钾滴定法异烟肼具有还原性，在强酸性介质中可被溴酸钾氧化，溴酸钾被还原为溴化钾。可在强酸性介质中用溴酸钾直接滴定取本品约0.2g，精密称定，置100ml 量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度。摇匀；精密量取25ml，加水50ml、盐酸20ml与甲基橙指示液1 滴，用溴酸钾滴定液(0.01667mol/L)缓缓滴定（温度保持在1825）至粉红色消失。每1ml溴酸钾滴定液(0.01667mol/L)相当于3.429mg 的C6H7N3O 。 1.温度应控制在1825，缓缓滴定并充分振摇，防止局部浓度过高终点提前；2.甲基橙为不可逆的氧化还原指示剂，到终点后，补加一滴指示剂，如颜色褪去即可，否则未到终点；3.加入盐酸是滴定反应的基本条件。异烟肼溴量法酰肼基具有较强还原性，被定量过量的溴氧化，剩余的溴用碘量法测定稀盐酸介质精密量取本品约相当与异烟肼0.4g，加水稀释至250ml，摇匀。精密量取25ml，置具塞锥形瓶中，精密加溴滴定液25ml，再加盐酸5ml，立即密塞并振摇1min，在暗处静置15min，注意微开瓶塞，加碘化钾1g，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。注意微开瓶塞硝苯地平铈量法二氢吡啶类药物的还原性，可用铈量法测定含量取本品约0.4g，精密称定，加无水乙醇50ml，微温使溶解，加高氯酸溶液50ml、邻二氮菲指示液3滴，立即用硫酸铈滴定液滴定，至终点时，在水浴中加热至50左右，继续缓缓滴定至橙红色消失，并将滴定的结果用空白试验校正尼可刹米（原料药）非水碱量法吡啶环具有碱性，在冰醋酸溶液中与高氯酸定量反应生成高氯酸盐，以结晶紫为指示剂冰醋酸溶液中取本品约0.15g ，精密称定，加冰醋酸10ml与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml 高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于17.82mg 的C10H14N2O 。尼可刹米（注射液）紫外-可见分光光度法为避免注射液中的水分对非水滴定法的干扰，尼可刹米分子中的吡啶环为共轭体系，故采用吸收系数测定含量。用移液管精密量取本品2ml ，置200ml 量瓶中，用0.5硫酸溶液分次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加0.5硫酸溶液稀释至刻度，摇匀；精密量取适量，加0.5硫酸溶液定量稀释成每1ml 中约含尼可刹米20g的溶液，照紫外-可见分光光度法，在263nm 的波长处测定吸光度，按C10H14N2O 的吸收系数（1%1cm）为292 计算，即得。尼可刹米与硫酸成盐后易溶于水，因此采用0.5%的硫酸溶液溶解样品。异烟肼高效液相色谱法高效液相色谱法通过分离可消除有关物质及制剂中辅料的干扰，测定含量取本品精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，精密量取10ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取异烟肼对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得第2节吩噻嗪类药物的分析名称结构式性质鉴别杂质检查含量测定个性共性盐酸氯丙嗪1.紫外吸收光谱特征2.易氧化呈色3.与金属离子络合呈色4.弱碱性紫外与红外；显色反应TLC或HPLC非水碱量法；紫外；盐酸异丙嗪紫外与红外；显色反应TLC或HPLC钯离子比色法；紫外奋乃静紫外与红外TLC或HPLC非水碱量法；紫外；钯离子比色癸氟奋乃静紫外与红外；钯离子络合显色；分解产物反应TLC或HPLC紫外盐酸氟奋乃静紫外与红外TLC或HPLC紫外二、药物鉴别：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象紫外与红外吩噻嗪类药物的紫外吸收特征性强，且随2位和10位上取代基的不同，可引起最大吸收峰的位移取本品细粉适量，加三氯甲烷10ml，研磨溶解滤过，滤液水浴蒸干，残渣经减压干燥，测定紫外与红外吸收特征；显色反应可被氧化剂氧化呈色，且药物不同，颜色也有差异取本品 5mg，加盐酸与水各 1ml，加热至80，加入过氧化氢溶液数滴，即显深红色；放置后，红色渐褪去。 即显深红色；放置后，红色渐褪去。与钯离子络合显色硫氮杂蒽母核中未被氧化的硫原子可与钯离子在适当的PH溶液中络合显色取本品约5mg，加甲醇2ml溶解后，加0.1%氯化钯溶液3ml即有沉淀生成，并显红色，再加过量的氯化钯溶液，颜色变深分解产物的反应含氟有机药物与碳酸钠及碳酸钾在600炽灼，分解成氟化物取本品1520mg，加碳酸钠与碳酸钾各约0.1g，混匀600炽灼1520min，放冷，加水2ml使溶解，加盐酸溶液酸化，滤过，滤液加茜素锆试液0.5ml黄色四、含量测定：药物名称测定方法测定原理测定条件操作方法注意事项计算（公式）盐酸氯丙嗪（原料药）非水碱量法具有碱性，在冰醋酸溶液中与高氯酸定量反应生成高氯酸盐取本品约0.2g，精密称定，加冰醋酸10ml与乙酸酐30ml溶解后，照电位滴定法，用高氯算滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正本品为盐酸盐，盐酸在冰醋酸中酸性较强，对测定有干扰，加入醋酸汞使其生成难解离的氯化汞，将药物转变成可测定的醋酸盐，可排除干扰 盐酸氯丙嗪（注射液）紫外分光光度法制剂中有附加剂的干扰，且该药物有紫外吸收，故采用该法测定，以吸收系数计算，避光操作。避光操作精密量取本品适量（约相当于盐酸氯丙嗪50mg），置250ml量瓶中，加盐酸溶液(91000) 至刻度，摇匀；精密量取10ml，置50ml量瓶中，加盐酸溶液(91000) 至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在306nm 的波长处测定吸光度，按C17H19ClN2SHCl 的吸收系数（1%1cm）为115 计算，即得氯丙嗪在254nm处有最大吸收，片剂采用254nm波长处，吸收系数为（1%1cm）915，但注射液中含抗坏血酸（抗氧剂），在254nm也有强吸收，对测定有干扰，故选用306nm处测定。 奋乃静钯离子比色法吩噻嗪类药物在适当PH的溶液中，可与钯离子形成有色络合物，在500波长附件有最大吸收取适量（相当于6mg），置25ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置125分液漏斗中，加水25ml，加氨试液调节ph为1011，用三氯甲烷振摇提取4次，每次20ml，以置有无水硫酸钠5g的干燥滤纸滤过，合并滤液，置沸水浴上氮气流下蒸发至约5ml后，移开水浴，氮气流下吹干，残留物精密加入盐酸-乙醇溶液15.0ml溶解，必要时滤过。精密量取10ml，与氯化钯溶液15.0ml，混合均匀，必要时滤过，作为供试品溶液；以试剂作空白，在480nm波长下测紫外；另精密称取奋乃静对照品适量，加盐酸-乙醇溶液制成每1ml中约含160ug的溶液，作为对照品溶液，同法测定，计算，得盐酸氟奋乃静高效液相色谱法测定法：精密量取本品适量（约相当于盐酸氟奋乃静10mg），置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸氟奋乃静对照品，同法测定，用外标法以峰面积计算，即得奋乃静非水碱量法具有碱性，在冰醋酸溶液中与高氯酸定量反应生成高氯酸盐取本品适量（约相当于奋乃静125mg），置分液漏斗中，加氢氧化钠试液2ml使成碱性，用三氯甲烷振摇提取4次，每次20ml，合并提取液，以置有无水硫酸钠5g的干燥滤纸滤过，滤液置水浴上蒸干，加冰醋酸10ml溶解，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液滴定，空白校正第3节苯并二氮卓类药物的分析名称结构式性质鉴别试验杂质检查含量测定个性共性氯氮卓1. 弱碱性，UV2.在酸性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮衍生物。 3. 含卤素沉淀反应；水解后重氮化偶合反应水解后呈茚三酮反应 HPLC非水碱量法；地西泮沉淀反应；硫酸-荧光反应；分解产物的反应；水解后呈茚三酮反应 HPLC非水碱量法；HPLC二、药物鉴别：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象沉淀反应 含氮杂环，可与生物碱沉淀试机反应生成沉淀取本品约 10mg，加盐酸溶液（91000）10ml 溶解后，加碘化铋钾试液 1 滴，即生成橙红色沉淀；水解后重氮化偶合反应二氮杂卓环在盐酸溶液中，加热煮沸，水解开环，产生芳伯氨基取本品约 10mg，加盐酸溶液（12）15ml，缓缓煮沸 15 分钟，放冷， 溶液显芳香第一胺类的鉴别反应（附录）。水解后呈茚三酮反应 取本品约5mg，加甲醇2ml溶解后，加0.1%氯化钯溶液3ml即有沉淀生成，并显红色，再加过量的氯化钯溶液，颜色变深硫酸荧光反应苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸或稀硫酸后，在紫外光365nm下，呈现不同荧光取本品约 10mg，加硫酸3ml，振摇使溶解，在紫外灯（365nm）下检视氯氮卓黄色艾司唑仑亮绿色硝西泮淡蓝色分解产物的反应 本类药物多为有机氯化物取本品 20mg，照氧瓶燃烧法（附录 C）进行有机破坏，以 5% 氢氧化钠溶液 5ml 为吸收液，燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓煮沸 2 分钟溶液显氯化物的鉴别反应（附录 ）。三、杂质检查：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象限量计算TLC与HPLC 游离肼的Rf值约为0.75，异烟肼的Rf值约为0.56.在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液主斑点相应的位置上，不得显黄色斑点四、含量测定：药物名称测定方法测定原理测定条件操作方法注意事项计算（公式）原料药非水碱量法原料药含量测定，氮原子碱性极弱片剂紫外原料药含量测定，氮原子碱性极弱注射液高效液相色谱法紫外分光光度法：片剂含量测定两者均用该法，均检查溶出度第10章生物碱类药物的分析 一、重点药物：名称结构式性质鉴别杂质检查含量测定个性共性盐酸麻黄碱旋光性+碱性光谱特征双缩脲反应非水碱量法硫酸阿托品水解性旋光性Vataili反应旋光法：检查莨菪碱非水碱量法酸性染料比色法盐酸吗啡旋光性 Marquis反应 Frohde反应显色反应：检查阿扑吗啡非水碱量法直接UVHPLC硫酸奎宁水解性旋光性绿奎宁反应TLC：检查其他金鸡纳碱非水碱量法利血平水解性旋光性与香草醛反应UV：检查氧化产物非水碱量法咖啡因无旋光紫脲酸胺反应TLC：检查有关物质非水碱量法二、药物鉴别：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象双缩脲反应在碱性条件下，铜离子与仲胺基形成蓝紫色配位化合物。无水以及二分子水的配位化合物易溶于乙醚呈紫红色，四分子水的配位化合物则溶于水呈蓝色。+硫酸铜试液，氢氧化钠溶液。出现颜色反应后，再+乙醚水层：蓝色乙醚层：紫红色Vataili反应托烷生物碱类的酯基易水解生成莨菪酸，莨菪酸用发烟硝酸加热处理，生成黄色三硝基衍生物水解，+发烟硝酸，加热黄色绿奎宁反应6-位含氧喹啉经溴水氧化，溴化，与氨水缩合+溴试液，氨试液翠绿色Marquis反应含酚羟基的异喹啉类生物碱与甲醛-硫酸反应，生成具有醌式结构的有色化合物+甲醛-硫酸紫堇色香草醛反应吲哚环上-位氢原子较活泼，能与香草醛发生缩合而显色+香草醛试液玫瑰红色紫脲酸胺反应+HCl,氯酸钾，蒸干，通入氨气紫色三、杂质检查：名称（类）鉴别原理操作方法鉴别现象限量计算四、含量测定：药物名称测定方法测定原理测定条件操作方法注意事项计算（公式）盐酸麻黄碱非水碱量法在非水酸性介质中，生物碱类药物相对碱性显著增强，有明显滴定突跃，能用高氯酸直接滴定溶剂：冰醋酸滴定液：高氯酸终点指示方法：结晶紫指示剂或电位滴定法取本品约0.15g，精密称定，加冰醋酸10ml，加热溶解后，加醋酸汞试液4ml 与结晶紫指示液1 滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显翠绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于20.17mg 的C10H15NOHCl。乙酸汞毒性较大，可改用电位法指示终点标示量%=T（V-V0）F/W*100%磷酸氯喹注射液提取酸碱滴定法游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂。盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂碱化试剂：最常用氨水提取溶剂：氯仿 提取溶剂的用量及提取次数： 通常应提取4次，第一次用量至少应为水液体积的一半，以后几次应各为第一次的一半 提取终点的确：定 用合适的沉淀反应确定指示剂的选择 乳化的预防和消除精密量取本品适量（约相当于磷酸氯喹0.3g），用水稀释至30ml，加20%氢氧化钠溶液3ml，摇匀，用乙醚提取4次，每次20ml，合并乙醚液，用10ml水洗涤，水洗涤液再用15ml乙醚提取1次，合并前后两次的乙醚液，蒸发至近23ml时，精密加盐酸滴定液（0.1mol/L）25ml，温热蒸去乙醚并使残渣溶解，冷却，加溴甲酚绿指示液数滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml盐酸滴定液（0.1mol/L）相当于25.79mg的C18H26ClN32H3PO4。标示量%=TVF/W*100%硫酸阿托品片 气相色谱法pH9.0 条件下，氢氧化钠碱化，二氯甲烷提取，GC法测定，内标法定量硫酸吗啡反相 高效液相色谱法 1. 加扫尾剂法 分离依据物质的极性及溶解性。在流动相中加入扫尾剂，最常用的扫尾剂是三乙胺2. 用硅胶作固定相法