《医学免疫学与病原生物学实验》课程教学大纲.doc

医学免疫学与病原生物学实验课程教学大纲山东大学医学院医学免疫学与病原生物学实验课程实验教学大纲课 程 名 称： 医学免疫学与病原生物学实验 英 文 名 称： Medical immunology and Pathogenic Biology Experiment课 程 编 号： 实 验 课 性 质： 融合创新性实验课 程 负 责 人：于修平 开放实验项目数：大 纲 主 撰 人： 周亚滨 齐眉 何深一 郭淑玲 袁方曙 马春红 王晓燕、梁晓红 大 纲 审 核 人： 于修平 一、学时、学分课程总学时： 实验学时：24 课程总学分： 实验学分：二、适用专业及年级供基础、临床、预防、口腔医学、护理学、药学专业用5、6、7年制三、实验教学目的与基本要求通过融合性实验教学，将医学微生物学、人体寄生虫学以及医学免疫学的理论知识和实验技术进行有机整合，培养学生的综合思维能力和应用能力。同时通过实验教学，使学生学会使用医学机能学实验常用的仪器，培养学生动手能力、发现问题和解决问题的能力。通过病例分析，培养学生综合运用所学知识解决实际问题的能力。通过实验设计，培养学生自主科研能力和创新意识。四、主要仪器设备 超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱、流式细胞仪、酶标仪, 紫外可见分光光度计、PCR扩增仪、医学图像分析系统等。五、实验课程内容和学时分配序号实验项目名 称实 验 内 容学时分配实验要求指导教师已开/未开1小儿腹泻的病原体检测1肠道致病菌的微生物学检查：通过分离培养、生化反应等对标本中的可疑致病菌进行鉴定； 2A组轮状病毒感染的实验室检测：通过ELISA、PCR技术检测标本中轮状病毒的存在情况；3肠道腹泻原虫的实验室检查：通过直接涂片、碘液染色、抗酸染色等对标本中的可疑原虫进行检测、鉴定。 8分小组进行周亚滨齐眉等已开2人体蠕形螨的检查方法 （1）用刮片式取螨器取螨，28-30室温条件下，受检者皮肤微汗，毛孔微张为宜，受检者仰头有枕靠，助手将其额部皮肤张紧，检查者手持刮片式取螨器与受检者皮肤成60度角，加压刮取皮脂，用牙签将皮脂剃下。滴一滴液体石蜡于载玻片上，将剃下的皮脂溶于液体石蜡中，用牙签尽量将皮脂块碾碎，搅匀。将制好的标本置于显微镜下，用低倍镜和高倍镜观察。（2） 用镊取螨器取螨，同样室温条件下，受检者仰头，检查者站其背后，用拇指将被检侧的鼻翼按压推向对侧，充分暴露展平其鼻唇沟，检查者手持镊式取螨器于鼻唇沟处加压镊取皮脂，同样方法将皮脂溶于液体石蜡中，用牙签尽量将皮脂块碾碎，搅匀后，镜检。4分小组进行郭淑玲袁方曙何深一杨青已开3食用猪肉和淡水鱼的检疫（1）猪肉压片检查旋毛虫幼虫：用手术镊取猪横纹肌一块（绿豆粒大小）置于两张载玻片之间，用牙签蘸一滴甘油滴在肌肉上，稍用力夹紧两玻片，把肌肉压扁，玻片两端用棉线捆扎，放在低倍镜下检查，注意囊包的形状和囊内幼虫的形状。（2）猪囊尾蚴压片检查：用镊子从鲜肉中取一粒囊尾蚴，用镊子将囊壁挑破，然后把囊尾蚴夹于两张载玻片之间，用力把虫体压扁，玻片两端用棉线捆扎，放在低倍镜下检查，注意虫头上有无吸盘和小钩。（3）鱼肉压片检查检查肝吸虫囊蚴：一条或一块鲤科淡水鱼放在洁净的器械盘中，用手术刀和镊子刮去脊背处的鱼鳞，撕去鱼皮，从鱼的背部镊取一小块肌肉（绿豆粒大小；绝大部分囊蚴分布在背部及肛区至尾鳍的基部）放在两张载玻片之间，用力压薄，用棉线扎紧玻片两端，放在低倍镜下检查。囊蚴呈椭圆形，可见囊壁和排泄囊，必要时要与其它吸虫的囊蚴（如猫后睾吸虫等）相区别。4分小组进行袁方曙何深一郭淑玲杨青已开4卡介苗免疫后对T细胞亚群的影响1利用卡介苗给小鼠皮下注射，每周一次，共两次。 2处死小鼠，取出脾脏，研磨，获得单细胞悬液。 3利用氯化铵破红细胞，离心获得脾细胞，计数。 4分别利用荧光标记的CD4和CD8单抗标记脾细胞，在流式细胞仪上检测CD4和CD8阳性T细胞的比例。4分小组进行王晓燕梁晓红朱法良已开5肿瘤坏死因子的诱生及活性测定 TNF-a的诱生：（1）将小鼠巨噬细胞种板，常规培养24h；（2）加入LPS刺激，继续培养24h；（3）收集培养上清。TNF-a活性检测：（1）将L929细胞种板，常规培